高中生物 1.1.2 无菌操作和接种技术及微生物的分离、培养与数量测定同步训练 苏教版选修1.doc

2013年高中生物 1.1.2 无菌操作和接种技术及微生物的分离、培养与数量测定同步训练 苏教版选修1应用选择培养基的主要原理是()a使所需要的微生物大量增殖b显现某微生物特征，以区别其他微生物c抑制不需要的微生物的生长d适宜野生型微生物的生长解析：选c。选择培养基是在培养基中加入某一化学物质或改变某一理化性质，使某一微生物正常生长，而其他微生物则被杀灭或抑制，从而选出所需要的微生物。(2012盐城高二检测)产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是()a一个细菌、液体培养基b许多细菌、液体培养基c一个细菌、固体培养基 d许多细菌、固体培养基解析：选c。本题考查“菌落”的形成和有关培养基的知识。菌落是一个或几个细菌的子细胞群体，在固体培养基上有一定的形态，肉眼可见，而液体培养基不具备该条件。做本题时，还应注意题干条件“细菌的最初数目”。下列关于土壤取样的叙述错误的是()a土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤b取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌c先铲去表层土3 cm左右，再取样d应在火焰旁称取土壤解析：选b。微生物的培养要注意无菌操作，土壤取样用的小铁铲和信封在使用前需灭菌，后续稀释等操作均需在火焰旁进行。将0.1 ml 101、102、103倍稀释的土壤悬液分别接种在固体平板上，得到的平均菌落数为2760、585和46，则细菌总数(个/ml)为()a2.76105 b5.86105c4.6105 d4.4105解析：选c。注意菌落计数法计算的是不同稀释度的平均菌落数。首先选择平均菌落数在30300之间的，只有一个稀释倍数的平均菌落数符合此范围，所以细菌总数为：46(0.1)103(个/ml)，即4.6105个/ml。(2012徐州高二检测)培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是()化学消毒灼烧灭菌干热灭菌紫外线灭菌高压蒸汽灭菌巴氏消毒法a bc d解析：选a。培养基用高压蒸汽灭菌；培养皿能耐高温，需用干热灭菌；接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果；实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒，如用酒精擦拭双手；空气可用紫外线消毒；牛奶为不破坏其营养成分可采用巴氏消毒法。请回答下列与微生物有关的问题：(1)微生物的分布：纤维素分解菌主要分布在富含_的土壤表层。(2)微生物的消毒和灭菌：对培养基常用_法进行灭菌。(3)微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是_和稀释涂抹平板法。(5)微生物的计数：运用活菌计数法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是_。解析：一定的微生物对培养基有一定的要求，纤维素分解菌主要分布在富含纤维素的土壤表层。配制好的培养基需用高压蒸汽灭菌法灭菌。接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法。在培养基上当两个或多个微生物连接在一起时，平板上只能观察到一个菌落，故活菌菌落数比实际活菌数低。答案：(1)有机质(2)高压蒸汽灭菌(3)平板划线法(4)当两个或多个微生物连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落下列关于细菌菌落的叙述，正确的是()a.每个菌落由大量的各种细菌组成b.在液体培养基中可以形成各种菌落c.不同菌种的菌落特征不同d.菌落是不能用肉眼观察到的解析：选c。一定的条件下，同种微生物表现出稳定的菌落特征，不同的微生物菌落特征不同。(2012南京高二检测)斜面培养基正确的画线示意图是()解析：选a。正确的接种方法是将带菌的接种环伸入待接种的试管中，在培养基表面上由底部向上轻划“s”型曲线，将菌种接种到培养基上。请选出土壤微生物分离的正确操作步骤()土壤取样称取0.5 g土壤将其加入盛有50 ml无菌水的锥形瓶中吸取1 ml进行平板涂抹依次稀释至103、104、105、106、107稀释度a bc d解析：选c。本题考查土壤微生物的分离。正确的操作步骤为：土壤取样，制备土壤溶液，制备土壤样品稀释液，涂抹平板分离。平板划线操作中错误的是()a每次划线前都要灼烧接种环b灼烧接种环后，要立即用接种环接种，防止杂菌污染接种环c要在酒精灯火焰旁进行d接种前，要将菌种试管口通过火焰解析：选b。