（分析化学专业论文）电致化学发光生物传感新技术的研究.pdf

_：_! 、 一 l i 嗍 i 2 0 1 1 jd i s s e r t a t i o nf o rd o c t o rd e g r e e s c h o o lc o d e ：1 0 2 6 9 s t u d e n t sn u m b e r ：5 2 0 7 0 6 0 6 0 1 0 eastc hin an or m al u ni v ersi r e s e a r c ho i lt h ei l e wt e c h n o l o g i e so f e l e c t r o c h e m i l u m i n e s c e n c eb i o s e n s e d e p a r t m e n t ：h 皇也i 墨! 醒 m a j o r ：坠垒! y ! i 垒! h 皇磐i 苎! r e s e a r c hf i e l d ： 旦i q 曼! 星! r q 垒望垒! y ! i 垒! s u p e r v i s o r ：里q i 坠g 垒坠2 旦星 s t u d e n t sn a m e ：w e ny u n o c t o b e r , 2 0 1 0 l 华东师范大学学位论文原创性声明 郑重声明：本人呈交的学位论文电致化学发光生物传感新技术的研究鼽是 在华东师范大学攻读硕士博z ( 请勾选) 学位期间，在导师的指导下进行的研究工 作及取得的研究成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含其他个人已经 发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中 作了明确说明并表 作者签名： b 强：沙1 6 年猬了日 华东师范大学学位论文著作权使用声明 ：电致化学发光生物传感新技术的研究系本人在华东师范大学攻读学位期 间在导师指导下完成的硕士博硅( 请勾选) 学位论文，本论文的研究成果归华东师 范大学所有。本人同意华东师范大学根据相关规定保留和使用此学位论文，并向主 管部门和相关机构如国家图书馆、中信所和“知网送交学位论文的印刷版和电子 版；允许学位论文进入华东师范大学图书馆及数据库被查阅、借阅；同意学校将学 位论文加入全国博士、硕士学位论文共建单位数据库进行检索，将学位论文的标题 和摘要汇编出版，采用影印、缩印或者其它方式合理复制学位论文。 本学位论文属于( 请勾选) () 1 经华东师范大学相关部门审查核定的“内部 或“涉密 学位论文， 部门审定的学位论文均为公开学位论文。此声明栏不填写的，默认为公开学位论文，均适用上 述授权) 。 一 云雯博士学位论文答辩委员会成员名单 姓名职称单位备注 李通化教授同济大学主席 闫超教授上海交通大学委员 庄惠生教授上海交通大学委员 金利通教授华东师范大学委员 叶建农教授华东师范大学委员 一 - 目录 目录 摘要5 a b s t r a c t 8 第一章绪论1 1 电致化学发光的特点、原理及体系1 1 1 电致化学发光的特点及基本原理1 1 2 电致化学发光反应的主要体系2 2 基于r u ( b p y ) 3 2 + 电致化学发光体系及其应用4 3e e l 生物传感器7 3 1e c l 免疫传感器7 3 2e e l - d n a 传感器1 0 3 3a p t a m e r 和d n a z y m ee c l 生物传感器1 2 3 4e e l 阵列传感器及其应用1 5 4e e l 固相传感器制各技术1 6 4 1 直接吸附r u ( b p y ) 3 z + 到电极表面仃 4 2 通过离子交换作用固定r u ( b p y ) 3 2 + 1 7 4 3 通过纳米粒子固定r u ( b p y ) 3 2 + 1 9 5e c l 生物传感检测仪器2 2 6e c l 生物传感研究的发展趋势2 5 7 本论文的目的和意义2 6 参考文献2 8 第二章基于电化学聚合固定抗体的电化学发光免疫检测人i g g 3 5 1 引言3 5 2 实验部分3 6 2 1 仪器与试剂3 6 2 2 实验方法3 6 3 结果与讨论3 7 3 1 电极修饰过程表征和r u ( b p y ) 3 2 + 标记羊抗人抗体的电化学性质3 7 3 2 实验条件的优化3 9 目录 4 结论4 2 参考文献4 2 第三章基于重氮化反应修饰碳纳米管的电致化学发光免疫传感器研究4 4 1 引言4 4 2 实验4 6 2 1 仪器和试剂4 6 2 2 r u ( b p y ) 3 2 + 标记羊抗人抗体的制各4 6 2 3 多壁碳纳米管修饰玻碳电极4 6 2 4 重氮化修饰电极固定抗体4 7 2 5 三明治法免疫组装及电致化学发光检测人i g g 4 7 3 结果和讨论4 7 3 1 r u ( b p y ) 3 2 + - 标记的羊抗人i g g 性质4 7 3 2 通过重氮化还原修饰碳纳米管电极4 9 3 3 优化电致化学发光免疫分析条件5 0 3 4 电致化学发光免疫传感器的特异性和灵敏度5 1 3 5 利用电致化学发光免疫传感器测定人血清的i g g 5 2 4 结论5 3 参考文献5 3 第四章基于电沉积r u ( b p y ) 3 z + a u n