高中生物 专题3课题1菊花的组织培养课件6 新人教版选修1.ppt

专题3植物的组织培养技术 课题1菊花的组织培养 课题2月季的花药培养 课题1菊花的组织培养 课题1学习目标 重难点 学习目标 1 掌握植物组织培养的原理2 学会菊花或其他植物的组织培养重难点 植物组织培养过程中使用的无菌技术 菊花的组织培养脱分化 由的植物组织或细胞产生的过程 2 愈伤组织 细胞排列而无规则 是一种的呈的 3 再分化 脱分化产生的继续培养 重新分化出或等器官的过程 4 植物组织培养的理论基础 植物细胞的 高度分化 愈伤组织 疏松 高度液泡化 无定形状态 薄壁细胞 愈伤组织 根 芽 全能性 植物组织培养过程 离体组织或细胞 植物体 细胞分裂素 生长素 愈伤组织 芽 根 细胞分裂素 生长素 细胞分裂素 生长素 植物细胞培养 不需要光 需要光 在无菌和人工控制条件下 将离体的植物器官 组织 细胞 培养在人工配制的培养基上 给予适宜的培养条件 诱导其产生愈伤组织 丛芽 最终形成完整的植株 基础知识 一 植物组织培养的基本过程 由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程 脱分化 去分化 细胞排列疏松而无规则 是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞 愈伤组织 我就是愈伤组织哦 再分化 愈伤组织 脱分化 二 影响植物组织培养的因素 材料的种类 年龄及保存时间长短等营养植物激素ph 温度 光照等条件 1 植物材料的选择 烟草和胡萝卜的组织培养较为容易 枸杞愈伤组织的芽诱导比较难 1 不同的组织 培养的难易程度差别很大 菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝 2 材料的年龄 保存时间的长短 2 ms培养基主要成分包括 a 大量元素 n p s k ca mg等 b 微量元素 b mn cu zn fe mo i co等 c 有机物 甘氨酸 烟酸 肌醇 维生素 蔗糖等 d 植物激素 生长素 细胞分裂素 赤霉素等 常用的植物激素 生长素 细胞分裂素和赤霉素生长素 细胞分裂素是启动细胞分裂 脱分化和再分化的关键性激素在生长素存在的情况下 细胞分裂素的作用呈加强的趋势激素的使用顺序 使用的量及比例影响植物细胞的发育方向 3 植物激素的影响 生长素类 2 4 二氯苯氧乙酸 2 4 d 吲哚乙酸 iaa 萘乙酸 naa 吲哚丁酸 iba 细胞分裂素类 激动素 kt 6 苄基嘌呤 6 ba 玉米素 zt 赤霉素类 赤霉酸 ga3 4 ph 温度 光照 ph控制在5 8左右温度控制在18 22 每日用日光灯照射12h 一 制备ms固体培养基1 配制母液2 配制培养基二 外植体消毒四 培养五 移栽六 栽培 实验操作 3 灭菌 三 接种 一 制备ms固体培养基 ms培养基包括20多种营养成分 实验室一般使用4 保存配制好的培养基母液来制备 1 配制各种母液 无机物中大量元素浓缩10倍 微量元素浓缩100倍 常温保存 激素类 维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg ml的质量浓度单独配制成母液 用母液配制培养基时 需要根据各种母液的浓缩倍数 计算用量 2 配制培养基 分装到锥形瓶中 每瓶分装50ml或100ml 配制培养液 调ph 培养基的分装 由于菊花的茎段的组织培养比较容易 因此不必添加植物激素 3 灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌 1 选材 菊花茎段 取生长旺盛的嫩枝 二 外植体消毒 2 消毒 流水冲洗 菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉 用软刷轻轻刷洗 刷洗后在流水下冲洗20min左右 酒精处理 用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分 放入体积分数为70 的酒精中摇动2 3次 持续6 7s 立即将外植体取出 在无菌水中清洗 消毒液处理 