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文档简介
细胞工程(2)【知识目标】1、掌握植物体细胞杂交及细胞融合的原理 2、简述植物体细胞杂交技术和单克隆抗体的制备过程【能力目标】理解并掌握植物体细胞杂交和单克隆抗体制备的操作过程【情感态度价值观目标】关注细胞工程的发展,了解细胞工程技术的研究现状和发展趋势【知识点一】植物体细胞杂交植物体细胞杂交原理细胞膜的流动性、细胞的全能性融合前处理酶解法去除细胞壁(纤维素酶、果胶酶)促融方法 物理法:离心、振动、电刺激等 化学法:聚乙二醇(peg)过程意义和用途克服远缘杂交不亲和的障碍,大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围1植物体细胞杂交的杂种细胞 (1)杂种细胞的类型 有三种:aa、bb、ab,符合要求的只有ab,需要进行筛选。 (2)细胞融合完成的标志:形成杂种细胞ab 杂种细胞ab形成的标志:新细胞壁的生成。 (3)杂种植株遗传物质的变化:细胞融合属于染色体变异,不管是染色体、染色体组还是基因型,通常都是两亲本细胞直接相加的方法。1、我国科学工作者曾成功地将分别属于两个科的植物-烟草和菠菜杂交成功,从而获得一种新型的烟草品种。在此过程中,下列操作不是必需的是 ( )a杂交前要除去两种细胞的细胞壁 b原生质体融合前要先脱分化 c原生质体融合后,要选出烟草-菠菜融合细胞加以培养 d要诱导愈伤组织进行再分化2、下图为植物细胞融合及组织培养过程示意图,下列说法不正确的是()a植物体细胞杂交的最大优点是可以克服远源杂交不亲和的障碍b杂种细胞经过和过程可以培育成杂种植株,说明杂种细胞具有全能性c尽管愈伤组织可以进行光合作用,但其培养基中仍需要糖类、氨基酸等有机营养d若a的基因型为rr,b的基因型为yy,则最终形成的杂种植株的基因型为rryy【知识点二】动物细胞融合(单克隆抗体的制备)动物细胞融合(单克隆抗体的制备)原理细胞膜的流动性、细胞增殖融合前处理注射特定抗原,免疫处理正常小鼠促融方法 物理法、化学法:与植物细胞融合相同 生物法:灭活的病毒(仙台病毒)过程意义和用途(1)制备单克隆抗体(2)诊断、治疗和预防疾病。2单克隆抗体(1)取相应b淋巴细胞前必需先注射相应抗原。(2)几种细胞名称及作用: 免疫过的b淋巴细胞(效应b细胞)产生抗体;骨髓瘤细胞无限增殖。 杂交瘤细胞的特点是既能无限繁殖,又能产生单一的特异性抗体。(3)两次筛选的目的及方法: 在特定的选择培养基上,筛选出杂交瘤细胞。 经选择性培养的杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞(很多种杂交瘤细胞),需经克隆化培养和抗体检测,筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。(4)两种培养提取场所 体外培养培养液提取。 体内小鼠腹腔中培养小鼠腹水中提取。 (5)单克隆抗体的优点:特异性强,灵敏度高,能大量制备。 1、单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和b淋巴细胞诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,在这种培养基上不能存活增殖的细胞是 ( ) 淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 b淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞 a b c d 2、下图是某实验室做的通过动物纤维母细胞等获得单抗的实验研究,据图回答相关问题。(1)x、y、z细胞的名称分别是_、_、_。 (2)过程类似于植物组织培养技术中的_过程。与纤维母细胞相比,诱导干细胞的全能性较_。过程的实质是_。(3)过程中需用到的生物诱导剂是_。(4)处需要筛选,其目的是_。【巩固练习】1、下列现代生物科技的应用中,不需要进行检测与筛选的是()a对植物的茎尖进行组织培养获得脱毒苗b将鼠的骨髓瘤细胞与b淋巴细胞融合,制备单克隆抗体c利用植物体细胞杂交技术培育“萝卜甘蓝”d将抗虫基因导入植物细胞,培育具有抗虫特性的新植株2、 制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括细胞培养 细胞融合 胚胎移植 细胞核移植a b c d3、 利用动物细胞融合技术可获得杂交瘤细胞,下列针对单个杂交瘤细胞的叙述不正确的是 ( )a需经筛选过程方可获得 b具有双亲细胞的遗传物质c可分泌多种特异性抗体 d体外培养条件下可大量繁殖4、某同学在学习“细胞工程”时,列表比较了动植物细胞工程的有关内容,你认为有几处是不正确的 ()植物细胞工程动物细胞工程技术手段植物组织培养、植物体细胞杂交动物细胞培养和融合、单克隆抗体的制备特殊处理机械法去除细胞壁胰蛋白酶处理,制成细胞悬液融合方法物理方法、化学方法物理方法、化学方法、生物方法典型应用人工种子、杂种植株单克隆抗体的制备培养液区别生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化动物血清不可缺少 a.1 b2 c3 d45、野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力,但块茎不能食用。俄、德、芬兰专家共同做实验研究,用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交,培育出了生活能力强的杂交系马铃薯。据图分析回答问题:(1)过程植物细胞原生质体的分离需经过酶解,其中“酶解”所用的酶应该包括_。(2)过程需要用到聚乙二醇(peg),其目的是_。 过程是_过程,与此过程密切相关的细胞器是_。(3)请用文字和箭头表示出、过程的实验流程_。由此过程可以看出植物细胞有形成再生组织的可能性,这是_的表现。(4)一般在培养基上培养2448小时后,大部分原生质体已再生出细胞壁。可以取样,通过_实验来鉴别细胞壁是否已经再生。(5)运用此植物体细胞杂交法的最大好处是_。6、请阅读下列材料并回答:材料一 由于细胞的密度不同,在地面上受重力影响,细胞的融合非常困难,在太空进行此试验比在地面试验细胞融合率大大提高。“神舟”六号飞船上进行了b淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合、黄花烟草原生质体和“革新”一号烟草原生质体的融合两个科学实验,在电融合仪内经过l60min后,终于获得成功。材料二 右图为哺乳动物生殖过程及相关细胞工程的示意图,其中b为卵细胞,c、d为体细胞。(1)细胞融合技术与传统的有性杂交相比,其优越性在于 _ 。在太空进行细胞融合与在地面进行细胞融合相比,其优越性在于 _ 。(2)利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术,为制备 细胞开辟了新的途径,该细胞的特点是_。(3)动物个体甲、乙的产生分
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