课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”导学案一、知识梳理1、课题背景尿素是一种重要的农业氮肥，土壤中的细菌可以将尿素分解成 ，被植物吸收。这些细菌之说以能分解尿素，是因为它们能合成 。2、筛选菌株（1）选择培养基的定义是 。（2）筛选出分解尿素细菌的培养基，应具有的基本营养成分包括 ；与全营养素培养基相比，该培养基的特点是 。3、统计菌落数目（1）统计样品中活菌的数目，常用的方法是 。为了保证结果准确，一般选择菌落数在 的平板进行计数。（2）统计菌落数往往比活菌实际数目 ，原因是 。（3）取0.1mL土壤样液，用稀释涂布平板法统计菌落数目入下表所示，则每毫升样液中，活菌的数目约为 。稀释倍数101102103104105106菌落平均数115015054、对照实验（1）判断培养基是否遭到杂菌污染，应如何设计对照实验？（2）判断选择培养基是否具有选择作用，应如何设计对照实验？5、微生物的培养和观察（1）在实验室培养微生物时，不同种类的微生物，往往需要不同的 和 。为防止因培养时间不足，而导致遗漏菌落数目，应采取的措施是什么？ 。（2）一般来说，同种微生物会表现出稳定的菌落特征。这些特征包括： 。6、课题延伸在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的 将尿素分解成 ，导致培养基pH 。因此，可以在培养基中加入 作为指示剂，培养某种细菌后，如果 ，可以初步鉴定该种细菌能够分解尿素。二、联系与整合选择培养基与鉴别培养基的比较定义举例区别联系选择培养基鉴别培养基三、巩固与应用探究实验：如何检测自来水中细菌的数目？请写出实验设计思路。四、例题1下图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验示意图。据图分析正确的是A2 号试管的稀释倍数为102 倍B测定土壤中细菌的数量一般选用103、104 和 105 倍的稀释液进行平板培养C5 号试管的结果推测 1 号试管每毫升土壤稀释液中细菌的个数为 1.7107 个D该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高答案：C解析：因为锥形瓶中的土壤样品已经稀释了10倍，所以1-5号试管的稀释倍数分别为102、103、104、105、106倍；测定土壤中细菌的数量一般选用104、105 和 106 倍的稀释液进行平板培养；通过5号试管可以计算出，样品中细菌数目约为1.7109个/克，2号试管稀释102倍，即为1.7107个/克；该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低。五、课堂练习1下列有关微生物培养与应用的说法正确的是A固体培养基中不含水，液体培养基中含水B接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理C对培养皿进行编号或对菌种进行标注时，应使用记号笔在皿底标记D同一种物质可能既作为碳源又作为氮源，所有碳源都能提供能量2下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，正确的是A分解尿素的细菌能产生脲酶，脲酶能分解尿素产生氮气B将实验组和对照组平板放入恒温培养箱中培养8-10小时，无需倒置C统计尿素分解菌的数目时，以菌落数在 300 以上的平板进行计数D用尿素为唯一氮源、加有酚红指示剂的培养基培养尿素分解菌，指示剂变红3关于菌落的叙述，错误的是A一个菌落往往是一个细胞在固体培养基上繁殖的结果B菌落的特征可作为鉴定菌种的重要依据C用平板划线法分离菌种时可在培养基上获得均匀分布的单个菌落D一个菌落属于一个种群4下面不能测定样品菌数的方法是A稀释涂布平板法 B显微镜直接计数法 C滤膜法 D平板划线法5下面关于分解尿素的细菌的特点和鉴定的说法，正确的是A能分解尿素的直接原因是具有合成脲酶的基因B以尿素作为唯一的碳源和氮源C环境中含有大量的尿素诱导该细菌产生了分解尿素的特性D添加了酸碱缓冲液的培养基培养该菌后酚红试剂不易变红6下列有关“微生物的分离与培养”实验的叙述,正确的是A固体培养基和液体培养基均可用于对微生物进行纯化和分离B对培养皿进行编号或对菌种进行标注时,应使用记号笔在皿底标记C倒平板时,应将皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上D将好氧型菌株接种到培养液中后需静置培养,防止培养液沾染试管壁引发污染参考答案一、知识梳理1、氨 脲酶2（1）允许特定种类微生物的生长，同时抑制或阻止其它种类微生物生长的培养基（2）碳源、氮源、水、无机盐 尿素作为唯一的氮源3（1）稀释涂布平板法 30-300（2）低 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只有一个菌落。（3）1.5108个。4（1）实验组为接种了适量样品的培养基，对照组为未接种的培养基，放在相同且适宜的环境中培养，观察菌落的生长情况。（2）实验组为将适量的样品接种在选择培养基上，对照组为将等量的样品接种在全营养素培养基上，放在相同且适宜的环境中培养，观察菌落的生长情况。5（1）培养温度 培养时间 每个24小时统计一次菌落的数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果（2）菌落的形状、大小、隆起程度、颜色6、脲酶 氨 升高 酚红 指示剂变红二、联系与整合选择培养基定义是：允许特定种类微生物的生长，同时抑制或阻止其它种类微生物生长的培养基；举例为：以尿素为唯一氮源的培养基。鉴别培养基的定义是：加入了某种颜色指示剂的固体培养基；举例是：含酚红的培养基。区别是两者的目的不同。联系是：以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红，则该培养基既是选择培养基，又是鉴别培养基。三、巩固