光合细菌菌剂.doc

光合细菌的培养方法 光合细菌(简称PSB)是地球上最早出现具有原始光能合成体系的原核生物，是一大类在 厌氧条件下进行不放氧光合作用的细菌的总称，其广泛存在于地球生物圈的各处。光合细菌 在水产养殖上的应用主要有以下五个方面：作为养殖水质净化剂；作为饲料添加剂；用于鱼 、虾、贝幼体的培育；作为动物性生物饵料的饵料；防治鱼病。光合细菌的培养，按次序分 容器工具的消毒、培养基的配制、接种、培养管理四步。 一、容器、工具的消毒 消毒方法参考本报第1199期B3版单细胞藻类的培养方法一文中的容器、工具的消 毒方法。 二、培养基的配制 1.培养基配方 培养光合细菌首先应选择一个能基本满足培养种的生理生态特性和营养 要求、经过培养实践证明且效果比较理想的培养基配方。 2.配制培养基的用水 如果培养的光合细菌是淡水种，菌种培养可用蒸馏水；生产性培 养可用自来水（或井水）配制。如果培养的光合细菌是海水种，则用天然海水（或人工海水 ）配制。用天然海水配制培养基，可免加镁盐和钙盐，因为海水中镁、钙元素的含量已能满 足需要。此外，在海水中加入磷元素时不能用磷酸氢二钾，应用磷酸二氢钾，否则会产生大 量沉淀。 3.配制 按培养基配方把所列物质称量，逐一溶解后，混合，配成培养基。也可把部分 组份配成母液，使用较方便。 4.灭菌和消毒 菌种培养用的培养基应连同培养容器用高压蒸气灭菌锅灭菌。小型生产 性培养可把配好的培养液用普通铝锅煮沸消毒。大型生产性培养则先把水用次氯酸钠处理、 消毒，然后加入配方所列组份，溶解、混合。 三、接种 培养基配制好后，应立即进行接种。光合细菌生产性培养的接种量比较高， 一般为2050，即菌种母液量和新配培养量之比为1：4（20）1：1（50），且不 应低于20，尤其微气培养接种总量应高些，否则，光合细菌在培养液中很难占绝对优势。 四、培养管理 光合细菌的培养过程中，管理工作包括日常管理操作和测试、生长情况 的观察检查和出现问题的分析处理等三个方面。 1.日常管理和测试 （1）搅拌或充气 光合细菌培养过程中必须搅拌或充气，其作用 是帮助沉淀的光合细菌上浮获得光照，保持菌细胞的良好生长。小型厌气培养常用人工摇动 培养容器的方法使菌细胞上浮，可在接种前在培养容器中加入少量玻璃珠，摇动时易于搅起 菌细胞。每天至少摇动3次，定时进行。也可使用磁力搅拌器搅拌，把锥形瓶或其他玻璃培 养容器放置在磁力搅拌器上，瓶内放磁力搅拌棒，连续搅拌或间隔定时搅拌，搅拌时控制转 速以液面微起波纹而无旋涡为适度。大型厌气培养则用机械搅拌器搅拌或使用小水泵使水缓 慢循环运转，保持菌体悬浮。 微气培养是通过充气帮助菌体上浮的，因为培养液中溶解氧含量增加，光合细菌繁殖受 到抑制，产量下降，所以必须严格控制充气量。一般采用定时断续充气，每小时每升水充气 1升1.5升左右，溶解氧含量保持在1ppm以下。 （未完待续）光合细菌培养基一、生产条件1、 培养介质：含菌量较低的清洁淡水。地下水（井水）含菌量低，为最佳水源；清洁的地表水（河水）也可使用；含氯量较高的自来水应敞口放置一天；蒸馏水及纯净水固然很好，但成本太高。 选取水源时，最好先做几种方便取用的水源的对比试验，使用哪里的水源在培养试验中最先变成红色（生长良好），就选用哪里的水作为生产用水。2、酸碱度：PH值在7.5-8.5为最好，光合细菌的适应PH范围在6-10之间。 3、温度：以30-34为最适生长温度，其适应的生长温度范围为18-45,实际操作越接近最适温度范围越好。本公司产品配方中含有抑制高温季节绿硫菌的产生，所以不惧高温，也不会大量产生绿硫菌。 4、光照强度：以3000-4000勒克斯（LX）为最佳，即每25公斤菌液需要用相当于60瓦左右的白炽灯炮作光源，而太阳光照为最好且不要成本。5、透气性：密闭、敞口皆可培养，密闭但是留十分之一空气效果更好。6、工具：筒状塑料农膜或透明玻璃池、敞口塑料容器（400升）、两头能接管的最小型自吸泵或水舀子、白帜灯炮、温度计二、生产方法（以生产1吨光合细菌菌液为例）（一） 培养容器1、两端开口的长筒状透明塑料农膜，尽量选择厚一点的不破，尽量选择幅度宽一点的，剪成10米长一个备用2、透明玻璃连接而成的池子，类似于金鱼池，但是要做薄（30厘米厚）以方便两边采光 （二） 生产过程1、第一次培养，可以得到220公斤菌种（1）在阳光充足的上午10点左右，先将准备用水160公斤（有条件可以先将水加温到30度，这样培养的速度更快，菌液质量更好。