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文档简介
专题5课题1dna的粗提取与鉴定(测)(满分60分,40分钟完成) 班级 姓名 总分 一、单选题(30分,每题3分)1.在利用鸡血进行“dna的粗提取与鉴定”的实验中,相关的叙述正确的是( )a用蒸馏水将nacl溶液浓度调至0.14mol/l,滤去析出物b调节nacl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部分杂质c将丝状物溶解在2mol/l的nacl溶液中,加入二苯胺试剂即呈蓝色d用菜花替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤相同【答案】b【解析】dna在0.14mol/l的nacl溶液中溶解度最低,dna存在于析出物中,不能去掉析出物,a错误; 利用dna在不同氯化钠溶解中的溶解度不同,可以通过dna的反复溶解和析出除去杂质,蛋白酶能水解蛋白质,而对dna没有影响,因此可以利用木瓜蛋白酶除去杂蛋白,b正确;用二苯胺试剂检测dna分子的条件是水浴加热,c错误;植物细胞有细胞壁保护着,所以用菜花做实验材料时,需要研磨,加入食盐和洗涤剂,d错误2.下图所示为“dna的粗提取与鉴定”实验的部分操作过程,有关分析错误的是( )a图中加入蒸懷水的目的相同b图中向鸡血细胞液内加入少许嫩肉粉有助于去除杂质c图操作的目的是纯化dna,去除溶于95%酒精中的杂质d图中2mol/lnacl溶液能溶解黏稠物中的dna【答案】a【解析】图中加入蒸馏水的目的是使得细胞吸水涨破,释放核dna,中加入蒸懷水的目是析出dna,a错误;图中向鸡血细胞液内加入少许嫩肉粉有助于去除杂质,b正确;dna不溶于酒精,所以图操作的目的是纯化dna,去除溶于95%酒精中的杂质,c正确;2mol/lnacl溶液中dna的溶解度最高,d正确。3.关于dna粗提取和鉴定实验的操作及原理的叙述,正确的是( )a用蒸馏水使猪的红细胞涨破获取含dna的滤液b控制nacl溶液的浓度可以实现去除杂质的目的c用玻璃棒轻缓搅拌滤液可使析出的dna量减少d利用dna溶于乙醇的性质进一步纯化dna【答案】b【解析】dna主要位于细胞核,哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核,因此不能用来作为提取dna的材料,a错误;由于dna和蛋白质等物质在氯化钠的溶解度不同,因此可以控制氯化钠的浓度来去掉杂质,用高盐浓度的溶液溶解dna,能除去在高盐中不能溶解的杂质,用低盐浓度使dna析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质,b正确;用玻璃棒搅拌的目的是让dna充分溶解,c错误;dna不溶于酒精,而其它杂质溶解于酒精,故利用体积分数为95%的冷酒精来纯化dna,d错误。4.dna粗提取实验中,应尽可能避免dna断裂和降解。相关操作正确的是( )a以菜花为材料进行研磨时,可以适当加热以促进dna溶解b向dna溶液中迅速加入蒸馏水,使dna快速析出c将丝状物溶解到2 moll-1nacl溶液中后,加水析出d向dna溶液中加入冷却的酒精并沿同一方向缓慢搅拌【答案】d【解析】dna耐高温,因此适当加热不会促进dna溶解,a错误;在0.14mol/lnacl溶液中,dna的溶解度最低,因此用蒸馏水将nacl溶液浓度调至0.14mol/l,滤去滤液,b错误;dna丝状物溶解在2 mol/lnacl溶液中,加95%的冷酒精析出,c错误;dna不溶于酒精,因此可用体积分数为95%冷酒精并沿同一方向缓慢搅拌析出dna,d正确。5.下列有关实验操作的叙述,不正确的是( )a鉴定蛋白质实验中,要先将双缩脲试剂a、b等量混匀后再加入待测样液b绿叶色素分离实验中,要先加适量层析液再放划好滤液细线的滤纸条c进行dna粗提取实验时,可使用新鲜的鸡血细胞作为理想材料d在果酒制作的过程中,应将装置密封放在25左右的环境下【答案】a【解析】a、鉴定蛋白质实验中,要先加双缩脲试剂a液,形成碱性环境后再加b液,a错误;b、绿叶色素分离实验中,要先加适量层析液,然后往层析液中放入划好滤液细线的滤纸条,b正确;c、进行dna粗提取实验时,可使用新鲜的鸡血细胞作为理想材料,c正确;d、在腐乳制作的毛霉生长阶段,应将豆腐块整齐排放并留有一定空隙,给毛霉生长的空间,d正确6.