（内科学专业论文）趋化因子ccl20及其受体ccr6在胰腺癌组织中的表达及意义.pdf

目录 一、摘要 中文结构式摘要1 英文结构式摘要3 二、英文缩略语5 三、论文 1 b j o 日o 看“6 材料与方法6 结果7 讨论1 0 结论1 1 四、本研究创新点1 2 五、参考文献1 3 六、附录 综述1 6 致谢2 3 个人简介2 4 中文论著摘要 趋化因子c c l 2 0 及其受体c c r 6 在胰腺癌组织中的表 达及意义 目的 目前胰腺癌的发病率呈上升趋势，但术后5 年生存率仍然不到2 0 。早期诊断 的困难、术后易复发及缺乏有效的辅助治疗手段是其主要原因。越来越多的数据 表明，趋化因子及其受体在胰腺癌及其他多种癌症肿瘤生物学中起着重要作用。 本研究通过检测趋化因子c c l 2 0 及其受体c c r 6 在胰腺癌中的表达以及c c l 2 0 与 c c r 6 的相关性，旨在探讨两者在胰腺癌中的作用。 材料与方法 1 材料：( 1 ) 收集4 2 例中国医科大学附属盛京医院病理科2 0 0 5 年至2 0 0 8 年间 诊断为胰腺导管腺癌的组织蜡块。选取十二指肠肿物切除术所获得的1 0 例正常胰 腺组织为对照。( 2 ) 主要试剂：兔抗人c c l 2 0 和c c r 6 多克隆抗体购自北京博奥森生 物技术有限公司。即用型快捷免疫组化m a x v i s i o n 试剂盒( 鼠兔) 及m a x 0 0 7 伸原 位微信号( d a b ) 放大试剂盒购自福州迈新生物技术开发有限公司。 2 方法：应用免疫组化m a x v i s i o n 方法检测4 2 例胰腺癌组织及1 0 例正常胰腺组 织中c c l 2 0 及c c r 6 蛋白表达，并分析c c l 2 0 与c c r 6 的相关性。 3 统计学处理：应用s p s sv 1 3 0 软件对数据进行分析。 实验结果 1 胰腺癌组织中c c l 2 0 及c c r 6 的表达明显高于正常胰腺组织( p 0 0 5 ) 。c c l 2 0 与c c r 6 在胰腺癌中的表达呈正相关( r = 0 3 5 2 ，p = o 0 2 2 ) 。 2 c c l 2 0 蛋白表达与肿瘤病理特征分化程度相关( p 0 0 5 ) ，与年龄性别及 临床分期及淋巴结转移无明显相关：c c r 6 的表达与肿瘤病理特征均无相关。 结论 c c l 2 0 与c c r 6 在胰腺癌组织中的表达明显高于j 下常胰腺组织。这表明c c l 2 0 和 c c r 6 表达参与了胰腺癌的发生和发展。c c l 2 0 与c c r 6 两者相互作用可能在胰腺肿瘤 生物学中起着重要作用，并可能成为新一代治疗策略的潜在靶点。 关键词 胰腺癌，趋化因子，受体，免疫组织化学。 2 英文论著摘要 e x l n ds i g n i f i c a i n c eo fc h e m o k i n ec c l 2 0andxdressiona n l lo ii i e m o l o n ea ni n c e i t sr e c e p t o rc c r 6i np a n c r e a t i cc a n c e r a b s t r a c t c u r r e n t l y ，t h ei n c i d e n c eo fp a n c r e a t i cc a n c e ri so nt h er i s ei nc h i n a , w i t ha5 - y e a r p o s t - o p e r a t i v em o r t a l i t yb e i n go v e r9 5 d i f f i c u l t i e si ne a r l yd i a g n o s i s ，p o s t - o p e r a t i v e r e l a p s ea n dal a c ko fe f f e c t i v ea d j u v a n tt h e r a p i e sa r et h em a j o rc a u s e s a c c u m u l a t i n g d a t as u g g e s tt h a tc h e m o k i n e sa n dt h e i rr e c e p t o r sp l a yar o l ei nt h et u m o rb i o l o g yo f p c aa n dv a r i o u so t h e rt y p e so fc a n c e r t oi n v e s t i g a t et h ee x p r e s s i o n so fc h e m o k i n e c c l 2 0a n di t sr e c e p t o rc c r 6i np a n c r e a t i cc a n c e ra n dt oa s s e s st h er e l a t