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文档简介
陕西省西安市田家炳中学高中生物 生物组织中还原性糖、脂肪、蛋白质的鉴定导学案 新人教版必修1【课前自主预习】一实验目的: 尝试用化学试剂检测生物组织中还原性糖和蛋白质,阐明实验原理颜色反应,识记和区分用于还原性糖、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色,初步掌握鉴定上述化合物的基本方法,学会描述实验现象,掌握naoh溶液和cuso4溶液的使用方法。二实验原理: 某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。1生物组织中普遍存在的还原性糖类较多,有单糖、麦芽糖和乳糖。由于分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基,因此叫做还原糖;蔗糖、淀粉等分子内没有,为非还原糖。实验中所用的斐林试剂,只能鉴定生物组织中还原性糖,而不能鉴定非还原性糖。还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的cu 2o沉淀。如: 葡萄糖 + 2cu2+ + 4oh 加热 葡萄糖酸 + cu 2o(砖红色)+ h 2o即cu 2+被还原成cu 2o,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。用斐林试剂鉴定还原糖时,溶液变化过程为:浅蓝色棕色砖红色沉淀2蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性naoh溶液中能与双缩脲试剂中的cu2+作用,产生紫色反应。)3脂肪可被苏丹染液染成橘黄色(或被苏丹染液染成红色)3花生种子四、实验试剂1斐林试剂(包括甲液:质量浓度为0.1g/ ml naoh溶液和乙液:质量浓度为0.05g/ ml cuso4溶液)2双缩脲试剂(包括a液:质量浓度为0.1g/ ml naoh溶液和b液:质量浓度为0.01g/ ml cuso4溶液)3苏丹染液 苏丹染液五、方法步骤:(一)还原性糖的鉴定操作方法注意问题解释1. 制备组织样液。(去皮、切块、研磨、过滤)苹果或梨组织液必须临时制备。因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖。2. 取1支试管,向试管内注入2ml组织样液。3. 向试管内注入1ml新制的斐林试剂,振荡。应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂;切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时,生成的cu ( oh ) 2在70900c下分解成黑色cuo和水;甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无cu oh生成。4. 试管放在盛有50-650c温水的大烧杯中,加热约2分钟,观察到溶液颜色:浅蓝色 棕色 砖红色(沉淀)最好用试管夹夹住试管上部,使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向实验者。防止试管内的溶液冲出试管,造成烫伤;(二)脂肪的鉴定切片 -染色-洗浮色-显微镜观察(三)、蛋白质的鉴定操 作 方 法注 意 问 题解 释制备组织样液。(浸泡、去皮研磨、过滤。)黄豆浸泡1至2天,容易研磨成浆,也可购新鲜豆浆以节约实验时间。鉴定。加样液约2ml于试管中,加入双缩脲试剂a,摇匀;再加入双缩脲试剂b液34滴,摇匀,溶液变紫色。a液和b液也要分开配制,储存。鉴定时先加a液后加b液。cuso4溶液不能多加。先加naoh溶液,为cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。a、b液混装或同时加入,会导致cu2+变成cu ( oh ) 2沉淀,而失效。否则cuso4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。可用蛋清代替豆浆。蛋清要先稀释。如果稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上,使反应不容易彻底,并且试管也不易洗干净。【课堂自主探究】思考1完成下列表格:还原性糖淀粉蛋白质脂肪试剂现象思考2试以葡萄糖为例写出相应方程式: 思考3蛋白质检测的反应机制是什么? 思考4做还原性糖鉴定实验应选择什么样的实验材料?为什么? 思考5为什么苹果或梨组织液必须临时制备? 思考6做蛋白质的鉴定实验应选择什么样的实验材料? 思考7斐林试剂与双缩脲试剂相同吗?区别是什么? 思考8实验中应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂,为什么? 思考9实验中能否将斐林试剂的甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测?为什么? 思考10还原糖溶液检测过程中出现的颜色变化过程是怎样的? 思考11蛋白质检测时为什么要先加双缩脲试剂a液后加b液,而不能同时加入? 思考12检测时向试管内加双缩脲试剂b液4滴,为什么cuso4溶液不能多加? 达标训练:1.检测糖尿病患者尿液中是否含有葡萄糖可用的试剂是 ( )a.碘液 b.苏丹染液 c.双缩脲试剂 d.斐林试剂2.在做脂肪鉴定的实验中用到体积分数为50%的酒精溶液,其作用是 ( )a.杀菌消毒 b.辅助染色 c.溶解脂肪 d.洗去浮色3.在实验鉴定蛋白质时,需事先留出一些样液的目的是 ( )a.与反应混合液的颜色作对比 b.失败后重做一遍c.鉴定还原糖 d.留作下一次试验用4.在鉴定还原糖的实验中,加入斐林试剂时应 ( )a. 先加入斐林试剂甲液,后加入乙液 b. 先加入斐林试剂乙液,后加入甲液c. 将斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后再加 d. a、b、c三项操作方法都正确5.生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定中,以下操作错误的是 ( )a可溶性还原糖的鉴定,可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀b只有脂肪的鉴定需要显微镜c用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热d使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用6.下列那组试剂在使用过程中,必须经过加热 ( ) a斐林试剂鉴定还原糖的过程中 b苏丹染液在鉴定动物组织中的脂肪时c双缩脲试剂在鉴定蛋白质时 d碘液鉴定淀粉时7. 【b级】若以鸡蛋蛋白液为材料进行蛋白质鉴定实验,发现蛋白液与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管壁上。下列关于这一现象形成原因的描述中正确的是 ( )a鸡蛋蛋白液稀释不够,搅拌不匀 b只添加了双缩脲试剂a,未添加双缩脲试剂bc鸡蛋蛋白液不是合适的实验材料 d蛋白液与双缩脲试剂的反应时间不够长8.2008年9月,我国发生了“三鹿”婴幼儿奶粉事件,引起了人们对奶粉质量的高度关注。普通奶粉中的主要营养成分是蛋白质、脂肪和葡萄糖等,若要检测这些成分,可选用那些试剂(多选) ( ) a双缩脲试剂 b碘液 c苏丹染液 d斐林试剂9.在生物组之中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定中,对实
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