p s c h i t o s a n 复合物制备固相电致化学发光传感器 ! ；! ； 1 引言5 5 2 实验部分5 7 2 1 仪器5 7 2 2 试剂5 7 2 3 金胶的制备5 7 2 4 玻碳电极上电沉积r u ( b p y ) 3 z + a u n p s c h i t o s a n 膜5 7 3 结果与讨论5 8 3 1r u ( b p y ) 3 2 + a u n p s c h i t o s a n 膜的表征5 8 3 2r u ( b p y h z + a u n p s c h i t o s a n 膜制成的传感器用于t p r a 检测5 8 3 3 选择性固定r u ( b p y ) 3 z + 到目标电极表面6 2 目录 4 结论6 3 参考文献6 3 第五章基于选择性固定联吡啶钌制备阵列固态电致化学发光传感器的方法研究6 5 1 引言6 5 2 实验部分6 6 2 1 仪器6 6 2 2 试剂6 7 2 3 金阵列电极的制备6 7 2 4r u d sn p s 的制各6 7 2 5r u d sn p s 壳聚糖复合膜在金阵列电极表面的电沉积6 7 3 结果与讨论6 8 3 1r u d sn p s 和壳聚糖复合膜的表征6 8 3 2r u d sn p s 壳聚糖膜的电沉积方法研究6 9 3 3r u d sn p s 壳聚糖膜修饰电极的电化学和e c l 表征7 0 3 4e c l 传感器性能7 1 4 结论7 4 参考文献7 4 第六章基于选择性固定d n a 进行多分析物同时测定的电致化学发光d n a 生物阵列传 感器研究7 6 1 引言7 6 2 实验部分7 7 2 1 仪器和试剂7 7 2 2 合成标记有r u ( b p y ) 3 2 + 的s s d n a 7 8 2 3 金阵列电极的制备7 9 2 4 金阵列电极上沉积壳聚糖7 9 2 5 固定s s d n a 到金阵列电极上用于多目标杂交7 9 2 6 电致化学发光检测8 0 3 结果与讨论8 0 3 1e c l 探针的表针：8 0 3 2 优化多目标分析的实验条件8 1 目录 3 4d n a 阵列的同时多目标检测8 4 4 结论8 5 参考文献8 5 附录：博士在读期间科研成果8 7 致谢8 9 j 中文摘要 电致化学发光生物传感新技术的研究 摘。要 克隆羊的成功和人类基因组草图绘制完成，标志着生命科学的发展在经历了上世 纪的分子生物学时代、结构基因组时代之后，正式进入了功能基因组时代，即后基因组 时代。在这个年代，生命科学的主要研究对象是功能基因组学，其中包括了基因 组研究和蛋白组研究等，而基因组学和蛋白质组学的最基本研究单位就是d n a 和蛋白质。基因序列数据正在以前所未有的速度迅速增长。然而，怎样去研究如 此众多基因在生命过程中所担负的功能就成了全世界生命科学工作者共同的课 题。为此，建立新型杂交和测序方法以对大量的遗传信息进行高效、快速的检测、 分析就显得格外重要了。 电致化学发光( e c l ) 是利用电化学反应产生化学发光的现象，是电化学和 化学发光相结合的产物，兼具二者的优点，例如光学器件简单，背景干扰低，反 应易精确控制，具有灵活性等。因此，广泛应用于免疫测定、食品分析、水质分 析和生物试剂的分析外，它也被成功做成检测器与瑚? l c ，f i a 及c e 等技术联 用。在电致化学发光物中，r u ( b p y ) 3 2 + 因为其具有良好的受激发性及超高的灵敏 度受到广泛的关注。最近固相电致化学发光系统被成功的开发出来，相比于之前 的液相电致化学发光系统，固相电致化学发光系统不但能增强发光信号，极大的 降低r u ( b p y ) 3 2 + 试剂消耗，简化实验设计，还能实现修饰层的循环再生利用。 本论文将纳米技术，电化学固定技术，阵列电极制作技术与电致化学发光检 测技术相结合，研制具有高灵敏度，高选择性的新型电致化学发光阵列生物传感 器和电致化学发光固相阵列传感器，成功的实现了对d n a ，t p r a 等目标物的测 定。为固相e c l 阵列电极。和e c ld n a 芯片的制备提供了简单，快速，有效 的方法。本论文共分六章。 第一章绪论 一 中文摘要 本章系统的介绍了电致化学发光的原理和特点，介绍了e c l 中五大发光体 系及其在分析检测的应用。针对现在应用范围最广的r u c o p y ) 3 2 + 的特点及应用领 域进行了重点介绍，此外还分析了e c l 生物传感器的种类，特点及研究进展。 介绍了e c l 固相传感器的制备材料和方法。最后阐述了本论文的目的与意义。 第二章基于电化学聚合固定抗体的电化学发光免疫检测人l g g 基于电化学聚合在金电极表面固定兔抗人i g g 抗体与人i g g 及标记有r u ( b p y ) 3 2 + 的羊抗人i g g 抗体之间发生特异性免疫反应，形成三明治结构，成功建立了用于 测定人血清中i g g 的电化学发光( e c l ) 免疫技术。利用此方法测定人i g g 含量， 浓度在5 0p g l 2m g l 范围内与电化学发光强度呈良好的线性关系。线性回归 方程为y ( a u ) = 4 8 4 1 + 0 0 9 x ( p g l ) ( n = 7 ) ，检出限为2 0 “g l ( 3 0 ) 。