i o n s h i p b e t w e e nc c l 2 0a n dc c r 6 ，s oa st oa p p r a i s et h e i rr o l e si np a n c r e a t i cc a n c e r m a t e r i a l sa n dm e t h o d s 1 m a t e r i a l s ：( 1 ) p a r a f f i nt i s s u e ：l a b o r a t o r yo f p a t h o l o g y , a f f i l i a t e ds h e n g j i n g h o s p i t a lo fc h i n am e d i c a lu n i v e r s i t y ( 2 0 0 5 2 0 0 8 ) ( 2 ) m a i nr e a g e n t ：r a b b i t a n t i m i p 3 a c c l 2 0 ( b e i j i n gb i o s y n t h e s i sb i o t e c h n o l o g yc o l t d ) ；r a b b i t a n t i c c r 6 c d19 6 ( b e i j i n gb i o s y n t h e s i sb i o t e c h n o l o g yc o l t d ) ；m a x v i s i o n 刑 h r p p o l y m e ra n t i m o u s e r a b b i ti h ck i t ( m a i x i nb i o ) ；m a x 0 0 7 t ma m p l i f i e ro f m i c r os i g n a li ns i t u ( d a b ) k i t ( m a i x r nb i o ) 2 m e t h o d s ：t h ee x p r e s s i o no f c h e m o k i n ec c l 2 0a n di t sr e c e p t o rc c r 6w ea r e d e t e c t e dw i t hi m m u n o h i s t o c h e m i c a lt e c h n i q u e ( m a x v i s i o n ) i n4 2p a t i e n t s 、析t l lp c a a n d10p a t i e n t sw i t hn o r m a lp a n c r e a t i ct i s s u e s ，a n dt h er e l a t i o n s h i pb e t w e e nc c l 2 0a n d c c r 6w a sa n a l y z e d 3 s t a t i s t i c a lt r e a t m e n t ：a n a l y s i sb ys p s sv 13 0s o f t w a r e r e s u l t s 3 一 1 c c l 2 0a n dc c r 6p r o t e i nl e v e lw e r ei n c r e a s e di np a n c r e a t i cc a r c i n o m a c o m p a r e dw i t hn o r m a lp a n c r e a t i ct i s s u e s ( p o 0 5 ) t h ee x p r e s s i o no fc c r 6h a da p o s i t i v el i n e a rc o r r e l a t i o nw i t hc c l 2 0i nt u r n o r ( r - - - - o 3 5 2 ，p = 0 0 2 2 ) 2 t h eo v e r e x p r e s s i o no fc c l 2 0 p r o t e i nw a sr e l a t e dt og r a d ei np c a f p 7 5 。两者乘积为o 表示阴性，大于1 为阳性，其中1 2 表示弱阳性( + ) ，3 - - 4 表示阳性( + + ) ，5 表示强阳性( + + + ) 。 五、统计学分析：采m s p s s l 3 o 软件分析。阳性率的比较采用x2 检验， 相关性的分析采用s p e a r m a n 等级相关分析，p o 0 5 为差异有统计学意义。 结果 一、c c l 2 0 和c c r 6 阳性表达率：c c l 2 0 主要表达于肿瘤细胞的胞质或 胞膜中，正常细胞的胰岛或胰腺导管上皮细胞亦有少量表达。4 2 例胰腺癌组织中， 3 0 例( 7 1 4 ) 表达阳性，1 0 例正常胰腺组织中，2 例( 2 0 9 6 ) 表达阳性，两者相差 非常显著( p 0 0 5 ) 。