球菌(1).ppt

病原生物学教研室 1 第九章球菌 2 第一节葡萄球菌属 Staphylococcus 一 金黄色葡萄球菌 S aureus 二 凝固酶阴性葡萄球菌 CNS 3 球形或稍呈椭园形 直径0 5 1 5um 排列成葡萄状 无鞭毛 无芽胞 一般不形成荚膜 易被常用的碱性染料着色 G十 图示 1 形态与染色 一 金黄色葡萄球菌 S aureus 一 生物学性状 4 易培养 普通平板 血平板T 37 PH 7 4S型菌落产色素 脂溶性 金黄色 白色 柠檬色有些菌溶血 产生溶血环 致病性葡萄球菌在血平板上可见完全透明溶血环 溶血 2 培养特性 5 3 生化反应 多数菌分解葡萄糖 麦芽糖和蔗糖 产酸不产气 致病性球菌分解甘露醇 触酶阳性 与链球菌区分标准 6 4 抗原构造 1 葡萄球菌A蛋白 细胞壁表面蛋白质 完全抗原 2 荚膜多糖 有利于细菌粘附 3 多糖抗原 存在于细胞壁 有群特异性 7 SPA staphylococcalproteinA 协同凝集试验 8 SPA staphylococcalproteinA SPA功能体内作用 与IgG结合所形成的复合物具有抗吞噬 促细胞分裂 引起超敏反应 损伤血小板等多种生物活性 体外作用 用于多种微生物抗原检测 9 多糖抗原有群特异性 A群为磷壁酸中的N 乙酰葡糖胺核糖醇残基 B群为磷壁酸中的N 乙酰葡糖胺甘油残基 10 5 分类与分型 1 据生化反应和产生色素不同分 表格 2 根据有无凝固酶分型 凝固酶阴性菌和凝固酶阳性菌两大型 继而依据噬菌体分为4个噬菌体群和23个噬菌体型 III群引起葡萄球菌肠毒素食物中毒 3 根据核酸分析的遗传学分型 DNA脉冲电泳分型 PCR分型等方法 依16SrRNA不同 分48个种和亚种 11 6 抵抗力 对外界因素的抵抗力强于其他无芽胞菌 耐干 耐热 耐盐 耐药 对碱性染料 龙胆紫 敏感 易产生耐药性 特别对青霉素 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 MRSA 12 葡萄球菌中金黄色葡萄球菌毒力最强 通过在宿主体内增殖 扩散和产生有害的胞外物质 酶和毒素 引起宿主疾病 葡萄球菌的毒力因子 致病物质 包括 酶 毒素 细菌的一些表面结构蛋白 二 致病性 13 1 致病物质 酶凝固酶 血浆纤维蛋白原转为纤维蛋白 使血浆凝固 耐热核酸酶 水解DNA纤维蛋白溶酶 水解纤维素 纤维蛋白溶酶 葡激酶 有利于病菌扩散透明质酸酶 降解结缔组织 扩散因子 脂酶 分解脂肪和油类提供营养触酶 分解H2O2 14 毒素葡萄球菌溶素毒性休克综合征毒素 1杀白细胞素肠毒素表皮剥脱毒素 表面结构或蛋白如粘附素 荚膜 胞壁肽聚糖和SPA等 15 凝固酶 coagulase 概念 使含抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类游离凝固酶结合凝固酶意义 鉴别有无致病性的重要指标致病机理 抵抗吞噬细胞的吞噬 保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏 使感染局限化和形成血栓 16 血液凝固 协同因子 似纤维蛋白原受体 细菌凝聚 游离血浆凝固酶 结合血浆凝固酶 凝血酶 纤维蛋白 纤维蛋白原 17 葡萄球菌溶素 staphylolysin 溶素 损伤细胞膜的毒素 细胞毒素 杀白细胞素 leukocidin 细胞毒素 攻击中性粒细胞和巨噬细胞 抵抗宿主吞噬细胞 增强细菌侵袭力 18 肠毒素 enterotoxin 约1 2临床分离金黄色葡萄球菌可产生 引起急性胃肠炎 即食物中毒 耐热 抗胃肠液中蛋白酶 作用机制 刺激呕吐中枢导致以呕吐为主要症状的食物中毒 还具有超抗原 superantigen 作用 19 表皮剥脱毒素 exfoliativetoxin 引起表皮剥脱性病变 由噬菌体 型金葡菌产生 毒性休克综合征毒素1 TSST1 引起机体发热 增加对内毒素的敏感性 