测得正常人血 清中i g g 平均含量为1 1 2g l ，结果令人满意。 第三章基于重氮化反应修饰碳纳米管的电致化学发光免疫传感器研究 报道了一种基于重氮化反应修饰电极的电致化学发光免疫传感器，首先通过电化 学还原重氮盐对修饰有多壁碳纳米管的电极进行羧基化，然后通过酰胺反应将抗 体连接到电极表面。利用三明治免疫检测反应对目标抗原人i g g 进行检测，其中 r u ( b p y ) 3 2 + 修饰的羊抗人i g g 作为e c l 信号源。电化学还原重氮盐修饰电极具有 操作简单，反应迅速，易于控制等特点。我们对免疫反应的条件进行了优化，在 优化后的条件下，利用修饰后的电极对人i g g 进行检测，i g g 浓度在2n g m l d 到 1 2 0n g m l 。1 具有良好的线性，检测限可达0 5n g m l l , 并成功实现人血清中人i g g 的含量检测。 第四章基于电沉积r u ( b p y ) a 2 + a u n p s c h i t o s a n 复合物制备固相电致化学发光 传感器 介绍了一种利用电沉积r u ( b p y ) 3 2 + a u n p s c h i t o s a n 复合物制备固相电致发光传感 器的方法。首先将a un a n o p a r t i c l e s ( a u n p s ) 和r u ( b p y ) 3 2 + 在壳聚糖溶液中充分混 匀，通过计时电流法将含有r u ( b p y ) 3 2 + ，a u n p s 和c s a n 的3 d 网状膜沉积到 阴极上。电极上网状膜的厚度及r u ( b p y ) 3 2 + 的沉积量都是由施加的电流强度及时 中文摘要 间所控制。实验表明包裹在网状膜中的r u ( b p y ) 3 2 + 仍然保持着良好的电化学活性 和电致化学发光性质。将用此法制作的r u ( b p y ) 3 2 + a u n p s c h i t o s a n 修饰的电极成 功的用于测定三丙胺，通过电致化学发光信号，检测限能到达5 x 1 0 d om 。 第五章基于选择性固定联吡啶钌制备阵列固态电致化学发光传感器的方法研 究 介绍了一种基于电沉积二氧化硅包裹的联吡啶钌纳米粒子与壳聚糖共聚物薄膜 技术，实现在阵列电极上选择固定电致化学发光物联吡啶钌的方法。通过这种方 法联吡啶钌能被选择固定到四通道阵列电极任一通道上，实验结果证明了不仅能 有效地将联吡啶钌( r u ( b p y ) 3 2 + ) 选择性固定到阵列电极上，而且能选择性固定 不同的复合膜，此方法在生物分析、毛细管电泳和药物筛选等领域都有广泛的应 用前景。实验利用紫外可见光谱、场发射扫描电子显微镜( f e s e m ) 和透射电 子显微镜( t e m ) 对r u ( b p y ) 3 2 + 硅纳米颗粒( r u d sn p s ) 以及复合膜进行表征。 基于电致化学发光复合膜修饰电极的传感器对三丙胺( t p r a ) 的检测呈现良好 的重现性、稳定性和灵敏度，线性范围为1 x 1 0 以。至1x 1 0 币m o l l ( r = o 9 9 7 7 ) ， 最低检测限为5 1 0 。1 1m o f l 。 第六章多分析物同时测定的电致化学发光d n a 生物阵列传感器 本文开发了一种新颖的同时测定多种分析物的电致化学发光阵列传感器。三种涉 及不同疾病h c v , s a r s 和h i v 的相关基因通过电沉积壳聚糖膜被固定到金阵列 电极上指定的电极位置。通过三明治免疫组装检测，r u ( b p y ) 3 2 + 标记的d n a 被用 做信号产生源。因为固定和检测方法所具有独特的特点，e c l 阵列传感器中电 极与电极之间的交叉反应和交叉干扰的影响基本可以忽略。传感器在进行多目标 序列同时测定是显示出良好的选择性和灵敏度。在临床医学，环境检测和生化反 恐方面有广泛的应用前景。 英文摘要 一 _ j 一 r e s e a r c l l0 nn e wb i o s e n s et e c n n o l 0 2 l e s0 t e l e c t r o c h e m i l um i n e s c e n c e a b s t r a c t w i t ht h es u c c e s so fd o l l ya n dt h ec o m l e t i o no ft h eh u m a ng e n o m ep r o j e c t , w e h a v ee n t e r e di np o s tg e n o m ee r aa f t e re x p e r i e n c e dm o l e c u l eb i o l o g ya n ds t r u c t u r a l g e n o m i c se r ai n l a s tc e n t u r y i nt h i se r a , t h em a j o rr e s e a r c hf o c u so nf u n c t i o n a l g e n o m i c s ，i n c l u d i n gg e n o m ea n dp r o t e o m i c t h eb a s i ce l e m e n tf o