c c r 6 主要表达于肿瘤细胞的胞质或胞膜中，4 2 例胰腺癌组 织中，3 2 例( 7 6 2 ) 表达阳性，1 0 例正常胰腺组织中，3 例( 3 0 ) 表达阳性，两 者差别有统计学意义( p 0 0 5 ) 。胰腺癌组织中c c l 2 0 与c c r 6 表达呈正相关 ( r = o 3 5 2 ，p = o 0 2 2 ) 。 二、c c l 2 0 禾i i c c r 6 表达与胰腺癌i 临床病理特征的关系：c c l 2 0 蛋白表达与肿瘤病理特征分化程度相关( p 5 9 分化程度 中低 高 淋巴结转移 有 无 临床分期 i i i i 301 9 121 1 18 24 26 16 l8 24 31 1 1 1 3 1 7 2 2 8 1 1 0 1 4 5 1 5o 9 2 1 7 40 0 3 9 8 1 170 2 0 0 1 95 2 1 9 1 00 6 1 7 2 2 2 1 0 80 7 7 5 2 1 530 5 6 5 1 77 2 1 1 1 1 4 1 8 2 3 9 50 6 0 6 5 41 0 0 0 6 80 9 2 2 2 8 一一一一 9 讨论 趋化因子是一族具有趋化作用的细胞因子，分子量较小，对白细胞迁移起关 键作用陋9 1 。其通过与靶细胞膜上相应的趋化因子受体结合发挥作用。趋化因子受 体属g 蛋白偶联的7 次跨膜受体超家族，其n 末端与配体结合，胞内区与g 蛋白偶联， c 末端含丝氨酸苏氨酸，可磷酸化，参与信号传导。趋化因子与其受体结合后在 调节白细胞定向移动、细胞生长、发育、分化、凋亡、组织损伤、淋巴细胞归巢、 免疫应答、h i v 感染和血管生成等众多生理、病理过程中起着非常重要的作用 口0 1 。近来，越来越多的证据表明，趋化因子与肿瘤的侵袭、转移密切相关羽。 肿瘤细胞分泌的趋化因子与相应受体或配体结合后能促进癌问质炎性细胞浸润、 肿瘤血管生成、癌基质蛋白降解及影响癌细胞本身生物学行为( 如增生活性增加、 促血管生成因子合成增加等) ，但其确切机制仍需进一步研究n 3 1 制 目前已经发现几十种趋化因子，根据半胱氨酸残基位置的不同，趋化因子分 为4 个亚族，n p c 、c c 、c x c 与c x 3 c ，相应的受体称为x c r 、c c r 、c x c r 与c x 3 c n7 。1 8 。 c c l 2 0 是近年来发现的一种c c 亚族的趋化因子，c c l 2 0 在多种人类癌症组织中的表 达已经被证实，如白血病，淋巴瘤，黑色素瘤，肝癌，前列腺癌，大肠癌，肺癌 及口腔鳞状细胞癌n 9 2 2 1 。r u b i e 等n 8 1 发现1 1 例手术切除的肝癌组织中c c r 6 与c c l 2 0 表达明显高于正常肝组织，并且与患者分期较晚呈正相关。u c h i d a 等呦3 报道，c c l 2 0 可以促进c c r 6 高表达细胞( h e p g 2 ) 形成伪足，但在c c r 6 低表达细胞( m c f - 7 ) 却未 见到类似表现。 越来越多的研究表明趋化因子可与其受体结合，通过信号转导途径，直接促 进胰腺癌细胞的生长增殖。k l e e f f 等瞳4 1 发现胰腺癌组织存在c c 类趋化因子c c l 2 0 m i p - 3q 及其受体c c r 6 m r n a 的表达，体外实验表明c c l 2 0 可以显著促进人胰腺癌 细胞系c o i o _ 3 5 7 的增殖，认为c c l 2 0 可通过旁分泌或自分泌的方式促进胰腺癌的发 生发展。本研究采用免疫组化方法检测其在胰腺癌及正常胰腺组织中的表达情况， 结果显示c c l 2 0 及c c r 6 在胰腺癌中均高表达，分别是3 5 7 与2 5 4 倍。提示c c l 2 0 及 c c r 6 参与胰腺癌的发生发展。同时c c l 2 0 与胰腺癌分化程度有关( p 0 0 5 ) ，高 分化胰腺癌c c l 2 0 阳性表达率及评分明显高于中低分化组。进一步分析得出c c l 2 0 与c c r 6 在胰腺癌组织中表达呈正相关。说明可能存在着相互影响和共同调控的作 1 0 用途径，通过相互作用影响胰腺癌的生物学行为、转移发生及预后，其作用机制 有待深入研究。由此可推断，针对c c l 2 0 可设计相应的抗体，从而阻断c c l 2 0 与c c r 6 的结合，抑制其肿瘤发生发展，对胰腺癌的靶向治疗有一定参考意义。检测 c c r 6 c c l 2 0 成员表达可能成为判断患者转移或者复发的重要指标，并有助于筛选 胰腺癌治疗的靶基因。 结论 c c l 2 0 与c c r 6 在胰腺癌组织中的表达明显高于正常胰腺组织。这表明c c l 2 0 和 c c r 6 表达参与了胰腺癌的发生和发展。c c l 2 0 与c c r 6 两者相互作用可能在胰腺肿瘤 生物学中起着重要作用，阻止其表达可有助于抑制胰腺癌发生及进一步恶化，并 可能成为新一代治疗策略的潜在靶点。 