尿液蛋白质检验ppt课件.ppt

病例 患者 男 68岁 因浮肿 无尿入院 入院前因上呼吸道感染多次使用庆大霉素和复方新诺明而出现浮肿 尿量进行性减少 体格检查 眼睑浮肿 双下肢可凹性水肿 1 初步诊断为什么疾病 2 要明确诊断需要哪些进一步的实验室检查 急性肾小管坏死 尿液蛋白质检验 UrineProteinAnalysis 黄uanghui 教学目标 了解蛋白尿的定义 理解蛋白尿形成的原因和机制 掌握尿液蛋白质检查的检测原理 方法学评价 质量保证及临床意义 教学内容 蛋白尿形成的原因和机制 尿液蛋白质的检验 尿液蛋白质检验的临床意义 一 蛋白尿的定义 肾小球的滤过 肾小管与集合管的重吸收 肾小管的分泌 正常人尿液中蛋白质的含量很少 一 蛋白尿的定义 健康人尿液蛋白质含量很少 当尿液蛋白质超过150mg 24h 1或超过100mg L 1时 蛋白质定性试验为阳性称为蛋白尿 proteinuria 二 蛋白尿形成的原因和机制 肾性蛋白尿renalproteinuria 肾小球性蛋白尿glomerularproteinuria 混合性蛋白尿mixedproteinuria 肾小管性蛋白尿tubularproteinuria 二 蛋白尿形成的原因和机制 肾前性蛋白尿prerenalproteinuria 溢出性蛋白尿overflowproteinuria 二 蛋白尿形成的原因和机制 肾后性蛋白尿postrenalproteinuria 组织性蛋白尿histicproteinuria 二 蛋白尿形成的原因和机制 肾小球性蛋白尿 蛋白尿的选择性 选择性蛋白尿 肾小球损伤程度较轻 以分子量4 9万中相对分子量的白蛋白为主 非选择性蛋白尿 肾小球损伤程度较重 尿液中大分子量蛋白质和中分子量蛋白质同时存在 二 蛋白尿形成的原因和机制 二 蛋白尿形成的原因和机制 三 尿液蛋白质的检验 尿液中有无蛋白质 尿液中蛋白质的量 尿液中有哪一类蛋白质 三 尿液蛋白质的检验 蛋白质理化性质 蛋白质的两性电离和等电点 蛋白质的变性 蛋白质的沉淀 蛋白质的呈色反应 尿液蛋白质定性 加热乙酸法 磺基水杨酸法 干化学试带法 三 尿液蛋白质的检验 三 尿液蛋白质的检验 尿液蛋白质定性 加热乙酸法 蛋白质 加热 蛋白质变性 蛋白质沉淀 稀乙酸 三 尿液蛋白质的检验 尿液蛋白质定性 加热乙酸法 方法经典而准确 为蛋白定性确证实验 特异性强 干扰因素少 灵敏度较低 为150mg L pH值 盐离子浓度对实验结果的影响 三 尿液蛋白质的检验 尿液蛋白质定性 磺基水杨酸法 蛋白质 酸性条件 氨基酸阳离子 蛋白盐沉淀 磺酸根离子 三 尿液蛋白质的检验 尿液蛋白质定性 磺基水杨酸法 操作简便 反应灵敏 结果显示快 检测灵敏度高 为50mg L 造影剂 青霉素钾盐等可以造成假阳性 三 尿液蛋白质的检验 尿液蛋白质定性 干化学试带法 蛋白质 酸碱指示剂 复合物 酸碱指示剂电离 发生颜色改变 尼龙膜层 防止大分子物质对反应污染 碘酸盐层 破坏维生素C等干扰物质 试剂层 与尿中所检测化学物质发生反应 支持层 塑料片 起支持作用 试带组成 尿液蛋白质的检验 尿干化学分析仪工作原理示意图 机械系统 光学系统 电路系统 三 尿液蛋白质的检验 尿液蛋白质定性 干化学试带法 操作简便 快速 易于标准化 对球蛋白 本周蛋白的敏感度低 不同类型试带灵敏度有一定的区别 在70 100mg L 三 尿液蛋白质的检验 如何选择这些定性方法 尿液蛋白质定性 三 尿液蛋白质的检验 尿液蛋白质定性 三 尿液蛋白质的检验 尿液蛋白质定性 采用干化学法或磺基水杨酸法进行尿蛋白初查 加热乙酸法作为尿蛋白定性确证实验 当不同定性实验方法结果不一致时如何处理 三 尿液蛋白质的检验 1 尿液中存在的蛋白质为球蛋白 加强与临床医师的沟通非常必要 磺基水杨酸法阳性 干化学试带法为阴性 2 蛋白质含量介于两种方法灵敏度之间 3 尿液中含有青霉素或者造影剂等物质 三 尿液蛋白质的检验 尿液蛋白质定量 双缩脲法 比浊法 染料结合法 需要对尿液标本进行浓缩处理 三 尿液蛋白质的检验 尿液蛋白质定量 三 尿液蛋白质的检验 如何选择这些定量方法 尿液蛋白质定量 三 尿液蛋白质的检验 尿液蛋白质定量 1 根据实验室条件选择合适的定量方法 2 卫生部临检中心推荐双缩脲法和丽春红S法 3 加强尿液蛋白质定量的质量控制非常必要 尿液蛋白质分类 SDS PAGE凝胶电泳 双向凝胶电泳 三 尿液蛋白质的检验 三 尿液蛋白质的检验 尿液蛋白质分类 SDS PAGE凝胶电泳 SDS与蛋白质结合 消除了蛋白质分子中的电荷差异 再通过聚丙烯酰胺的分子筛作用 将蛋白质按分子量大小相互分离 三 尿液蛋白质的检验 尿液标本 葡聚糖 PEG等 SDS PAGE凝胶电泳 染色 光密度扫描 1肾小球性蛋白尿2肾小管性蛋白尿3生理性蛋白尿4混合性蛋白尿 三 尿液蛋白质的检验 三 尿液蛋白质的检验 尿液蛋白质分类 双向凝胶电泳 蛋白组学的重要技术 第一向基于蛋白质的等电点不同进行分离 第二向则按蛋白质分子量的不同进行分离 三 尿液蛋白质的检验 尿液蛋白质分类 1 SDS PAGE凝胶电泳用于对尿液蛋白质进行分类 2 双向凝胶电泳主要用于科学研究 三 尿液蛋白质的检验 三 尿液蛋白质的检验 质量保证 分析前质量控制 分析中质量控制 坚持室内质控 遵守SOP操作规程 注意实验过程中的影响因素 分析后质量控制 完善的报告审核制度 结果不符合时及时分析原因 生理性蛋白尿病理性蛋白尿 四 尿液蛋白质检验的临床意义 肾前性蛋白尿肾性蛋白尿肾后性蛋白尿 功能性蛋白尿 functionalproteinuria 体位性蛋白尿 posturalproteinuria 偶然性蛋白尿 accidentalproteinuria 四 尿液蛋白质检验的临床意义 生理性蛋白尿 病理性蛋白尿 四 尿液蛋白质检验的临床意义 患者 男 68岁 因浮肿 无尿入院 入院前因上呼吸道感染多次使用庆大霉素和复方新诺明而出现浮肿 尿量进行性减少 体格检查 眼睑浮肿