rg e n o m ea n d p r o t e o m i ca r ep r o t e i na n dd n a t h ed a t ao fg e n es e q u e n c ei sv o w i n gf a s t e rt h a n e v e rb e f o r e h o w e v e r , h o wt of i g u r eo u tt h ef u n c t i o no fa l lt h eg e n ed u r i n gt h el i f e p r o c e s sh a sb e c a m et h ec o m m o nt o p i cf o rt h es c i e n t i f i cr e s e a r c h e ra l lo v e rt h ew o r l d t h e r e f o r e ，i ti se x t r e m e l yi m p r o t a n tt od e v e l o pan e wm e t h o df o rh y b r i d i z a t i o na n d s e q u e n c ed e t e c t i o nw h i c hc a n b eu s e dt oa s s a ya n da n a l y s eal a r g en u m b e ro fg e n e t i c i n f o r m a t i o ne f f e c t i v e l ya n dr a p i d l y e l e c t r o c h e m i l u m i n e s c e n c e ( e c l ) ， w h i c h t r i g g e 稻o p t i c a l s i g n a lb y e l e c t r o c h e m i c a lr e a c t i o n s ，o f f e r st h ea d v a n t a g e so fv e r s a t i l ee m p l o y m e n t ，s i m p l i f i e d o p t i c a ls e t u p ，l o wb a c k g r o u n dd i s t u r b a n c e ，a n dg o o dt e m p o r a la n ds p a t i a lc o n t r 0 1 t h e r e f o r e ，i th a sb e e nw i d e l yu s e di nt h ef i e l do fi m m u n o a s s a y , f o o da n dw a t e r a n a l y s i sa n df o rt h ed e t e c t i o no fb i o w a r f a r ea g e n t s i ta l s oh a sb e e nu s e d 骶ad e t e c t o r f o rh p l c ，f i aa n dc e a m o n gt h ee l e c t r o c h e m i l u m i n e s c e n c ec o m p o u n d s ，t h em o s t l y u s e do n ei s t r i s ( 2 ，2 b i p y r i d y l ) r u t h e n i u m ( i i ) ( r u ( b p y ) 3 2 + ) ，w h i c he x c i t e sm o r e s e n s i t i v ee c ls i g n a l r e c e n t l y , s o l i d s t a t e r u ( b p y ) 3 2 + - e c ls y s t e m h a sb e e n d e v e l o p e d c o m p a r e d 谢t l lt h es o l u t i o np h a s e - b a s e do n e s ，i th a se n h a n c e dt h ee c l i n t e n s i t ya sw e l la sc o n s u m e dl e s se x p e n s i v er u c o p y ) 3 2 + ，s i m p l i f i e de x p e r i m e n t a l d e s i g n , a n dc r e a t e dr e g e n e r a b l es e n s i n gc o m p o n e n tb yr e c y c l i n gr u ( b p y ) 3 z + m o d i f i e d _ 英文摘要 e l e c t r o d e i nt h i st h e s i s ，w eh a dd e v e l o p e dan o v e le c la r r a yb i o s e n s o ra n ds o l i de c l a r r a y s e n s o r 丽t l lm