本研究创新点 本项研究应用免疫组化m a x v i s i o n 方法检测4 2 例胰腺癌组织及1 0 例正常胰 腺组织中趋化因子c c l 2 0 及其受体c c r 6 蛋白表达，并分析c c l 2 0 与c c r 6 的相关 性。以期阐述趋化因子c c l 2 0 及其受体c c r 6 在胰腺癌发生发展及转移中的作用， 为选择应用适当的趋化因子或其受体并有效地诱导、活化和趋化免疫效应细胞， 导向杀伤肿瘤细胞，实现对胰腺癌的生长的抑制；尝试运用趋化因子中和抗体、 受体拮抗剂、抑制剂阻断其靶向转移路径，以实现对胰腺癌转移的控制等治疗策 略提供更多的理论依据。 1 2 参考文献 1 c o n l o nk c ，k 1i m s t r ad s ，b r e n n a nm f l o n g t e r ms u r v i v a la f t e rc u r a t i v er e s e c t i o n f o rp a n c r e a t i cd u c t a la d e n o c a r c i n o m a ：c l i n i c o p a t h o l o g i ca n a l y s i sf o r5 - y e a r s s u r v i v o r s a n ns u r g , 1 9 9 6 ，2 2 3 ：2 7 2 2 7 9 2 m a r c h e s if ，m o n t ip ，l e o n eb e ，e ta 1 i n c r e a s e ds u r v i v a l ， p r o l i f e r a t i o n ，a n d m i g r a t i o ni nm e t a s t a t i ch u m a np a n c r e a t i ct u m o rc e ll se x p r e s s i n gf u n c t i o n a l c x c r 4 c a n c e rr e s ，2 0 0 4 ，6 4 ：8 4 2 0 8 4 2 7 3 m a t s u oy ，o c h in ，s a w a ih ，e ta 1 c x c l 8 i l 一8a n dc x c l l 2 s d f - l a l p h ac o o p e r a t i v e l y p r o m o t ei n v a s i v e n e s sa n da n g i o g e n e s i si np a n c r e a t i cc a n c e r n tjc a n c e r ，2 0 0 9 ， 1 2 4 ：8 5 3 8 6 1 4 w e n t em n ，m a y e rc ，g a i d a 删，e ta 1 c x c l l 4e x p r e s s i o na n dp o t e n t i a lf u n c t i o ni n p a n c r e a t i cc a n c e r c a n c e rl e t t ，2 0 0 8 ，2 5 9 ：2 0 9 2 1 7 5 w a n gz ，m aq ，l i uq ，e ta 1 b l o c k a d eo fs d f i c x c r 4s i g n a l l i n gi n h i b i t sp a n c r e a t i c c a n c e rp r o g r e s s i o ni nv i t r ov i ai n a c t i v a t i o no fc a n o n i c a lw n tp a t h w a y b rjc a n c e r ， 2 0 0 8 ，9 9 ：1 6 9 5 17 0 3 6 k u l b eh ，l e v i n s o nn r ，b a l k w il1f ，e ta 1 t h ec h e m o k i n en e t w o r ki nc a n c e r 一- m u c h m o r et h a nd i r e c t i n gc e l lm o v e m e n t n tjd e vb i o l ，2 0 0 4 ，4 8 ：4 8 9 4 9 6 7 b a l k w i1 1f ：c a n c e ra n dt h ec h e m o k i n en e t w o r k n a tr e vc a n c e r , 2 0 0 4 ，4 ：5 4 0 5 5 0 8 c o n t i i ，d u b ec ，r o l l i n sb j 。