灼烧接种环后，将接种环伸入管内，让环先接触培养基上未长菌的部位，使环冷却，然后轻轻挑取少量菌体，再进行接种。灼烧接种环后，不可立即用接种环接种，以免接种环温度过高，将菌种杀死。下列有关纤维素的叙述中，不正确的是()a纤维素的基本组成单位是葡萄糖b纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，是因为它们能产生纤维素酶c植物的根、茎、叶等器官中含有大量的纤维素d自然界中各种生物都能把纤维素分解为葡萄糖，从而为生物体提供能量解析：选d。自然界中只有能产生纤维素酶的生物能分解利用纤维素，但不是所有生物都能，如人体不能把纤维素分解成葡萄糖。在涂布平板操作时错误的是()a将玻璃刮铲在酒精灯火焰上灼烧，直到烧红b取少量菌液滴加在培养基表面c将沾有少量酒精的玻璃刮铲在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却810 s再用d涂布时可转动培养皿，使涂布均匀解析：选a。涂布平板所用玻璃刮铲是玻璃器皿，不能在酒精灯火焰上灼烧，否则会变形，正确方法是沾取少量酒精，引燃。(2012信阳高二检测)抗生素可由微生物产生，具有抑菌作用，能在琼脂培养基中扩散。在筛选产生抗生素的菌种时，先在琼脂培养基平板上划线接种一种从土壤中获得的甲菌，在27 下培养3天，形成菌落。然后接种乙、丙、丁三种致病菌(图a)，继续在同样条件下培养3天，结果如图b。分析结果，得出的结论是()甲菌产生了抗生素丁菌的生长被丙菌产生的抗生素抑制乙菌的生长被甲菌产生的抗生素抑制 丙菌产生的抗生素抑制了乙菌的生长a b c d解析：选a。乙、丙、丁三种致病菌不会产生抗生素，否则靠近乙、丙、丁的甲菌落不能生长。从图b来看，乙菌的生长被抑制，最可能的原因是甲菌产生了抗生素，此种抗生素只能抑制乙菌的生长，而对丙、丁两种细菌没有影响。选项正确，答案为a。下列关于无菌操作的叙述中错误的是()a对实验操作的空间、操作者的衣物和手进行灭菌b将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌c为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰旁进行d实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触解析：选a。对实验操作的空间、操作者的衣物和手进行清洁和消毒，而不是灭菌。下列关于微生物分离和培养的有关叙述，错误的是()a微生物培养前，需对培养基进行消毒b测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法c分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度d分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中惟一的氮源解析：选a。消毒不能杀死培养基上的所有微生物，所以应用高压蒸汽灭菌法对培养基进行彻底灭菌，a错误。(2012盐城高二检测)金黄色葡萄球菌有很强的致病力，常引起骨髓炎，还能引起食物中毒，下列有关金黄色葡萄球菌的培养过程正确的操作是()a带菌的培养基必须经灭菌处理后才能倒掉b接种完成后，接种人员必须进行灭菌处理c液体培养基表面可形成由单个微生物生长、繁殖而来的菌落d可在培养基中加青霉素选择培养金黄色葡萄球菌解析：选a。观察菌落的形态特征应在固体培养基上进行，接种完成后，接种人员必须进行消毒处理，而不是灭菌，因对人无法灭菌，只能消毒。青霉素可杀灭金黄色葡萄球菌。需要在酒精灯火焰旁进行的操作有()土壤取样平板划线稀释土壤溶液涂抹平板微生物的培养a bc d解析：选d。火焰提供了一个小范围的无菌空间，为了防止杂菌污染，平板划线、稀释土壤溶液和涂抹平板都应在火焰旁进行。土壤取样不用在火焰旁进行，但所用器具必须先灭菌。微生物的培养在恒温箱中进行，无需灭菌。通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长，而固氮细菌可以直接把大气中的n2还原成nh3作为自己的氮源。在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌。在培养基中加入10%的苯酚溶液可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出()大肠杆菌霉菌放线菌固氮细菌a bc d解析：选a。缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长，而固氮细菌能生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌(大肠杆菌、固氮细菌)和放线菌，霉菌能生长；在培养基中加人10%苯酚可以抑制细菌(大肠杆菌、固氮细菌)和霉菌，放线菌能生长。