（江苏专用）2020版高考生物总复习第34讲微生物的培养与应用教案（选修1）.docx

第34讲微生物的培养与应用考纲考情知考向核心素养提考能最新考纲1.微生物的分离和培养（B）2.某种微生物数量的测定（C）3.微生物的应用（B）4.（实验）微生物的分离和培养（b）科学思维分析培养基的成分及其作用，比较平板划线法和稀释涂布平板法的异同科学探究设计实验探究微生物培养的条件近三年江苏考情2018年T31（6分）；2017年T5（2分）、T31（3分）；2016年T10（2分）、T19（2分）、T25（3分）；2015年T13（2分）、T31（8分）社会责任关注有害微生物的控制及宣传健康生活考点一微生物的实验室培养1.培养基（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。（2）营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外，还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求。（3）种类按照物理性质可分为液体培养基、固体培养基、半固体培养基。按照成分的来源可分为天然培养基和合成培养基。按照功能用途可分为选择培养基、鉴别培养基等。2.无菌技术（1）含义：在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。（2）常用方法3.大肠杆菌的纯化培养（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基（2）纯化大肠杆菌的方法纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。纯化大肠杆菌的关键步骤：接种。常用的微生物接种方法有两种a.平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。如图所示b.稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。（3）菌种的保存方法对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。（1）（人教版选修一P16“旁栏思考题”拓展）请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。培养细菌用的培养基与培养皿玻棒、试管、烧瓶和吸管实验操作者的双手提示需要灭菌；需要消毒。（2）（人教版选修一P17“倒平板操作”）为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？平板冷凝后，为什么要将平板倒置？提示通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。（人教版选修一P18“旁栏”）微生物的接种方法除了平板划线法和稀释涂布平板法外，还包括斜面接种、穿刺接种等方法。微生物接种的核心都是要防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。1.（2018全国卷，37）生物选修1：生物技术实践在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列问题：（1）在实验室中，玻璃和金属材质的实验器具（填“可以”或“不可以”）放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。（2）牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种方法的优点是_。（3）密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒，其原因是紫外线能。在照射前，适量喷洒，可强化消毒效果。（4）水厂供应的自来水通常是经过（填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”）消毒的。（5）某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是。解析（1）在实验室中，能耐高温的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿和金属材质的实验器具等可以放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。（2）巴氏消毒法或高温瞬时消毒法与煮沸消毒法相比，其优点表现为在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少。（3）紫外线照射能消毒的原因是其能够破坏微生物细胞中的DNA分子。在利用紫外线照射前，适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可强化消毒效果。（4）自来水通常采用氯气消毒。（5）采用高压蒸汽灭菌时，若压力达到设定要求，而温度未达到相应要求，最可能的原因是没有排尽高压蒸汽灭菌锅内的冷空气。答案（1）可以（2）在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少（3）破坏DNA结构消毒液（4）氯气（5）未将锅内冷空气排尽2.（2018扬州一模）在白酒发酵的窖池中，当培养液的pH4.5时，酵母菌的代谢活动逐渐受到抑制，甚至停止。耐酸性酵母菌能在pH3.5的环境下继续表现出较强发酵能力，适宜作白酒发酵生产用菌种，为选育适合白酒生产的耐酸性强的酵母菌，研究者进行了相关实验。请回答下列有关问题：（1）在发酵过程中，窖池中培养液的pH会逐渐下降，原因是_。 （2）取窖底泥，溶于10 mL无菌水中，再取1 mL上清液接入一定量的麦芽汁培养基中培养，其目的是，2天后分别接种到不同酸碱度的麦芽汁培养基上，培养结果见下表。