对利用新鲜的菜花进行“dna粗提取与鉴定”实验,有关说法正确的是( )a向菜花组织中加入蒸馏水并搅拌即可释放核dnab加入洗涤剂的作用是瓦解细胞膜并溶解dnac利用dna在不同浓度nacl中溶解度不同,可粗提取dnad含dna的氯化钠溶液与二苯胺在常温下混合呈蓝色【答案】c【解析】菜花细胞为植物细胞,有细胞壁保护,因此加蒸馏水不会吸水胀破,a错误;加入洗涤剂的作用是瓦解细胞膜,但不能溶解dna,b错误;利用dna在不同浓度nacl中溶解度不同可粗提取dna,c正确;含dna的氯化钠溶液与二苯胺在沸水浴下混合呈蓝色,d错误。7.下列对“dna的粗提取和鉴定”实验原理的叙述,正确的是( )a利用dna能溶于酒精溶液,而蛋白质不溶于酒精溶液,可将dna与蛋白质分离b利用85的高温能使蛋白质变性,却对dna没有影响的特性,将dna与蛋白质分离c利用dna在0.14moll1nacl溶液中溶解度最大的特点,可将dna与杂质分离d在dna滤液中加入嫩肉粉,通过木瓜蛋白酶的作用,可将dna与蛋白质分离【答案】d【解析】利用dna不能溶于酒精溶液,而某些蛋白质能溶于酒精溶液,利用体积分数为95%的酒精可将dna与蛋白质分离,a错误;高温对蛋白质和dna都有影响,只是dna对高温的耐受性强于蛋白质,b错误;利用dna在0.14moll-1nacl溶液中溶解度最小的特点,可将dna与杂质分离,c错误;利用酶的专一性,蛋白酶只能将蛋白质分解,而不能分解dna,在dna滤液中加入嫩肉粉,通过木瓜蛋白酶的作用,可将dna与蛋白质分离,d正确。8.某同学用洋葱进行dna 粗提取和鉴定实验,操作错误的的是( )a.加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨b.用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的 dnac.加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌d.加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热【答案】a【解析】加入洗涤剂后研磨动作要轻缓、柔和,否则容易产生大量的泡沫,不利于后续步骤的操作,a错误;利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的dna与蛋白质分开,起到纯化的作用,b正确;加入酒精溶液,静置溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的dna,用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌,防止断裂,c正确;用二苯胺鉴定dna需要水浴加热,d正确。9.下列关于生物技术实践的叙述中,正确的是 ( )a.用移液管稀释菌液时,吹吸三次的目的是使菌液与水充分混匀b.参与制作果酒、果醋和腐乳的菌种中只有毛霉是真核生物c.海藻酸铀溶液浓度过高会导致制作的凝胶珠颜色过浅呈白色d.用花菜提取dna 时加入食盐和洗涤剂的目的分别是充分研磨和瓦解细胞膜【答案】a【解析】用移液管稀释菌液时,吹吸三次的目的是使菌液与水充分混匀,故a正确。果酒与酵母菌相关,果醋和醋酸菌相关,腐乳与多种霉菌相关,只有醋酸菌是原核生物,其他是真核生物,故b错。海藻酸钠溶液浓度过低会导致制作的凝胶珠颜色过浅呈白色,固定的酵母细胞少,故c错。用花菜提取dna 时加入食盐和洗涤剂的目的分别是溶解dna和瓦解细胞膜,故d错。10.下表是关于dna粗提取与鉴定实验中所使用的材料、操作及其作用的表述,正确的是( )试剂操作作用a柠檬酸钠溶液与鸡血混合防止血液凝固b蒸馏水与鸡血细胞混合保持细胞形状c蒸馏水加入到溶解有dna的nacl中加速dna的溶解d冷却的酒精加入到过滤后dna的nacl中产生特定的颜色反应【答案】a【解析】柠檬酸钠溶液是抗凝剂,与鸡血混合后可防止血液凝固,a正确;第一次使用蒸馏水是让蒸馏水与鸡血细胞混合,作用是让血细胞吸水膨胀,加速血细胞破裂,b错误;第二次使用蒸馏水是将蒸馏水加入到溶解有dna的2mol/l的nacl溶液中,作用是使nacl溶液的浓度降低至0.14 mol/l,此时dna在nacl溶液中的溶解度最小,从而使dna析出,c错误;dna不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的dna,d错误。