引起多器官系统功能紊乱或毒性休克综合征TSS 20 2 所致疾病 感染类型所致疾病 侵袭性局部感染全身感染 毒素性食物中毒TSSSSSS 21 1 侵袭性疾病 化脓性炎症1 局部感染 主要由金葡菌引起皮肤软组织感染 如疖 痈 毛囊炎等内脏器官感染 2 全身感染 22 2 毒素性疾病由金葡菌产生毒素引起1 食物中毒呕吐 腹泻2 假膜炎肠炎3 烫伤样皮肤综合征 图示 4 毒性休克综合征 有一定的天然免疫力 但难防再感染 三 免疫性 23 标本 脓汁 血液 剩余食物 呕吐物等 分离培养 血浆凝固酶发酵甘露醇耐热核酸酶 直接涂片镜检 革兰阳性葡萄球菌 生长现象 色素 溶血 生化反应 药敏实验 动物实验 对食物中毒患者 四 微生物学检查法 24 防 注意消毒隔离 注意个人卫生 防止医源性感染 防止耐药性产生 治 抗菌素药敏试验 自身菌苗疗法 五 防治原则 25 二 凝固酶阴性葡萄球菌 Coagulasenegativestaphylococcus CNS 26 泌尿系感染细菌性心内膜炎败血症术后及植入医用器械引起的感染 CNS已成为医源性感染的常见重要病原菌 耐药菌株日益增多 当机体免疫功能低下或细菌进入非正常寄居部位时 CNS可引起多种感染 各类感染中仅次于大肠埃希菌 居病原菌的第2位 造成诊治困难 引起临床微生物学工作者关注 CNS除表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌外 还包括溶血葡萄球菌 人葡萄球菌 头葡萄球菌等30多种 27 第二节链球菌属 Streptococcus A群 化脓性 链球菌 S pyogenes 肺炎链球菌 S pneumoniae 28 1 概念链球菌属是一大类G 排列呈双或长短不一的链状球菌 2 分类1 溶血现象分类 概述 29 根据溶血现象分类 30 2 抗原结构分类据链球菌细胞壁中抗原结构 C多糖抗原 不同 运用血清学方法分成A V20群 对人致病的链球菌菌株 90 左右属A群 其他群少见 同一群的链球菌又分若干型 A群根据其M抗原不同 可分成约100个型 31 3 生化反应分类对一些不具有群特异性的链球菌 如肺炎链球菌和草绿色链球菌等 需用生化反应 药物敏感和对氧的需要分类 对氧的需要分类分为 需氧 厌氧和微需氧链球菌 32 医学常见链球菌 33 本属细菌的代表种 致病性强 对人致病的链球菌有90 属此种 一 A群 化脓性 链球菌 34 1 形态与染色球形或椭圆形 链状排列 G 无芽胞 无鞭毛 透明质酸的荚膜 一 生物学性状 35 2 培养特性 营养要求高 血平板或含血清培养基液体培养为沉淀生长血平板呈灰白色表面光滑小菌落 不同菌株溶血不一 多数有透明溶血环 溶血现象 3 生化反应 分解葡萄糖 产酸不产气 不分解菊糖 不被胆汁溶解 可鉴别甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌 链球菌不产生触酶 与葡萄球菌不同 37 4 抗原结构 分20个群 A群致病菌 溶血性链球菌或化脓性链球菌 根据蛋白抗原进一步分类M抗原 荚膜 细胞壁 蛋白质 多糖 肽聚糖 细胞膜 细胞质 1 多糖抗原 C抗原 群特异性 细胞壁的多糖组分 2 表面抗原或称蛋白质抗原 壁外的菌毛样结构含M蛋白 位于C抗原外层 具型特异性 有近100种血清型 M抗原与致病性有关 3 P抗原或称核蛋白抗原 无特异性 38 5 抵抗力一般链球菌均可在60 被杀死 对常用消毒剂敏感 在干燥尘埃中生存数月 乙型链球菌对青霉素 红霉素 四环素 杆菌肽和磺胺药都很敏感 39 A群链球菌有较强的侵袭力 产生多种外毒素和胞外酶 1 致病物质致病物质可分三大类 细菌的胞壁成分 胞壁上的粘附素外毒素胞外侵袭酶类 二 致病性 40 1 胞壁成分 1 粘附素 包括 脂磷壁酸 lipoteichoicacid LTA 与生物膜有高度亲和力 是该菌定植在机体皮肤和呼吸道黏膜等表面的主要因素 F蛋白 