为选择合适的菌种，根据培养结果，可从表格中pH范围为的培养基中获得菌种（“”越多表示菌体长得越好）。pH5pH4pH3pH2.5pH2（3）通过下图所示法进行纯化培养，取最终的酵母菌稀释液0.1 mL滴在培养基上进行涂布，要将涂布器后才能进行操作。在恒温培养箱中培养一段时间后，其中某组的3个平板上菌落数分别为99个、92个、94个，则可以推测酵母菌液中每毫升含菌数为个。运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小，原因是_。（4）实验获得了三个耐酸性较强的酵母菌菌株，特点如下表。菌株ABC特点pH3.5时，生长代谢正常、优于其他常规菌种pH3.5时，生长代谢正常，pH46时不正常pH2.56，生长代谢正常、优于其他常规菌种依据菌株特点，研究者认为菌株更适合作为白酒发酵菌株，作出这一判断的理由是_。解析（1）在发酵过程中，酵母菌细胞呼吸产生CO2，可形成碳酸，可能还产生其他酸性代谢产物，所以窖池中培养液的pH会逐渐下降。（2）麦芽汁培养基中含酵母菌生长的各种物质，可以使酵母菌大量繁殖；需要选育的是耐酸性强的酵母菌，而耐酸性酵母菌能在pH3.5的环境下继续表现出较强发酵能力，所以根据培养结果，可从表格中pH为23的培养基中获得菌种。（3）图示纯化培养的方法为稀释涂布平板法；在培养基上进行涂布时，要将涂布器灼烧冷却后才能进行操作；根据图解可知菌液被稀释了106倍，该稀释度下平板上生长的平均菌落数为（999294）395个，涂布平板时所用的稀释液的体积是0.1 mL，所以该酵母菌液中每毫升含菌数为950.11069.5108个；由于有的菌落可能是由2个或多个菌体形成的，所以运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小。（4） 根据表格分析可知，C菌对pH的耐受范围更大，发酵初期pH近中性，C菌种适合此环境，更易于形成优势菌群；发酵后期pH逐渐降低，C菌种依然能正常生长，所以C菌株更适合作为白酒发酵菌株。答案（1）细胞呼吸产生CO2，可形成碳酸，代谢过程还产生了其他酸性物质（2）使得酵母菌大量繁殖23（3）稀释涂布平板 灼烧冷却9.5108有的菌落可能是由2个或多个菌体形成的（4）C该菌对pH的耐受范围更大，发酵初期pH近中性，C菌种适合此环境，更易于形成优势菌群；发酵后期pH逐渐降低，C菌种依然能正常生长（答案合理即可）走出微生物培养的5个误区（1）不是所有微生物培养基中均需加入特殊营养物质。碳源、氮源、水分、无机盐是微生物生长必需的四大营养成分，有些微生物可自行合成特殊营养物质，而对那些合成能力有限或不能合成特殊营养物质的微生物（如乳酸菌），则需在培养基中添加诸如维生素等物质。（2）平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同第一次操作：杀死接种环上原有的微生物。每次划线之前：杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端。划线结束后：杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。（3）倒平板的温度一般在50 左右适宜，温度过高会烫手，温度过低培养基又会凝固。平板冷却凝固后需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又防止皿盖上的水珠落入培养基，造成培养基污染。考点二微生物的筛选和计数1.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（1）原理与流程（2）统计菌落数目时，培养基表面生长的1个菌落，来源于样品稀释液中1个活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在30300的平板进行计数。（3）从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法是（平均菌落数C涂布的稀释液体积V稀释倍数M）点悟：利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是恰当的稀释度（4）实验结果分析与评价2.分解纤维素的微生物的分离（1）纤维素酶及纤维素分解菌筛选原理、方法（2）实验流程（3）分离纤维素分解菌所用的两种培养基比较分离纤维素分解菌的实验中先用选择培养基，再用鉴别培养基。选择培养基为液体培养基，以纤维素作为碳源和能源的微生物可以正常生长，而其他绝大多数微生物不能正常生长。鉴别培养基含琼脂，为固体培养基，细菌可在该培养基上形成肉眼可见的菌落。刚果红染色法应用于鉴别（选择、鉴别）培养基。（2018南京、盐城一模）多氯联苯是一种对人体有很大危害的有机物质，污染土壤后，很难清除。研究发现，部分酵母菌具有分解多氯联苯的作用。为消除这种污染，科研人员计划从受污染的土壤中筛选出高效分离多氯联苯的菌株。请回答问题：（1）筛选分解多氯联苯的菌株时，应将土壤样品，接种到以为唯一碳源的培养基上，从功能上讲，该培养基属于培养基。 （2）对初步提取到的菌株要进行培养，一般操作方法有两种，其中之一是下图所示的法。 （3）将酵母菌溶液分别稀释10倍、100倍、1 000倍。每个浓度都接种三个平板，每个平板均接入0.1 mL稀释菌液，该接种方法是法。培养时，需将培养皿培养，以防冷凝水造成污染。经适当培养后，平板上的菌落数如上表所示。据此可得出，每升菌液中酵母菌活菌数为个。 解析（1）筛选分解多氯联苯的菌株时，应将土壤样品稀释，接种到以多氯联苯为唯一碳源的培养基上。这样的培养基只有能分解多氯联苯的菌株才能生存，因此从功能上讲，该培养基属于选择培养基。（2）对初步提取到的菌株要进行纯化，纯化方法有两种，即平板划线法和稀释涂布平板法。图示是利用平板划线法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。（3）将酵母菌溶液进行稀释后接种到平板上的方法是稀释涂布平板法。微生物培养时，为了防止皿盖上的冷凝水滴入培养基造成污染，需将培养皿倒置培养。