g hs e n s i t i v i t y , s p e c i f i c i t ya n ds e l e c t i v i t yw h i c hh a db e e nu s e dt od e t e c t t a r g e t ss u c ha sd n a a n dt p r a i tp r o v i d e das i m p l e ，r a p i da n de f f e c i t v em e t h o df o r t h ef a b r i c a t i o no fs o l i de c l a r r a ya n de c ld n ac h i p s i tw o u l db r o a d e nt h er e s e a r c h f i e l do f e c i c h a p t e r1 ：p r e f a c e i i lt h i sc h a p t e r , w ee l a b o r a t e dr e v i e wf r o mt h ep r i n c i p l e s ，c h a r a c t e r i s t i c so ft h e e l e c t r o c h e r n i l u m i n e s c e n c e ，t h ef i v em o s tp r i m a r yt y p e so fe c lr e a c t i o na n dt h e i r a p p l i c a t i o ni na n a l y t i c a lc h e m i s t r yf i e l d w ch i g h l i g h tt h ec h a r a c t e ra n da p p l i c a t i o no f r u ( b p y ) 3 计f u r t h e r m o r e ，w ei n t r o d u c et h es o r t , c h a r a c t e ra n dr e s e a r c hp r o g r e s so f e c lb i o s e n s o r f i n a l l y , e x p o u n d e dt h ea i ma n dt h es i g n i f i c a n c e ，p o i n t e do u tt h e r e s e a r c hc o n t e n ta n dt b ei n n o v a t i o ni nt h i sp a p e r c h a p t e r2 ：e l e c t r o g e n e r a t e dc h e m i l u m i n e s c e n c ei m m u n o a s s a yf o r h u m a n i g g w i t he l e c t r o c h e m i c a l p o l y m e r i z a t i o n b a s e d i mm o b i l i z a t i o nm e t h o d r a b b i t - a n t i h u m a ni g gw a si m m o b i l i z e do ng o l de l e c t r o d eb ye l e c t r o c h e m i c a l p o l y m e r i z a t i o n 、析也p y r r o l e a ne f f i c i e n ti m m u n o a s s a ys t r a t e g yf o rh u m a ni g g d e t e r m i n ei nh u m a ns e r u mw a sd e v e l o p e db a s e do nt h e s p e c i f i ci m m u n o l o g i c a l r e a c t i o nb e t w e e nt h er a b b i t - a n t i - h u m a ni g g ，h u m a n i g ga n dr u ( b p y ) 3 2 + - l a b l e d g o a t - a n t i - h u m a ni g g ，w h i c hf o r m i n gs a n d w i c h t y p e di m m u n o c o m p l e x t h e nt h e t a r g e ti g gi n t h es a n d w i c h - t y p e ds t r u c t u r ew a sd e t e r m i n e db ye l e c t r o g e n e r a t e d c h e m i l u m i n e s c e n c e t h ep a r a m e t e r so fp o l y m e r i z a t i o nt i m e ，i n c u b a t i o nt i m ea n dt h e p ho fd e t e c