c h e m o k i n - b a s e dp a t h o g e n e t i cm e c h a n i s m si n c a n c e r n o v a r t i sf o u n ds y m p ，2 0 0 4 ，2 5 6 ：2 9 4 1 9 p e ll e g r n oa ，n a c c aa ，s c a r e llic ，e ta 1 c h e m o k i n e sa n dt u m o r s r e c e n tp r o gme d ， 2 0 0 2 ，9 9 ：6 4 2 6 5 4 1 0 r o s s id ，z l o t n i ka t h eb i o l o g yo fc h e m o k i n e sa n dt h e i rr e c e p t o r s j a n n ur e v i m m u n o ，1 2 0 0 0 ，1 8 ：2 1 7 2 4 2 1 1 s c h w a r zm k ，w e l l st n n e wt h e r a p e u t i c st h a tm o d u l a t ec h e m o k i n en e t w o r k s j n a t r e vd r u gd is c o v ，2 0 0 2 ，1 ( 5 ) ：3 4 7 3 5 8 1 2 b a l k w i l lf c h e m o k i n eb i o l o g yi nc a n c e r j s e m i ni m m u n o ，12 0 0 3 ，1 5 ( 1 ) ：4 9 - 5 5 1 3 1 3 r o o d m a ng d ，c h o is j m i p 一1a l p h aa n dm y e l o m ab o n ed i s e a s e c a n c e rt r e a tr e s ，2 0 0 4 ，1 11 8 ：8 3 - 1 0 0 1 4 f a n t ip ，n a z a r e t hm ，b u c e l l ir ，e ta 1 e s t r o g e nd e c r e a s e s c h e m o k i n el e v e l si nm u r i n e m a m m a r yt i s s u e s ：i m p l i c a t i o n s f o rt h er e g u l a t o r yr o l eo fm i p 1a l p h aa n dm c p 。1 j ei nm a m a r yt u m o rf o r m a t i o n e n d o c r i n e ，2 0 0 3 ，2 2 ：1 6 1 1 6 8 1 5 w o l fm ，c l a r k l e w i si ，b u r ic ，e ta 1 s p e c i f i c a l l yc l e a v e st h ec h e m o k i n e s m a c r o p h a g ei m f l a m m a t o r yp r o t e i n 一1a l p h a ，m a c r o p h a g ei nf l a m m a t o r yp r o t e i n 一1 b e t a ，a n ds l ct h a ta r ee x p r e s s e di nh u m a nb r e a s tc a n c e r a mjp a t h o l ，2 0 0 3 ，1 6 2 ： 1 1 8 3 1 1 9 0 1 6 m e n t e np ，s a c c a n ia ，d ill e nc ，e ta 1 r o l eo ft h ea u t o c r i n ec h e m o k i n e sm i p 一1a l p h a a n dm i p 一1b e t ai nt h em e t a s t i cb e h a v i o r so fm u r i n etc e l ll y m p h o m a jl e u k o cb i o l ， 2 0 0 2 ，7 2 ：7 8 0 7 8 9 1 7 a n d r ef ，c a b i o g l un ，a s s ih ，e ta 1 e x p r e s s i o no fc h e m o k i n er e c e p t o r sp r e d i c t s t h es i t eo fm e t a s t a t i cr e l a p s ei np a t i e n t sw i t ha x i l l a r yn o d ep o s i t i v ep r i m a r y b r e a s tc a n c e r a n no n c o l ，2 0 0 6 ，1 7 ：9 4 5 9 5 1 1 8 r u b i ec ，f r i c kv o ，w a g n e rm ，e ta 1 c h e m o k i n ee x p r e s s i o ni nh e p a t o c e ll u l a r c a r