γ射线辐照对β淀粉样肽诱导红细胞膜损害的作用

-本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载-射线辐照对淀粉样肽诱导红细胞膜损害的作用本文从网络收集而来，上传到平台为了帮到更多的人，如果您需要使用本文档，请点击下载按钮下载本文档（有偿下载），另外祝您生活愉快，工作顺利，万事如意！【摘要】 目的： 研究 射线辐照对淀粉样肽(A)诱导的红细胞膜损害的保护作用. 方法 ： 红细胞经50 Gy和100 Gy 射线照射后，再用A处理，分别用分光光度法测定红细胞溶血率和渗透脆性；扫描电镜观察细胞形态；1,6二苯基1,3,5己三烯（DPH）荧光探针标记检测细胞膜流动性. 结果： 射线辐照可抑制红细胞的 自然 溶血和A导致的溶血，但只有100 Gy辐照的差异具有统计学意义（P ），使自然溶血率和A引起的溶血率由（）%，（）%分别降至（）%和（）%. 50 Gy和100 Gy的辐照均可降低A引起的细胞变形程度，增加细胞膜的流动性（P ），荧光探针的各相异性值由分别降至和，并提高红细胞对低渗溶液的耐受性，50%溶血时的NaCl浓度由 mmol/L分别降至 mmol/L和 mmol/L. 结论： 在本实验条件下，射线辐照可降低A对红细胞膜的损伤，并可增加红细胞膜的流动性及稳定性. 【关键词】 射线； 淀粉样蛋白； 红细胞； 溶血； 膜流动性 0引言 低剂量射线辐照（ 1 Gy）可刺激机体的免疫功能，提高机体的抗病能力1. 目前 ，临床上常用1535 Gy的射线对血液进行辐照，灭活血液中的淋巴细胞，以预防输血相关的免疫疾病2. 该剂量范围的辐射对血液中的其他成分也可产生一定的 影响 3-4. 红细胞在经400 Gy辐照后，短时间内可增加细胞的稳定性5. 本研究采用小于100 Gy的射线处理红细胞，以淀粉样肽（amyloid peptide, A）诱导红细胞膜损害为实验模型，研究此剂量范围的辐射对红细胞某些性质的影响，以及对A的细胞毒性的作用. 1材料和方法 材料新鲜全血取自健康志愿者，枸醛酸抗凝；A和荧光探针1,6二苯基1,3,5己三烯（diphenylhexatriene, DPH）（美国SigmaAldrich公司）；其它试剂均为国产 分析 纯. 1240型紫外可见分光光度计 (日本岛津公司)；LS55型荧光分光光度计（美国PerkinElmer公司）；3k30型冷冻离心机（美国Sigma公司）；Gammacell R 1000型血液辐照仪 (加拿大Nordian公司)；Quanta 200型环境扫描电镜（荷兰PhilipsFEi公司）. 方法 红细胞的制备和辐照处理取新鲜全血750 g，4离心10 min，吸去上层血浆和白细胞，并用等渗PBS（150 mmol/L NaCl， mmol/L KCl，10 mmol/L Na2HPO4，2 mmol/L NaH2PO4，pH ）洗涤3次,制备成200 mL/L细胞悬液，然后用射线照射，照射剂量分别为0，50和100 Gy. 红细胞溶血率的检测照射过后的红细胞悬液用等渗PBS稀释至20 mL/L，加入A使其终浓度为5 mg/L，37水浴30 min后取出，750 g，4离心10 min，取上清， 540 nm处测出吸光度值A1；沉积红细胞用蒸馏水全溶血后离心，用同样方法测得吸光度值A2. 按下式 计算 溶血率：溶血率（%） = A1/（A1+A2） 100%. 扫描电镜观察红细胞形态处理过的红细胞经终浓度为10 g/L戊二醛固定，用500，700，900，1000 mL/L丙酮系列脱水，喷金后进行扫描电镜观察. 红细胞的渗透脆性测定红细胞分为未照射组，50 Gy照射组和100 Gy照射组. 配制不同渗透压的PBS，其中NaCl的浓度为0135 mmol/L，在上述PBS中分别加入各组红细胞悬液，细胞终浓度为2 mL/L，37水浴30 min，取出后以中的方法分别测溶血率，以NaCl浓度分别为135 mmol/L和0 mmol/L的PBS为对照和全溶血对照，计算50%溶血时的NaCl浓度. 红细胞膜流动性的检测用四氢呋喃作溶剂配制210-3mol/L的DPH储存液,于棕色瓶中4低温保存. 工作液浓度为510-5mol/L,临用前用等渗PBS稀释. 红细胞用等渗PBS稀释至2 mL/L浓度，与DPH工作液等体积混合，于37水浴孵育45 min后，检测偏振荧光（激发光波长为362 nm，发射光波长为450 nm）. 统计学处理： 用统计软件进行处理，实验数据以xs表示，多个样本均数比较采用方差分析及t检验. 2结果 红细胞的溶血率在未经辐照处理的情况下，等同实验操作可使红细胞发生少量溶血（溶血率 4%），而在红细胞经射线照射后，自然溶血率随着辐照增加而降低，在100 Gy时自然溶血率由（）%降至（）%，差异具有统计学意义（P ）. 加入A后可导致红细胞溶血率增高至（）%（P ），红细胞经射线照射后，A导致的溶血作用降低，50 Gy照射组虽低于对照组，但差异无统计学意义(P )，而100 Gy辐照则使A的溶血作用降低至（）%，其差异具有统计学意义（P ）. 12下一页欢迎浏览更多论文联盟首页 医学论文 西医学论