高中生物 2.1《微生物的实验室培养》课件 新人教版选修1.ppt

课题1 微生物的实验室培养 霉菌 细菌 酵母菌 放线菌 上图都是一些常见的微生物 微生物是结构简单 形体微小的单细胞 多细胞或没有细胞结构的低等生物 与人类关系密切 人工的培养和分离 使得我们更进一步认识微生物 今天我们就来学习如何培养和分离大肠杆菌 1 特点 结构都相当简单 个体多数十分微小 通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到 有的甚至没有细胞结构 且体内一般不含有叶绿素 不能进行光合作用 2 微生物包括五类 病毒细菌放线菌真菌原生动物 培养基 培养液 是由人工方法配制而成的 专供微生物生长繁殖使用的混合营养液 固体培养基液体培养基半固体培养基 1 培养基的类型 成分区别 琼脂 2 不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方 细菌喜荤 霉菌喜素 大肠杆菌配方酵母提取物 0 25g蛋白胨 0 5gnacl 0 5g琼脂 1g水 50ml 3 培养基内所含的基本物质 一般营养物质水 碳源 氮源 无机盐 其他物质ph 特殊营养物质 例如 生长因子 即细菌生长必需 而自身不能合成的化合物 以及氧气 二氧化碳 渗透压等的要求 4 培养基的用途 液体培养基 增菌 工业生产固体培养基 纯化 分离 鉴定 活菌计数 保藏菌种半固体培养基 动力检测 1 无菌操作泛指在培养微生物的操作中 所有防止杂菌污染的方法 无菌操作是培养微生物成功的关键 1 消毒定义 2 消毒与灭菌的概念及两者的区别 2 灭菌的定义 是指杀灭病原微生物的方法 是指杀灭或清除环境中一切微生物 包括芽胞 孢子 的方法 a 灼烧灭菌 3 常用灭菌的方法 b 干热灭菌 160 170 下加热1 2h c 高压蒸气灭菌 100kpa 121 下维持15 30min 取2个250ml的三角瓶中分别装入50mllb液体培养基和50mllb固体培养基 刚配好 尚未凝固 加上封口膜 牛皮纸包装后高压锅灭菌15min lb液体培养基 细菌的扩大培养lb固体培养基 细菌的划线分离 灭菌后的培养基在无菌操作台上倒入4个培养皿中 倒后立即置于水平位置上 轻轻晃动 使培养基铺满平皿底部 待凝 使之形成平面 1 培养基灭菌后 需要冷却到50 左右时 才能用来倒平板 你用什么办法来估计培养基的温度 答 可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶 感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时 就可以进行倒平板了 2 在倒平板的过程中 如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位 这个平板还能用来培养微生物吗 为什么 答 空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生 因此最好不要用这个平板培养微生物 将斜面上培养的大肠杆菌菌种接种到灭菌后的液体培养基中 使其在37 摇床培养12小时 注意事项 1 火焰旁从斜面上用接种环取菌 2 取菌前接种环要用酒精灯灼烧灭菌 冷却后方能取菌 3 取菌后封口膜和棉塞复原 1 平板划线法 1 灼烧接种环 2 接种环冷却后 蘸取带菌培养物 3 在近火焰处 让带菌接种环在固体培养基上划线 注意事项 1 接种环只蘸一次菌液 但要在培养基不同位置连续划线多次 2 划线首尾不能相接 3 划线后 培养皿倒置培养12 24h 2 3 从上次的末端开始 交叉2 3条线 4 最后的划线不能与第一区相连 分离后 一个菌体便会形成一个菌落 这是消除污染杂菌的通用方法 也是用于筛选菌株的最简便方法之一 2 稀释涂布平板法 稀释操作 注意 移液管需要经过灭菌 操作时 试管口和移液管离火焰1 2cm处 1 临时保藏 接种到固体斜面培养基 菌落长成后置于4 冰箱保存 2 长期保存 甘油冷冻管藏法 一 培养基的制作是否合格如果未接种的培养基在恒温箱中保温1 2d后无菌落生长 说明培养基的制备是成功的 否则需要重新制备 实验操作成果评价 3 二 接种操作是否符合无菌要求如果培养基上生长的菌落的颜色 形状 大小基本一致 并符合大肠杆菌菌落的特点 则说明接种操作是符合要求的 如果培养基上出现了其他菌落 则说明接种过程中 无菌操作还未达到要求 需要分析原因 再次练习 三 是否进行了及时细致的观察与记录培养12h与24h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同 及时观察记录的同学会发现这一点 并能观察到其他一些细微的变化 这一步的要求主要是培养学生良好的科学态度与习惯 1 关微生物营养物质的叙述中 正确的是 a 是碳源的物质不可能同时是氮源b 凡碳源都提供能量c 除水以外的无机物只提供无机盐d 无机氮源也能提供能量 d 解析 a b选项的表达是不完整的 有的碳源只能是碳源 有的碳源可同时是氮源 有的碳源同时是能源 有的碳源同时是氮源 也是能源 对于c选项 除水以外的无机物种类繁多 功能也多样 对于d选项 无机氮源提供能量的情况还是存在的 如nh3可为硝化细菌提供能量和氮源 2 下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是 a 防止杂菌污染b 接种前菌种要进行灭菌c 培养基和发酵设备都必须灭菌d 灭菌必须在接种前 b 退出 解析 发酵所用的菌种大多是单一的纯种 整个发酵过程不能混入其他微生物 杂菌 a正确 b错误