ci n o m av e r s u sc o l o r e c t a l1i v e rm e t a s t a s e s w o r l djg a s t r o e n t e r 0 1 ，2 0 0 6 ，1 2 ： 6 6 2 7 - 6 6 3 3 1 9 g h a d j a rp ，c o u p l a n ds e ，n ai k ，e ta 1 c h e m o k i n er e c e p t o rc c r 6e x p r e s s i o nl e v e l a n dl i v e rm e t a s t a s e si nc o l o r e c t a lc a n c e r jc 1 i no n c o l ，2 0 0 6 ，2 4 ：1 9 1 0 1 9 1 6 2 0 r u b i ec ，f r i c kv o ，w a g n e rm ，e ta 1 e n h a n c e de x p r e s s i o na n dc l i n i c a ls i g n i f i c a n c e o fc c c h e m o k i n em i p 一3a l p h ai nh e p a t o c e ll u l a rc a r c i n o m a s c a n dji m m u n o l ，2 0 0 6 ， 6 3 ：4 6 8 - 4 7 7 2 1 a b i k oy ，n i s h i m u r am ，k u s a n ok ，e ta 1 e x p r e s s i o no fm i p 一3 a l p h a c c l 2 0 ，am a c r o p h a g e i n f l a m m a t o r yp r o t e i ni no r a ls q u a m o u sc e l lc a r c i n o m a a r c ho r a lb i o l ，2 0 0 3 ， 4 8 ：1 7 1 - 1 7 5 2 2 g h a d j a rp ，l o d d e n k e m p e rc ，c o u p l a n ds e ，e ta 1 c h e m o k i n er e c e p t o rc c r 6e x p r e s s i o n 1 e v e la n da g g r e s s i v e n e s so fp r o s t a t ec a n c e r jc a n c e rr e sc l i no n c o l ，2 0 0 8 ， 1 4 1 3 4 ：1 1 8 1 - 1 1 8 9 2 3 u c h i d ah ，1 w a s h i t ay ，s a s a k ia ，e ta 1 c h e m o k i n er e c e p t o rc c r 6a sap r o g n o s t i c f a c t o ra f t e rh e p a t i cr e s e c t i o nf o rh e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m a jg a s t r o e n t e r o l h e p a t o l ，2 0 0 6 ，2 1 ：1 6 1 1 6 8 2 4 k l e e f fj ，k u s a m at ，r o s s id l ，e ta 1 d e t e c t i o na n dl o c a li z a t i o no fm i p 一3 a l p h a l a r c e x o d u s ，am a c r o p h a g ep r o i n f l a m m a t o r yc h e m o k i n e ，a n di t sc c r 6r e c e p t o ri n h u m a np a n c r e a t i cc a n c e r i n tjc a n c e r ，1 9 9 9 ，8 1 ：6 5 0 6 5 7 1 5 综述 趋化因子及其受体与胰腺癌的研究进展 初祯综述陈少夫审校 摘要：胰腺癌是消化系统恶性肿瘤之一，病情发展迅速，预后差。趋化因子 及其受体在某些肿瘤细胞呈高表达，与恶性肿瘤的生长、侵袭和转移密切相关。 探究胰腺癌中表达的趋化因子及其受体系统的网络调控机制，尝试利用趋化因子 及其受体与肿瘤关系的双向性，合理的应用适当的趋化因子或其受体可有效地诱 导、活化和趋化免疫效应细胞，导向杀伤肿瘤细胞，以实现对胰腺癌的生长的抑 制；尝试运用趋化因子中和抗体、受体拮抗剂、抑制剂阻断其靶向转移路径，以 实现对胰腺癌转移的控制。本文就趋化因子及受体在胰腺癌生成及转移中的作用 进行阐述。 关键词：胰腺癌，趋化因子，趋化因子受体 胰腺癌是消化系统恶性肿瘤之一，病情发展迅速，预后差。