取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分 放入质量分数为0 1 的氯化汞溶液中1 2min 取出后在无菌水中至少清洗3次 漂净消毒液 三 接种 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子 接种室消毒是至关重要的 用70 的酒精喷雾使空气消毒 酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟 1 接种室消毒 2 无菌操作要求 操作要在酒精灯火焰旁完成 每次使用器械后 都需要用火焰灼烧灭菌 接种后立即盖好瓶盖 3 材料的切取和接种 4 接种注意事项 每接种一块外植体前 镊子需放入体积分数为75 的酒精溶液中消毒一次 然后在酒精灯火焰上烧一遍 冷却后再接种 外植体在培养基中要分布均匀 放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定 一般胡萝卜3 4块 菊的茎或叶6 8块 也不要太少 以充分利用培养基中的营养成分和光照条件 插入时应注意方向 不要倒插 茎段 茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分 四 培养 接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养 培养期间应定期消毒培养温度控制在18 22 每日用日光灯光照12h 五 移栽 移栽生根的菊花试管苗之前 应先打开培养瓶的封口膜 让试管苗在培养间生长几日 1 打开封口膜 2 清洗转移 用流水清洗根部的培养基 将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间 3 移栽 幼苗长壮后 移栽到土壤中 固体基质型 含水量高 蓄水性强 透性好 适合栽培 珍珠岩 珍珠岩是一种火山喷发的酸性熔岩 经急剧冷却而成的玻璃质岩石 有弧形或圆形裂隙 如珍珠的结构 所以被命名为珍珠岩 蛭石是一种天然 无毒的矿物质 在高温作用下会膨胀的矿物 它是一种比较少见的矿物 属于硅酸盐 六 栽培 幼苗移栽后 每天观察并记录幼苗的生长情况 适时浇水 施肥 直至开花 请你演示接种过程 动动手 切菊花茎段 左手持瓶 右手解绳攥膜 左手持瓶旋转通过火焰 右手夹菊花茎段插入培养基中 封膜 工作台消毒 点燃酒精灯 排列锥形瓶 课题延伸 探究植物激素的使用比例 a 生长素 细胞分裂素 对植物组织培养的影响例如 设计对照实验 1 不加植物激素 2 a 1 3 a 1 4 a 1 课题1小结 1 植物组织培养的基本过程 2 影响植物组织培养的因素 3 实验操作的步骤 4 实验结果分析与评价 5 课题延伸 学生自我小结 达标检测 1 下列四个选项中 肯定没有采用植物组织培养技术的一项是 a 花药离体培养得到单倍体植株b 秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株c 基因工程培育的抗棉铃虫的棉花植株d 细胞工程培育 番茄 马铃薯 杂种植株 基础巩固 b 2 在植物组织培养中 切取胡萝卜的外植体时一般选择 a 具有木质部的部分b 具有韧皮部的部分c 具有形成层的部分d 具有髓的部分 c 3 菊花的花粉经组织培养可发育成一株幼苗 这一过程不涉及下列哪一项 a 有丝分裂 细胞分化 组织器官的形成b 呼吸作用 光合作用 相关激素的调控c dna的复制 转录 蛋白质的生物合成d 等位基因的分离 非等位基因的自由组合 d 4 某花卉感染了植物病毒 叶子呈现疱状 欲培养出无病毒的后代 应采取的方法是 a 用种子培养后代b 用无明显症状部分的枝扦插c 用茎尖进行组织培养诱导出植株d 用叶表皮细胞进行组织培养 诱导出植株 c 5 下列关于影响植物组织培养的因素的叙述不正确的是 a 幼嫩组织较成熟组织易培养成功b 给外植体消毒用70 的酒精c 接种花药后一段时间内不需要光照 但幼小植株形成后需要光照d 生长素与细胞分裂素含量之比较高时有利于芽的分化 d 6 乙醇等 绿色能源 的开发备受关注 利用玉米秸秆等生产燃料酒精已成大势所趋 植物组织培养可实