t i o ns o l u t i o nw e r eo p t i m i z e d t h ep r o t o c o lh a sb e e nc h a r a c t e r i z e d 、析t i l i m p e n d e n c e ，c y c l i cv o l t a m m o g r a ma n de c l ag o o dl i n e a rr e l a t i o n s h i pb e t w e e ne c l i n t e n s i t ya n dh u m a ni g gi nt h ec o n c e n t r a t i o nr a n g eb e t w e e n5 0p g la n d2m g lw a s v 英文摘要 o b t a i n e d ，a n dt h ed e t e c t i o nl i m i tw a s2 0p g l c h a p t e r3 ： a ne l e c t r o e h e m i l u m i n e s c e n c ei m m u n o s e n s o rb a s e do n d i a z o n i u mr e a c t i o nm o d i f i e dc a r b o nn a n o t u b e se l e c t r o d e a n e l e c t r o c h e m i l u m i n e s c e n c e ( e c l ) i m m u n o a s s a yb i o s e n s i n gs t r a t e g y i n v o l v i n gd i a z o n i u mr e a c t i o nm o d i f i e dc a r b o nn a n o t u b e se l e c t r o d ew a sd e v e l o p e d t h em u l t i - w a l l e dc a r b o nn a n o t u b e s ( m w c n t s ) m o d i f i e dg l a s s yc a r b o n ( g c ) e l e c t r o d ew a sf i r s t l yf u n c t i o n a l i z e d 、析t l lc a r b o x y lg r o u p sb yt h ee l e c t r o c h e m i c a l r e d u c t i o no fd i a z o n i u mc a t i o no n t oi t ，a n dt h e nc o v a l e n t l yl i n k e da n t i b o d y t h et a r g e t a n t i g e nw a st h e nd e t e c t e dv i aas a n d w i c hd e t e c t i o na p p r o a c h , i nw h i c ht h er a b b i t a n t i - h u m a ni g gm o d i f i e dm w c n t s g ce l e c t r o d ew a sa st h ec a p t u r ec o m p o n e n t , a n d r u ( b p y ) 3 2 + - l a b e l e dg o a ta n t i h u m a ni g gw a s 鹪t h es i g n a lp r o d u c i n ge l e m e n t s u c h i m m u n o a s s a ys t r a t e g yw a sa p p l i e df o rt h ed e t e r m i n a t i o no fh u m a ni g gd u et ot h e e x c e l l e n te l e c t r i c c o n d u c t i v i t yo fm w c n t sa n ds t r o n gc o v a l e n tb o n db e t w e e n a n t i b o d ya n de l e c t r o d e ，ag o o dl i n e a rr e l a t i o n s h i pb e t w e e ne c li n t e n s i t ya n dh u m a n i g gc o n c e n t r a t i o ni nt h er a n g i n gf r o m2n gm l 。