proteinF 位于化脓性链球菌细胞壁内 其结合区暴露在菌体表面 是纤维粘连蛋白 fibronectin FBP 的受体 有利于细菌定植和繁殖 41 42 2 M蛋白 Mprotein 是A群链球菌的主要致病因子 含M蛋白的链球菌具有抗吞噬和抵抗细胞内杀菌作用 与某些超敏反应疾病有关 3 肽聚糖A群链球菌的肽聚糖具有致热 溶解血小板 提高血管通透性和诱发实验性关节炎等作用 43 1 链激酶 SK 溶纤维蛋白酶原溶纤维蛋白酶纤维蛋白纤维溶解 2 透明质酸酶 扩散因子 透明质酸结缔组织疏松通透增加透明质酸酶利于细菌及代谢产物扩散 链激酶 降解 脓液中高度粘性DNA 脓汁稀薄 病菌扩散 3 链道酶 SD 2 侵袭性酶 invasiveenzyme 44 3 外毒素类 1 致热外毒素 pyrogenicexotoxin 是人类猩红热的主要毒性物质 致热外毒素抗原性强 具有超抗原作用 对兔有致热性和致死性 2 链球菌溶素 streptolysin 溶解红细胞 破坏白细胞和血小板 A族链球菌可分为两种溶血素SLO 对哺乳动物多种细胞有毒性作用 可作为新近链球菌感染 或风湿活动的辅助诊断 1 400以上 SLS 对白细胞和多种组织细胞有破坏作用 45 2 所致疾病 A群链球菌引起的疾病约占人类链球菌感染的90 淋巴管炎蜂窝组织炎扁桃体炎等 猩红热 3 超敏反应性疾病 1 化脓性感染 2 中毒性疾病 风湿热 急性肾小球肾炎 46 47 可刺激机体产生各种抗体 获得对同型链球菌的特异性免疫力 型别间无交叉免疫 抗M蛋白抗体有保护作用 不同型M蛋白均可诱生 干扰素 猩红热患者可建立牢固的同型抗毒素免疫 三 免疫性 48 标本 直接涂片镜检 革兰阳性链球菌 分离培养 脓汁 血液 咽喉拭子 与金葡菌的鉴别 与肺炎链球菌的鉴别 典型链球菌形态 典型的链球菌菌落 必要时做 生化反应或药敏实验等 四 微生物学检查法 49 血清学检查 抗O试验 ASOtest 链球菌侵入体内产生SLO 刺激机体产生相应抗体ASO 当两者中和后 在加入SLO乳胶试剂 因病人血清中ASO量很多 未被中和的抗体与乳胶试剂反应 产生凝集 为阳性 无凝集 为阴性 原理 中和试验 用SLO检测血清中的ASO方法 间接凝集结果 效价大于400单位意义 活动性风湿热及肾小球肾炎辅助诊断 50 积极治疗儿童链球菌感染 防止发生急性肾炎和风湿热 抗生素首选青霉素 用长效青霉素预防链球菌感染 对减少肾小球肾炎及风湿热的发生有一定效果 五 防治原则 51 三其他链球菌 一 甲型溶血性链球菌 也称草绿色链球菌 包括多个种 条件致病 可引起 1 龋齿 常由变形链球菌引起 2 亚急性细菌性心内膜炎 由此菌引起的SBE占全部病例50 52 二 B族链球菌又称无乳链球菌 可寄居于正常妇女阴道和直肠 也寄居在健康人鼻咽部 故可引起皮肤感染 心内膜炎 产后感染 新生儿败血症和脑膜炎 三 D族链球菌 条件致病菌 本菌包括粪链球菌 牛链球菌和马链球菌 D族链球菌正常寄居在皮肤 上呼吸道 消化道和泌尿生殖道 偶尔引起泌尿道感染 腹部化脓性感染 败血症和心内膜炎 身体虚弱和免疫功能低下者易感染 53 二肺炎链球菌S pneumoniae 在自然界广泛分布 常寄居于正常人的鼻咽腔中 形成带菌状态 在机体抵抗力下降时引起疾病 主要引起大叶性肺炎 约占细菌性肺炎的80 54 1 形态与染色 G 双球菌矛头状 平面相对 尖面相背 有厚荚膜 无芽胞 无鞭毛 一 生物学性状 55 2 培养特性 营养要求较高 常用血培养 需5 10 CO2菌落与甲链相似 能自溶 在固体培养基中形成脐状菌落 在血清肉汤中 初期呈混浊生长 稍久渐变澄清 56 3 生化反应胆汁溶解试验或加入胆汁或10 去氧胆酸钠或2 牛磺胆酸钠鉴别 4 抗原结构 1 荚膜多糖抗原具有型特异性 可将肺炎链球菌分为84个血清型 2 其他抗原有M蛋白和C多糖 血清中C反应蛋白 CRP 不是抗体 在炎症活动期 如风湿热 含量增多 57 5 抵抗力较弱 