有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_为惟一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于_培养基。(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即_和_。(3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力_。(4)通常情况下，在微生物培养过程中常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_和_。无菌技术要求实验操作应在酒精灯_附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。解析：(1)该同学筛选能降解原油的菌株，可以将样品稀释液置于以原油为惟一碳源的固体培养基中培养，该培养基功能上属于选择培养基。(2)菌株的接种方法，常用的有两种：平板划线法和稀释涂抹平板法。(3)菌株分解周围的营养物质，出现分解圈，分解圈大说明该菌株的降解能力强。(4)微生物培养过程中常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌；微生物的培养要求严格的无菌技术，操作时在酒精灯火焰附近进行，避免周围其他细菌的污染。答案：(1)原油选择(2)平板划线法稀释涂抹平板法(3)强(4)干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰(2012周口高二检测)在探究培养液中酵母菌种群数量变化的实验中，需利用计数板对微生物细胞进行直接计数。计数板是一个特制的可在显微镜下观察的玻片，样品就滴在计数室内。计数室由2516400个小室组成，容纳液体总体积为0.1 mm3。某同学操作时将1 ml酵母菌样品加99 ml无菌水稀释，用无菌吸管吸取少许使其自行渗入计数室，盖上盖玻片并用滤纸吸去多余菌液，进行观察计数。(1)在实验中，某同学的部分实验操作过程是这样的：从静置试管中吸取酵母菌培养液加入计数板进行计数，并记录数据；把酵母菌培养液放置在冰箱中；第七天再取样计数，记录数据，统计分析绘成曲线。请纠正该同学实验操作中的3处错误：_；_；_。(2)在实验前应该对计数板、吸管等器具进行_处理。(3)如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应采取的措施是_。(4)如果观察到如图所示a、b、c、d、e 5个大格共80个小室内共有酵母菌48个，则上述1 ml酵母菌样品中约有酵母菌_个；要获得较为准确的数值，减少误差，你认为该怎么做？_。解析：(1)在从试管中吸取酵母菌之前，应将试管轻轻振荡几次，目的是使酵母菌在培养液中均匀分布。酵母菌的培养液应置于适宜条件下，并且每隔24小时就要统计一次菌落数目。(2)为了避免杂菌污染，实验中所用吸管、计数板等器具需进行灭菌处理。(3)(4)解答时要注意以下两点：统一单位；注意体积的变化。400个小室共容纳液体总体积为0.1 mm3，则80个小格容纳体积为：2102mm3，含酵母菌48个，又因酵母菌培养液总体积为100 ml，统一单位后即可求出酵母菌个数。答案：(1)应将试管轻轻振荡几次再吸取酵母菌培养液进行计数应将酵母菌培养液放置在适宜温度下培养应连续七天，每天观察、取样计数并记录数据(2)灭菌 (3)适当稀释(4)2.4108 多次计数，求平均值土壤有“微生物的天然培养基”之称，下图表示：对土壤中某种微生物进行分离和计数，而进行的对样品的稀释和稀释液的取样培养流程示意图。请据图回答有关问题：(1)图示统计样品活菌数目的方法叫做_法，主要包括_操作和_操作。(2)当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的_，一般选择菌落数在_之间的平板进行计数。(3)图中各试管间的“箭头”表示的操作过程是_。这一操作过程中每一步都要在火焰旁边进行。(4)图中选择了104、105、106倍的稀释液进行平板培养，最可能是测定土壤中_的数量，这个平板需要在_温度下培养_天。(5)如果要想分离分解尿素的细菌，平板中培养基成分的特点应该是_；如果怀疑培养基被污染导致统计结果有误，则需要做对照实验，方法是_。解析：活菌计数最常用的是稀释涂抹平板法，测定饮水中大肠杆菌的数量时还可以采用滤膜法。前者最关键的步骤是梯度稀释和涂抹平板。本题考查的内容涉及梯度稀释的方法、要点以及涂布平板培养基的配制、选择稀释度的范围、鉴定培养基是否被污染的方法等都是围绕这两个