二、非选择题(30分,每格2分)11.(16分)某实验小组以洋葱组织为实验材料,进行dna粗提取和鉴定的实验,实验主要过程如下图,回答下列问题:(1)步骤一中需加入一定量的洗涤剂和 对洋葱组织进行处理,加入前者是为了瓦解细胞膜结构,加入后者的目的是_ 。将搅拌和研磨后的物质进行过滤,即可得到含有dna的滤液。(2)步骤二是dna纯化过程中的关键步骤,可以采用以下几种不同的方法:滤液中nacl浓度在0.14 moll时可分离出dna,若要再次提纯,需要将其溶解在 moll的nacl溶液中;通常会向dna粗提取物中加入嫩肉粉,其目的是_ ;将得到的dna粗提取物放在6075水浴中保温1015 min,蛋白质被破坏,但仍能得到纯度较高的dna,说明了dna .(3)步骤三中向滤液中加入dna体积分数为95%的酒精的目的是_ _ ,依据的原理是 。得到纯净的dna后,可利用dna与 在沸水浴条件下发生显色反应,来对其进行鉴定。【答案】(1)食盐(氯化钠) 溶解dna(2)2 破坏其中的蛋白质 具有较高的稳定性(或耐较高温度)(3)析出dna dna不溶于酒精,但酒精可以使蛋白质变性并与dna分离 二苯胺【解析】(1) 进行dna粗提取和鉴定时,步骤一中需加入一定量的洗涤剂和食盐(氯化钠)对洋葱组织进行处理,加入前者是为了瓦解细胞膜结构,加入后者的目的是溶解dna,将搅拌和研磨后的物质进行过滤,即可得到含有dna的滤液。(2)步骤二是dna纯化过程中的关键步骤,可以采用以下几种不同的方法:利用dna在浓度为0.14 moll的nacl溶液中溶解度最低可分离出dna;若要再次提纯,需要将其溶解在2moll的nacl溶液中。通常会向dna粗提取物中加入嫩肉粉,由于嫩肉粉中含有蛋白酶,可破坏其中的蛋白质。由于dna具有较高的稳定性(或耐较高温度),将得到的dna粗提取物放在6075水浴中保温1015 min,则蛋白质被破坏,可得到纯度较高的dna。(3)由于dna不溶于酒精,但酒精可以使蛋白质变性并与dna分离,故步骤三中向滤液中加入dna体积分数为95%的酒精的目的是析出dna。得到纯净的dna后,可利用dna与二苯胺在沸水浴条件下发生显色(蓝色)反应,来对其进行鉴定。12.(14分)真核生物细胞内,大量dna和蛋白质以及一些rna等混杂在一起,难以分离。生物兴趣小组的同学为了获得纯度相对较高的dna展开了实验探究。(1)分离各种物质的基本思路是根据dna和其他物质理化性质的不同而采取一定的方法,如图是从各种物质之间 的差异角度开展研究:a、取鸡血细胞悬液10ml,加蒸馏水20ml,同时用玻璃棒 (填“轻轻搅拌”或填“快速搅拌”)。过滤,取滤液,转移到塑料材质的大烧杯中。b、沿大烧杯内壁持续、缓慢地加入饱和硫酸铵溶液,用玻棒沿一个方向 (填“轻轻搅拌”或填“快速搅拌”),同时不断收集析出的物质。下图是根据鸡血中几种物质的析出情况绘制的曲线,请据图分析:c、如果只要收集纤维蛋白,可采取的措施有 。d、先用饱和度40%的硫酸铵溶液析出绝大部分纤维蛋白和大部分球蛋白,再在饱和度约为 的硫酸铵溶液中析出dna(既保证dna提取量较大又避免其他杂质过多)。(2)如果要进一步去掉其他杂质,尽可能提高获得的dna纯度,可采取的两种办法有:将dna与球蛋白的混合物加入到 中,收集再次析出物;用 处理溶有dna与蛋白质的溶液。【答案】(1)溶解度 a、快速搅拌 b、轻轻搅拌 c、在硫酸铵浓度达到30%之前收集析出物 d、50% 球蛋白(2)冷却酒精 嫩肉粉(木瓜蛋白酶)【解析】(1)分析曲线图可知,不同物质在不同浓度的硫酸铵中的析出的相对量有所差别,即分离各种物质的基本思路是根据dna和其他物质之间溶解度的差异角度开展研究:a、取鸡血细胞悬液loml,加蒸馏水20ml,此时可以用玻璃棒快速搅拌,以加速血细胞的破裂。b、沿大烧杯内壁持续、缓慢地加入饱和硫酸铵溶液,为了防止将dna的絮状物搅碎,此时应用玻棒沿一个方向轻轻搅拌,同时不断收集析出的物质。c、图中看出,纤维蛋白的溶解度最低,硫酸铵浓度在20%之前已经开始析出,说明溶解度开始减小;在浓度为30%时析出最快,说明此时的溶解度最低,并且超过30%后球蛋白也将逐渐析出,因此如果只要收集纤维蛋白,可以在硫酸铵浓度达到3
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