（参考课件）Rh血型鉴定完整版.ppt

1,教案编制,授课内容：Rh血型系统授课学时：1学时重点内容：Rh血型抗原与抗体及临床意义；交叉配血熟习内容：Rh血型鉴定方法。了解内容：其它红细胞血型系统,医学全在线网站,二.Rh血型系统,Rh血型系统的发现1937年-1939年Landsteiner和Wiener用恒河（rhesus）红细胞免疫家兔和豚鼠得到的抗血清将人红细胞分为Rh阴性和Rh阳性1939年Levine和Stetsen在一患死胎的孕妇血清中检测到一种抗体，此为人类发现的第一例Rh抗体1941-1945年确定了人体红细胞上含有Rh系统的六种抗原，即D、d；E、e；C、c。D和d；E和e；C和c表现为对偶关系，但d抗原只是推测。,2,Rh血型的定义,根据红细胞上D抗原的有无可将人类红细胞分为Rh阳性和Rh阴性，即红细胞上缺乏D抗原的人是Rh阴性；红细胞有D抗原的人是Rh阳性Rh血型的遗传学说及命名Rh-Hr命名法（Wiener学说）CDE命名法（Fisher-Race学说）数字命名法,3,4,.Rh抗原Rh抗原有40多种，Rh抗原的发育Rh抗原是胎儿早期就充分发育并维持整个一生，脐带血或新生儿的红细胞Rh血型与成人一样强。与临床关系最密切：D、E、C、c、e5种，D的抗原性最强。抗原强弱次序为DECce我国Rh频率约占人群中的0.34%,二.Rh血型系统,医学全在线网站,5,Rh血型的D变异型,D变异型的定义：有些含D抗原的红细胞与某些抗D血清反应，而与另一些抗D血清不反应，这些红细胞所含的D抗原可能缺少完整D抗原的某些成份或者呈现很弱的抗原活性，这些D抗原统称为D变异型。D变异型包括弱D型（Du）和不完全D型（partialD）,6,7,D变异型抗原的特点与一些抗D血清发生凝集反应，而与另一些抗D血清不发生凝集反应，要证实这种弱表现的D抗原，需用间接抗球蛋白试验。,8,9,.Rh系统抗体多是通过外来RBC免疫刺激后产生，即通过输血或妊娠免疫而产生。这些抗体均为IgG。一般在初次免疫后26个月内出现，经再次免疫后，3周内抗体浓度可达到高峰。大约1/3的Rh阴性的人，经Rh阳性抗原免疫后，不产生抗D.非免疫的Rh抗体极为罕见.D抗原是非ABO红细胞抗原中免疫性最强的抗原，可以引起抗D的产生，抗D与D红细胞产生严重的溶血反应。,.Rh血型鉴定,常规情况下，红细胞只做Rh（D）定型，对供血者需鉴定D变异型，只有特殊情况下才检查其它抗原。例如：家系调查、父权鉴定、产前检查、确定纯合子或杂合子以及配血试验中发现有不规则抗体存在等情况下才需做Rh血型全部表现型的定型,医学全在线网站,10,11,1.Rh血型鉴定及方法学评价：Rh抗体属IgG不能在盐水介质中与RBC发生凝集。(1).低离子强度盐水试验原理：降低介质的离子强度可减少RBC外围的离子云促进IgG分子在两个RBC之间搭桥使之结合，能缩短抗原与抗体的反应时间，并提高其灵敏度。,12,(2).抗人球蛋白法：又称Coombs试验,直接法：可检查受检者的RBC是否已被不完全抗体致敏；,间接法：可用于鉴定Rh血型及血清中是否存在不完全抗体。,13,(3).酶介质法：原理：木瓜酶或菠萝酶可以破坏RBC表面的唾液酸，使RBC膜失去电荷，缩小RBC间的距离；酶可以部分地改变RBC结构，使某些隐蔽的抗原得以暴露，增强凝集性(4).聚凝胺法：本法用于临床配血是切实可行的。,2.Rh血型鉴定可能出现假阳性的原因,受检细胞直抗阳性高蛋白试剂引起缗钱状凝集纤维蛋白造成的凝块定型试剂中存在的其它抗体多凝集细胞造成的假阳性鉴定器材和试剂血清被污染,医学全在线网站,14,3.Rh血型鉴定可能出现假阴性的原因,受检细胞悬液浓度太高，与试剂血清比例失调。漏加或错加定型试剂观察结果时摇动用力过度，摇散弱凝集。试剂血清保存不当引起变质,15,16,.RH血型的临床意义：1.与输血关系：Rh第一次接受Rh血液不溶血，产生抗体Rh第二次接受Rh血液产生大量的抗体，溶血2.与新生儿溶血病的关系：孕妇血浆中如有Rh抗体，妊娠Rh血型不配合胎儿时，其中IgG类的Rh抗体可以通过胎盘进入胎儿体内。,17,三、其它红细胞血型系统,MNSsU血型系统有40个抗原，基因表达产物为MN唾液酸糖蛋白、Ss唾液酸糖蛋白P血型系统Kell血型系统Kidd血型系统Lewis血型系统,18,【原理（principle）】(盐水法),（五）.交叉配血,19,【报告方式】1.如两管均无凝集，则报告：病人XX（X型）血清献血者XX（X型）红细胞有或无凝集溶血病人XX（X型）红细胞献血者XX（X型）血清有或无凝集溶血（XX配血法）2.任何一管或两管有凝集或溶血:立即复查血型或查明其他原因如实报告，并与病室联系，决不能随便输血。,20,盐水法评价,安全输血包括检测ABO相合与否，也包括免疫性抗体的检测。最初的交叉配血以盐水介质为主，而盐水介质实验只能发现ABO不配合，不能检出IgG抗体，所以血库标准不要求盐水介质实验的配血，而要求在血清学配合实验中使用能展示ABO不配合和在37有活性的、有临床意义重要抗体的方法。从安全输血的角度和今后发展趋势分析，盐水介质法将会和其他技术联合运用。,21,凝聚胺法【原理】,红细胞膜表面的唾液酸带有的大量的负电荷，可避免其发生自发凝聚，使红细胞保持最大的表面面积，增加氧的转移能力和气体扩散。红细胞悬浮在电解质内，阳离子被红细胞的负电荷吸引，红细胞被扩散的双层离子云围绕，形成zeta电位，它决定红细胞之间的排斥作用。,医学全在线网站,22,凝聚胺法步骤,Polybrene技术首先利用低离子介质（LIM），介质的离子强度是影响抗体结合红细胞原能力的重要理化条件之一，正负离子相互作用力-即静电力显著影响抗体与红细胞的反应。减低介质的离子强度，减少了红细胞周围的阳离子云，从而促进带正电荷的lgG与带负电荷的红细胞发生反应，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。其后，加入凝聚胺（Polybrene）试剂。凝聚胺是一种高价阳离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞膜表面的唾液酸带有的负电荷，使红细胞的zeta电位降低，红细胞之间距离减少，使红细胞发生凝聚。最后，加入复悬液