胰腺癌发病率逐 年上升，由于缺乏早期检测手段，手术切除复发率高及无明确靶向治疗药物等因 素，胰腺癌的死亡率几乎等同于其发病率。目前迫切需要新的策略和治疗方法来 提高胰腺癌的临床疗效。因此，找到与胰腺癌生长、转移有关的分子标记物，并 尝试从分子水平阻断其生长、转移途径，具有重要意义。趋化因子及其受体在机 体正常的炎症免疫应答中起引导作用。趋化因子能引领炎症细胞定向到达表达相 应受体的炎症部位，并且趋化因子尚有诱导血管形成等重要生理作用。最近研究 表明，趋化因子及其受体在某些肿瘤细胞呈高表达，与恶性肿瘤的生长、侵袭 和转移密切相关。趋化因子家族与肿瘤的关系己成为肿瘤生物学研究中的热点。 本文就趋化因子及其受体与胰腺癌发生、转移的关系进行阐述。 1 趋化因子及其受体的生物学特性 1 1 趋化因子及其受体的结构 趋化因子是一个促炎多肽细胞因子的超家族，为可溶的小分子( 8 1 4 k d a ) 蛋 1 6 白，具有激活和趋化白细胞的作用。其氨基酸序列中有特异的半胱氨酸( c y s ) 基序。 根据靠近分子氨基端( n 端) 的前2 个c y s 之间是否插入其它氨基酸，将它们分为4 类： c x c 类( 插入1 个氨基酸残基) ，亦称为q 类趋化因子；c c 类( 不插入其它氨基酸残 基) ，又称为b 类趋化因子；c x 3 c ( 插入3 个其它氨基酸) ，又称为y 类趋化因子； c 类( n 端仅1 个c y s ) ，又称为6 类趋化因子。趋化因子分类学名称加字母l 代表配 体，字母r 代表受体，最后的数字表示发现的顺序。目前发现的趋化因子主要属于 q 类和1 3 类。c x c 类能进一步分为e l r + ，e l r 一两类( 依据是否表达谷氨酸一亮氨酸一 精氨酸基序) 口1 。含有e l r 基序的是血管生成因子。c x c 趋化因子中为血管生成的成 分有：c x c l1 、2 、3 、5 、6 、7 、8 砼1 。它们能直接吸引内皮细胞刺激血管生长。 相反e l r - 的趋化因子抑制血管生长，比如c x c l 9 ，1 0 抽1 。c x c 类趋化因子结合并激 活表达在中性粒细胞、淋巴细胞、内皮细胞和表皮细胞的同源趋化因子受体。c c 类趋化因子作用于树突状细胞的几个亚型，淋巴细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞 和自然杀伤细胞，对中性粒细胞无趋化性，因其缺乏c c 类趋化因子受体。趋化因 子受体是一类表达于不同类细胞表面的含7 个跨膜区的蛋白偶联受体，又名g 蛋白 偶联受体，通过鸟核甘酸结合g 蛋白激活细胞内的信号级联，迅速的向趋化因子来 源处移动。 目前已发现近5 0 种趋化因子和仅2 0 种趋化因子受体。这说明某些趋化因子间功能 存在重复性。一些趋化因子受体能结合几个趋化因子，反之亦然。这使机体在应 激时能作出适宜的生物学反应。 1 2 趋化因子及其受体在生理过程中的作用 趋化因子受体在炎症过程中表达或诱导，为淋巴细胞进入特异的微环境提供 一个可变的领航系统。在这个过程中的精确性和特异性是通过淋巴细胞在分化过 程中表达不同的趋化因子受体实现的。趋化因子受体c x c r 5 和c c r 7 是t 细胞，b 细胞 和树突状细胞向次级淋巴器官迁移的主要调节者。树突状细胞发挥着免疫系统哨 兵的作用h 1 。1 3 类趋化因子6 一c k i n e s l c t c a 4 e x o d u s 2 c c l 2 1 主要表达在高内皮 的小静脉。与淋巴细胞从血液归巢到淋巴结和派尔结节有关。趋化因子及受体可 用于区分t 细胞。c c r 7 和c x c r 5 还作为标志物区分t 辅助细胞的不同细胞系，这能让 我们更好的认识记忆t 细胞和效应t 细胞在淋巴系统内环境稳定和疾病中的作用。 1 7 近来研究指出，在c d 4 + t 细胞表达不同的趋化因子受体c c r 7 和c x c r 5 这能区分记 忆和效应t 细胞群的不同归巢和效应子作用。通过结合t h i t h 2 概念与建立在动力 学上的趋化因子受体和粘附分子的表达，我们或许能更好的理解t 细胞在正常和疾 病免疫应答中的分化和功能。 趋化因子在其他生物学事件中亦非常重要，比如胚胎发生、创伤愈合、血管发生、 t h l t h l 发育和抗肿瘤应答等。 2 趋化因子及其受体在肿瘤生长和转移中的作用 越来越多的证据表明，肿瘤的侵袭和转移是一个复杂的、连续的、多阶段的 过程，并表现出高度的特异性、非随机性和器官选择性，能够转移到特定器官的 恶性肿瘤细胞均具有多种机理促进它们侵袭组织，增强其生长繁殖能力。肿瘤细 胞和基质细胞都能合成趋化因子和细胞因子，通过内分泌或旁分泌机制维持肿瘤 生长，诱导血管发生，帮助逃避机体的免疫监测。长期的化学刺激，细菌病毒因 素导致的慢性炎症使机体易患癌前病变，然后促进肿瘤形成】。所有的炎性物质 导致非特异性致炎因子的形成。比如i l 一1q 1 3 、i l 一6 、i f n a 和t n f q ，这些细 胞因子诱导促进炎症反应的趋化因子的表达。