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冠状病毒科 Coronaviridae 冠状病毒基本特性 刺突糖蛋白 SpikeProtein 是受体结合位点 溶细胞作用和主要抗原位点小包膜糖蛋白 EnvelopeProtein 较小 与包膜结合的蛋白膜糖蛋白 MembraneProtein 负责营养物质的跨膜运输 新生病毒出芽释放与病毒外包膜的形成 非节段单链 RNA 长27 31kd 是RNA病毒中最长的RNA核酸链 自身可以发挥翻译模板作用 RNA和RNA之间重组率非常高 重组后 RNA序列发生了变化 由此核酸编码的氨基酸序列也变了 氨基酸构成的蛋白质随之发生变化 使其抗原性发生了变化 鸡传染性支气管炎病毒 Infectiousbronchitis IB 能够引起鸡产生急性 高度接触传染性的呼吸道疾病 表现为 咳嗽 喷嚏 呼吸困难和气管罗音 雏鸡表现流浆液性鼻涕 产蛋鸡出现产蛋下降和蛋的质量变差 肾病变型肾肿大 有尿酸盐沉积 增殖 临床症状 危害 有25个以上血清型 如M41 T株等 有的引起呼吸道病 有的引起肾病综合症 不同血清型之间没有或仅有部分交互免疫力 报道较多的有呼吸型 肾型 生殖道型 变异型 491 793B 病毒能在9 11日龄鸡胚上生长 繁殖 并能引起一系列特征性典型变化 如 蜷曲胚 僵化胚 侏儒胚 出现 能在气管环组织中培养 导致纤毛运动停止 在鸡胚多次传代后 可以在鸡胚肝 肺 肾细胞培养物中生长 产生细胞病变及噬斑 鸡传染性支气管炎病毒 Infectiousbronchitis IB 本病仅发生于鸡 其他家禽均不感染 各种年龄的鸡都可发病 但雏鸡最为严重 死亡率也高 一般以40日龄以内的鸡多发 有母源抗体的雏鸡有一定的抵抗力 约4周 传染源 传播方式 感染动物 以呼吸道为主 也可以经消化道如饲料 饮水及饲养用具等传播 种蛋传播亦有可能 但还没有得到证实 本病一年四季均能发生 但以冬春季节多发 本病一旦感染鸡群 即迅速传播 很快波及全群 48小时内具有接触史的易感鸡都发病 病鸡及带毒鸡为传染源 病鸡康复后可带毒49天 在35天内具有传染性 呼吸道排毒达2周 粪便可达数月 病毒还存在于感染鸡的精液 急性期病鸡所产的鸡蛋 主要病变是气管 支气管 鼻腔和窦内有浆液性 卡他性和干酪样渗出物 气管环充血出血 气囊可能混浊或含有黄色干酪样渗出物 在大的支气管周围可见到小灶性肺炎 卵巢有水泡样囊肿 输卵管造成永久性损坏 产蛋鸡的卵泡变形甚至破裂 输卵管变形 肾肿大出血 肾小管充满尿酸盐结晶外形呈白线网状或呈斑驳状俗称 花斑肾 或 槟榔肾 肾小管和输尿管因尿酸盐沉积而扩张 严重病例 白色尿酸盐沉积可见于其他组织器官表面如在心包和腹腔脏器表面均可见白色的尿酸盐沉着 胸深肌组织苍白 呈胶冻样水肿 胴体外观湿润 卵巢 输卵管粘膜充血 气管环充血 出血 疫苗免疫 FNO E 491 猪传染性胃肠炎 TransmissibleGastroenteritisofswine TGE 血清型 到目前为止 世界各地所分离的TGEV毒株均属同一个血清型 在抗原上与猪呼吸道冠状病毒 PRCV 猫传染性腹膜炎病毒和犬冠状病毒有一定的相关性 特别是与PRCV的核苷酸和氨基酸序列有96 的同源性 并已证明PCRV是由TGEV突变而来 病毒对阳光敏感 粪便样品中的病毒在阳光下6小时即能灭活 置阴暗处7天仍有感染力 病毒对胰蛋白酶不敏感和在猪胆汁中相当稳定 常用消毒药为0 03 福尔马林 1 来苏尔 容易将其杀死 致病机制及病理变化 TGEV经鼻腔或口腔到达胃 能抵抗低pH值和蛋白水解酶的作用而到达小肠 与高度敏感的小肠上皮细胞接触 大量细胞受到感染 其功能迅速改变或破坏 小肠内酶活性明显降低 扰乱了消化及细胞营养物质和电解质的运输 未被消化的乳糖存在于肠内 使渗透压明显增高 导致液体的滞留 甚至从机体组织中吸收液体 引起病猪失水 代谢性酸中毒 故发生腹泻和脱水 疫苗防治 共翻译糖基化是S糖蛋白获得和保持抗原性所必需的 由此可见 使S基因完整表达 并正常糖基化而折叠成其天然构象是保持TGE基因工程疫苗免疫效力的关键技术之一 因此用真核表达体系表达S基因 更有望于研制成功TGE基因工程疫苗 阻断病毒的入侵门户及其在小肠细胞中的定居 从而有效保护机体免受攻击 应该是TGE基因工程疫苗研究的方向和猪场净化该病的主要途径 基因工程苗 灭活苗免疫妊娠母猪往往不能刺激机体产生有效的乳汁免疫 故临床上往往和弱毒苗一起使用 才可以产生较好的保护效果 我国现在普遍使用的是TGE与PED的二联灭活疫苗 弱毒疫苗近来没得到深入研究 还是局限于美国的TGE Vac株 匈牙利的CKP株和日本的TO 163株等 灭活苗 弱毒活疫苗 人工感染强毒或乳汁免疫 怀孕母猪接种强毒 存在散播强毒风险 已经很少使用 乳汁抗体包括IgG IgA IgM TgA抗体主要是分泌型抗体 仅有肠管受刺激时产生 泌乳期间滴度较高 持续时间较长 是乳汁免疫的主体 猪流行性腹泻 Porcineepidemicdiarrhea PED 基本特征 是猪的一种肠道传染病 临床上以排水样粪便 呕吐 脱水为特征 仅发生于猪 各种年龄的猪都能感染发病 哺乳仔猪 架子猪或肥育猪的发病率很高 尤其哺乳仔猪受害是严重 母猪发病率变动很大 约15 90 细胞培养特性 1988年 Hofmann等首次在培养基中含胰酶的Vero细胞上成功繁殖了PEDV 并认为胰酶对PEDV纤突糖蛋白切割作用增强了病毒对Vero细胞的感染力 此方法在后续的PEDV分离 细胞培养和疫苗的研究中被广泛应用 此后 各国研究者对PEDV细胞培养进行了深入研究 相继在仔猪膀胱 肾脏的原代细胞和KSEK6 IB RS 2 MA104 CPK