lt o12 0n gm l 1w a so b t a i n e d , a n dt h e d e t e c t i o nl i m i tw a s0 5n gm l 一 c h a p t e r4 ：s o l i ds t a t ee l e c t r o c h e m i l u m i n e s c e n c es e n s o rt h r o u g ht h e e l e e t r o d e p o s i t i o no fr u ( b p y ) 3 2 + a u n p s c h i t o s a nc o m p o s i t ef i l mo n t o e l e c t r o d e t r i s ( 2 ，2 b i p y r i d y l ) r u t h e n i u m ( i i ) ( r u ( b p y ) 3 2 + ) h a sb e e ns u c c e s s f u l l y i m m o b i l i z e do n t oe l e c t r o d e t h r o u g h t h e e l e c 仃o d e p o s i t i o n o f r u ( b p y ) 3 2 + a u n p s c h i t o s a nc o m p o s i t ef i l m i nt h ee x p e r i m e n t s ，c h i t o s a ns o l u t i o nw a s f i r s tm i x e dw i t ha u n a n o p a r t i c l e s ( a u n p s ) a n dr u c o p y ) 3 2 + t h e n , d u r i n g c h r o n o p o t e n t i o m e t r ye x p e r i m e n t s i nt h i sm i x e ds o l u t i o n , ap o r o u s3 - dn e t w o r k s t r u c t u r e df i l mc o n t a i n i n gr u ( b p y ) 3 计，a u n p sa n dc h i t o s a nh a sb e e ne l e c t r o d e p o s i t e d v j - 英文摘要 o n t oc a t h o d ed u et ot h ed e p o s i t i o no fc h i t o s a nw h e np hv a l u ei so v e ri t sp k a ( 6 3 ) t h ea p p l i e dc u r r e n td e n s i t yi sc r u t i a lt ot h ef i l mt h i c k n e s sa n dt h ea m o u n to ft h e e n t r a p p e dr u ( b p y ) 3 2 + a d d i t i o n a l l y , t h e s ed o p i n gr u ( b p y ) 3 2 + i nt h ec o m p o s i t ef i l m m a i n t a l n e dt h e i ri n t r i n s i ce l e c t r o c h e m i c a la n de l e c t r o c h e m i l u m i n e s c e n c ea c t i v i t i e s c o n s e q u e n t l y , t h i sr u ( b p y ) 3 z + a u n p s c h i t o s a nm o d i f i e de l e c t r o d eh a sb e e nu s e di n e c lt od e t e c tt r i p r o p y l a m i n e ，a n dt h ed e t e c t i o nl i m i tw a s5 x10 m c h a p t e r s e l e c t i v ei m m o b i l i z a t i o no f t r i s ( 2 , 2 - b i p y r i d y l ) r u t h e n i u m ( i i ) o n t oa r r a ye l e c t r o d ef o rs o l i d s t a t e e l e c t r o c h e m i l u m i n e s c e n es e n s o rf a b r i e a t i o n a ne f f e c t i v em e t h o df o rs e l e c t i v e i m m o b i l i z a t i o no f l r i s ( 2 ，2 - b i p y r i d y l ) r u t h e n i u m ( i i ) ( r u ( b p y ) 3 2 + ) o n t oo n et a r g e te l e c t r o d es u r f a c eb a s e d o nt h e e l e c t r o d e p o s i t i o n o fr u d s n p s ( r u ( b p y ) 3 2 + d o p e d s i l i c a n a n o p a r t i c l e s ) c i l