肿瘤相关趋化因子能调节肿瘤中的 炎症反应，抑制免疫系统清除肿瘤细胞。肿瘤细胞分泌的趋化因子和肿瘤细胞表 面表达的趋化因子受体促进肿瘤的生长和转移。最具特征的是生长相关家族趋化 因子( c x c l l ，2 ，3 ) 和c x c l 8 1 。在肿瘤的发生发展过程中，趋化因子表现出双向 性的作用：一方面趋化因子通过趋化、活化免疫细胞或抑制血管增生而起到抗肿 瘤作用；另一方面则通过刺激肿瘤生长，增加瘤细胞运动能力及趋化瘤细胞的直 接作用，以及促进血管增生和促进细胞外基质消化的间接作用来促进肿瘤的生长 和转移盯3 。b e l p e r i o 等陋1 研究表u 凋e l r - c x c 趋化因子是高效的促血管生长因子，而 非e l r c x c 则是血管生长的抑制因子，两者之间的平衡关系决定着肿瘤的消长与转 移与否。 趋化因子及其受体的研究仅有1 0 余年的历史，但已成为医学研究的热门领域 之一，现己发现至少5 0 种趋化因子，趋化因子受体也近2 0 种。在与肿瘤生长、转 移关系的研究中，趋化因子及其受体介导多种肿瘤细胞靶向性运动作用的研究引 起了广泛关注凹1 。大量的临床研究表明，一些趋化因子受体在人类的许多癌中表 1 8 达上调。包括乳腺癌、肺癌、前列腺癌和黑色素瘤。趋化因子及受体己证实在肿 瘤向致命器官及淋巴结转移中发挥重要作用，而后者是癌转移最好发的部位。 3 趋化因子及其受体在胰腺癌发生和转移中的作用 3 1 趋化因子及其受体在胰腺癌发生中的作用机制 肿瘤和炎症的共同点之一是均有细胞招募，其中以在实体肿瘤中能够占据近 一半比例的肿瘤相关巨噬细胞( t u m o u r a s s o c i a t e dm a c r o p h a g e s ，t a m s ) 具有较为 重要的意义。尽管对t a m s 往两极分化的机制目前尚不清楚，但是多年的研究已经 确认c c l 2 ，c c l 5 及其受体在对巨噬细胞的招募和激活中发挥了作用，并且在部分 肿瘤中与其预后有相关性n0 3 。m o n t i 等n 2 1 发现在胰腺癌组织和细胞中存在c c 类趋 化因子m c p 一1 c c l 2 的高表达，且c c l 2 血清水平较高的胰腺癌患者比c c l 2 血清水平 较低的患者有更高的存活率。且趋化因子可以通过凋控炎症反应、调控新生血管 形成促进胰腺癌的发生和发展n 3 1 钔。除c c 类趋化因子外，c x c 类趋化因子也可促 进胰腺癌的增殖。t a k a m o r i 等n 5 1 发现人胰腺癌细胞系c a p a n - 1 能同时分泌表达c x c 类趋化因子c x c l l g r oq 、c x c l 8 i l 一8 及其受体c x c r 2 ，使用il 一8 或g r oq 多克隆 抗体均可抑$ ! j c a p a n 一1 细胞的增殖。还有实验发现a s p c - i 、c a p a n 一1 和h s 7 6 6 t 等人 胰腺癌细胞系均存在c x c 类趋化因子受体c x c r 4 的高表达，其配体c x c l l 2 s d f l 可 以显著促进这些细胞的增殖，使用c x c r 4 拮抗剂a i c d 3 1 0 0 可以抑制胰腺癌细胞的增 殖，提示c x c l l 2 也可通过自分泌机制促进胰腺癌的生长。最近，w e n t e 等n 刚发现 人胰腺癌细胞系b x p c 一3 、m i ap a c a 一2 和p a n c 一1 不仅可分泌il - 8 ，还可分泌e l r c x c 类趋化因子g r oq 和e n a 一7 8 ，且胰腺癌细胞的培养上清液可诱导动物模型中新生血 管形成，而使用c x c r 2 抗体则可显著抑制新生血管形成，认为i l - 8 、g r oq 和e n a - 7 8 等e l r c x c 类趋化因子在胰腺癌新生血管形成中起着重要作用。 3 2 趋化因子及其受体在胰腺癌转移中的作用机制 转移是导致肿瘤患者死亡的首要原因。但是，肿瘤转移不是随机的，而是一 个特异的，由分子引导的有序过程，并在转移部位上表现出对某些特定组织的倾 向性。m u l l e r 等n 刀提出趋化因子在介导器官特异性肿瘤转移中发挥了作用，并指 出趋化因子受体在肿瘤细胞上的表达格局以及相应配体的分布定位为理解肿瘤的 定向转移提供了线索。k u w a d a 等n 刚首先报道了在胰腺癌细胞中c x c 类趋化因子i l - 8 1 9 通过与其受体结合，诱导基质金属蛋白酶一2 ( m a t r i x m e t a l l op r o t e i n a s e s 一2 ， 姗p 一2 ) 的表达，增强胰腺癌细胞的侵袭力。，m i p 一3q 可显著增力n p a n c - 1 细胞中 姗p 一9 蛋白表达水平，而使用c c r 6 或i v i m p 一9 抗体均可降低p a n c 一1 细胞的侵袭力，提 示m i p - 3q 与其受体c c r 6 结合后，通过诱导删p 一