注意温度不可过高破坏菌种）加入到敞口塑料容器（400升）内，再加入培养基二袋，建议先用小容器少量水溶解培养基搅拌，慢慢加水慢慢溶解直至溶解完全，最后接种菌种60公斤搅拌均匀，可以按照上述比例相应增加批次量。（2）选择采光充足，地面平坦的地方（可以垫上编织袋及其它东西，以防地面温度太低），将上述混合培养液灌入或用自吸泵直接抽入透明塑料农膜内，尽量排尽空气，可以有少量小气泡，两端系紧。（3）玻璃池子可以直接配培养基和接种菌种，需搅拌均匀。（4）室外温度适宜情况下（30-34），将菌液直接置于阳光充足的地方培养。温度过低（气温低于25度），可用透明塑料薄膜搭建温棚，采光增温，仍达不到要求，应采取其它增温措施；温度过高（气温高于40度），将菌液置于通风的地方，仍过高，应在桶周围洒水降温，或采取部分遮阳（用黑色的遮阳塑料网）。 （5）为了光合细菌更快繁殖，如方便请白天每隔3小时人工摇动菌液一次，此方法是为了使下沉菌种上浮，更好接触培养基加快繁殖，如不方便也可以不用，只是繁殖相对较慢。（6）本公司菌种红螺菌特别对温度要求很高，喜高温，只要温度达到（34度以上），即使有微弱光均可快速生长。所以有条件特别是气温较低时尽量将水温加热到30度。（7）如连续晴天或气温较高的阴天，3-4天后可培养成熟；若有下雨天或气温较低阴天，培养时间则相对延长；连续有下雨天或气温较低阴天，应采用60瓦的白帜灯炮悬于农膜上方10厘米，每隔30厘米间距一个连续光照，缩短培养时间；也可以采用白天晒太阳，晚上用白帜灯泡补光，缩短培养时间。2、第二次培养，可以生产1000公斤菌液（1）在阳光充足的上午10点左右，先将准备用水800公斤（有条件可以先将水加温到30度，这样培养的速度更快，菌液质量更好，注意温度不可过高破坏菌种）加入到敞口塑料容器内，再加入培养基八袋，建议先用小容器少量水溶解培养基搅拌，慢慢加水慢慢溶解直至溶解完全，最后接种第一次培养成功的220公斤菌种搅拌均匀。若配比容器较小，可以按照上述比例相应减小批次量。（2）-（7）见第一次培养方法3、注意事项（1）尽量选择在阳光充足的上午10点开始，因为培养繁殖初期8小时对温度和阳光要求最高，是关键阶段。（2）对水温要求较高，特别第一次培养200公斤菌种尽量采用人工加热，第二次培养数量较大，有条件可以加热，没有条件可以提前一天准备用阳光晒热。可以采用加热少量水高温再兑至30度。三、培养过程中菌液可能出现的问题及对策1、变淡原因：接种量过少，菌种老化、杂菌过多,PH值过低或过高,光照不足，温度过低或过高，水的硬度过高。对策：调节至正常状态。2、变黑原因：气温较高的季节，刚培养好的菌液因长时间失去光照。对策：施以光照。3、变绿原因：可能是菌液中绿硫菌大量繁殖，多见于高温季节。对策：连续多次密闭培养，或更换菌种和水源。4、变灰原因：接种量少，菌种不纯，光照不足，PH值过低。对策：选用优质菌种，按要求接种，增强光照，调适PH值。益瑞光合微生物菌肥是由青岛普瑞生物制品有限公司生产的一种新型微生物肥料，目前已获得国家农业部审批，登记证号为“微生物肥（2007）临字（0630）号”。该技术为我公司自有技术，由山西大学张肇铭教授主持研究，经科技成果鉴定已达到国际领先水平。该项目先后申报并获授权8项国家专利，荣获北京国际发明展览会金奖，系国家级星火项目计划、国家科技攻关计划和山西省重点科技成果推广项目。该菌肥是利用光合细菌的独特生理学特性，采用多株光合细菌菌种而发酵生产的一种高效活性硒微生物菌剂。首先，它富含生物硒，经光合微生物转化的生物有机硒，易被植物体吸收，可生产出富硒食品；其次，它富含植物生长所必须的多种营养元素、维生素、生长刺激因子及多种调节植物新陈代谢的活性物质和微量元素，是一种新型高效的微生物肥料；再次，施用该菌肥可有效降解植物体内的农药残留和重金属污染，为我们提供健康的绿色有机蔬菜。 同时，试验证明对部分病虫害如根线虫、霜霉病等具有抑制作用。因此，该微生物菌肥和其它种类的肥料相比，具有多种综合效应和独特功效。该菌肥适用于粮食、蔬菜、果木、花木、茶桑等作物，由于其独特的生理学特性，该菌肥可针对不同类型的作物采用不同的施用方法，可将其稀释后进行浸种、拌种、灌根和叶面喷施。施用本菌肥，可生产出具有抗癌保健功效的富硒农产品；可大幅提高产量（10% 40%）；促进营养转换，提高产品品质（果形美、色泽鲜、口感好、各种营养成分增加）；作为种肥施入土壤，可改善