对一般消毒剂敏感 抗干燥力较强 对青 红 林可霉素敏感 58 1 致病物质荚膜 有抗吞噬作用 是主要的致病因子 肺炎球菌溶素O 类似SLO 溶解红细胞 脂磷壁酸 在粘附上起重要作用 神经氨酸酶 对定居 繁殖和扩散至鼻咽部和支气管粘膜上有一定作用 二 致病性 59 2 所致疾病主要引起大叶性肺炎 其次为支气管炎 尚可引起化脓性胸膜炎 细菌性心内膜炎 中耳炎及关节炎等 成人 1 2 3型 儿童 14型 从上呼吸道侵入 少数先入血流后入肺部 病人突然发病 恶寒 发热 咳嗽 胸痛 咳痰为铁锈色 60 型特异性免疫较牢固 荚膜多糖抗体 同型病菌二次感染少见 70 可自愈 三 免疫性 标本痰 脓液 血液 脑脊液等 直接染色镜检据典型的G十具有荚膜的双球菌存在 即可作出初步诊断 四 微生物学检查法 61 分离与鉴定 脐形 菌落作菊糖发酵 胆汁溶菌和Optochin敏感试验鉴别 阳性者多为肺炎球菌 菌型鉴定用凝集 沉淀试验和荚膜肿胀 动物试验接种于小白鼠腹腔 分离污染的标本 毒力强的肺炎球菌 24小时小鼠死亡 若为甲溶血性链球菌 小鼠不死亡 62 一般防止呼吸道传染之措施 多价荚膜多糖菌苗 效果良好 治疗前根据药敏试验 可选用敏感抗生素治疗 五 防治原则 63 第四节奈瑟菌属Neisseria 奈瑟菌属对人有致病性的有脑膜炎奈瑟菌 N gonorrhoeae 和淋病奈瑟菌 N meningitidis 其余均为人类呼吸道正常菌群 偶而可引起脑膜炎和心内膜炎等 G 双球菌 无鞭毛 芽胞 有菌毛 典型细胞内寄生 64 一 脑膜炎奈瑟菌N meningitidis 65 1 形态与染色G 双球菌 肾形或豆形 无鞭毛 芽胞 有菌毛 微荚膜 一 生物学性状 66 2 分离培养专性需氧菌 但在5 10 CO2低氧环境中生长最旺盛 营养要求高 巧克力培养基最适PH7 4 7 6 37 菌落无色透明 似露滴状 不溶血 混浊生长 可产生自溶酶 67 3 抗原构造与分类 4 抵抗力 很弱四怕 热 寒冷 干燥 消毒剂 1 荚膜多糖群特异性抗原 据此分13个群 C群致病力最强 我国病例以A群 95 为主 2 外膜蛋白抗原 型特异性 将各血清群分为若干血清型 3 脂寡糖抗原 LOS 外膜糖脂 主要的致病物质 用于免疫学分型 易产生耐药性 68 二 致病性 1 致病物质荚膜 抗吞噬菌毛 粘附IgA蛋白酶 裂解人IgA1 破坏免疫功能 有助粘附 LOS 自溶或死亡后释放 引起小血管和毛细血管坏死 出血 致DIC或中毒性休克 69 2 所致疾病 传播途经 呼吸道 飞沫或接触所致疾病 流行性脑脊髓膜炎 普通型暴发型慢性败血症型 三种临床类型 传染源 病人和带菌者 鼻咽腔 繁殖 1 4天 血流 菌血症和败血症 流脑 70 人对脑膜炎奈瑟菌抵抗力较强 机体感染后以体液免疫为主 血清中特异抗体能杀死脑膜炎奈瑟菌 抗体的调理作用能增强吞噬细胞的功能 分泌型IgA可阻止脑膜炎奈瑟菌对上呼吸道黏膜的粘附 母体中的IgG还可通过胎盘传给胎儿 故6个月内婴儿极少患流行性脑膜炎 三 免疫性 71 1 标本 3 分离培养与鉴定 脑脊液 血液 出血点渗出液 鼻咽拭子保暖 保湿 立即送检 培养基预温 2 直接涂片镜检 中性粒细胞内 外有G 双球菌 可作出初步诊断 巧克力 色 培养基 4 快速诊断 对流免疫电泳 SPA协同凝集试验 四 微生物学检查法 72 五 防治原则 特异预防 注射群特异性多糖菌苗注意隔离患者 流行期间可口服磺胺药物预防 治疗流脑首选磺胺 也可用青霉素 氯霉素或氨苄青霉素 73 二 淋病奈瑟菌N gonorrhoeae 74 G 双球菌 似一对咖啡豆 有菌毛 有荚膜 专性需氧 巧克力血琼脂平板 2 培养特性 1 形态与染色 一 生物学性状 75 4 抵抗力 弱 热 冷 干燥和消毒剂极敏感 1 石炭酸3min或1 4000硝酸银2min即死亡 对磺胺 青霉素较敏感 但易产生耐药性 菌毛蛋白抗原 有毒株有 变异大 脂寡糖抗原 内毒素活性外膜蛋白抗原 P P