计数时，应该选择菌落数为30300之间的平板进行统计，据表中数据可以判断稀释100倍的符合要求。由表中数据可以计算出三个平板的平均菌落数为（455751）351，每个平板均接入0.1 mL稀释菌液，故每升菌液中酵母菌活菌数为510.11 0001005.1107个。答案（1）稀释（溶解）多氯联苯选择（2）纯化平板划线（3）稀释涂布平板倒置5.1107澄清易错易混强化科学思维易错易混易错点1混淆两种“对照组”与“重复组”点拨（1）两种对照组作用比较判断培养基中“是否有杂菌污染”，需将未接种的培养基同时进行培养。判断选择培养基“是否具有筛选作用”，需设置牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养，观察两种培养基上菌落数目，进行对比得出结论。（2）重复组的设置及作用为排除偶然因素对实验结果的干扰，在每一稀释度下宜设置3个平板作重复组，选择菌落数均在30300且数目相差不大的三个平板，用“平均值”代入计数公式予以计算菌落数。易错点2不清楚为什么测定活菌的数量不能用平板划线法？点拨由于在所划的线中，一般只有最后一次划线的末端才会形成只由一个细菌形成的菌落，而其他一些菌落往往由两个细菌或多个细菌繁殖而成，而在计数时一个菌落对应着一个细菌，这样在划线所得的平板中，菌落数目远低于活菌的实际数值，所以不能用平板划线法测定活菌数量。易错点3易混淆选择培养基与鉴别培养基点拨（1）选择培养基允许特定的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长。土壤中分解尿素的细菌的分离利用的是选择培养基。（2）鉴别培养基是在培养基中加入某种特殊的化学物质，某种微生物在培养基中生长后能产生某种代谢产物，而这种代谢产物可以与培养基中的特殊化学物质发生特定的化学反应，产生明显的特征性变化，根据这种特征性变化，可将该种微生物与其他微生物区分开来的培养基。用于筛选纤维素分解菌的培养基就是鉴别培养基。 深度纠错（2018湖北长望浏宁四县一模）农业生产上有一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解，长期使用会污染土壤。为修复被污染的土壤，可按图示程序选育出能降解该除草剂的细菌。已知该除草剂（含氮有机物）在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明。请分析回答：（1）微生物接种是微生物学研究中最常用的基本操作技术，该技术的核心是。（2）在选育过程中，应将土壤浸出液接种于以该除草剂为唯一的培养基上。通过比较单菌落周围的大小，可筛选出高效的目的菌。实验结果如上图显示的AE五种菌株中，是最理想菌株。（3）若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是。将1 mL土壤溶液分别稀释10倍和100倍，每种稀释度各在3个平板上分别接入0.1 mL稀释液，经过适当培养后，6个平板上的菌落数分别为59、57、58和2、7、5，空白对照组的平板上没有菌落，则每升土壤溶液中活菌数的理论值为个。实际上每升土壤溶液中的活菌数比通过统计所得的这一数值要大，因为_。（4）科研人员用放射线处理该细菌，获得突变株A和B，然后对突变株A和B进行实验，结果如下表所示：接种的菌种一般培养基实验处理及结果A不生长添加营养物质甲，能生长B不生长添加营养物质乙，能生长AB能生长不添加营养物质甲、乙，能生长请分析突变株A和B混合在一起接种于一般营养基中能生长的最可能原因。_解析（1）微生物接种技术的核心是防止杂菌污染。（2）已知该除草剂为含氮有机物，在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明；降解该除草剂的细菌能分解培养基中的该除草剂，使培养基中出现透明圈。可见，在选育能降解该除草剂的细菌的过程中，应将土壤浸出液接种于以该除草剂为唯一氮源的培养基上。通过比较单菌落周围透明圈的大小，可筛选出高效的目的菌。实验结果图显示的AE五种菌株中，E菌落周围的透明圈最大，因此E是最理想菌株。（3）对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用稀释涂布平板法进行接种。统计菌落数目时，一般选择菌落数在30300的平板进行计数，因此应选择稀释度为10倍的、分别接入0.1 mL稀释液的3个平板上的菌落数（分别为59、57、58）进行统计，则每升土壤溶液中活菌数的理论值为（595758）310（0.1103）5.8106（个）。由于统计结果是用菌落数来表示的，当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以实际上每升土壤溶液中的活菌数比通过统计所得的这一数值要大。（4）分析表中信息可知：突变株A生长需要营养物质甲，突变株B生长需要营养物质乙，据此可推知，突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中能生长的最可能原因是：突变株A生长需要营养物质甲，突变株B可以提供；突变株B生长需要营养物质乙，突变株A可以提供。答案（1）防止杂菌污染（无菌操作）（2）氮源透明圈E（3）稀释涂布平板法5.8106统计结果是用菌落数来表示的，当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落（4）突变株A生长需要营养物质甲，突变株B可以提供；突变株B生长需要营养物质乙，突变株A可以提供探索高考命题的奥秘（九）教材原型1.（人教版选修一P21“内文第三自然段”）实验室中微生物的筛选，人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基（selective media）。转换视角11.2018全国卷，37（1）将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。回答下列问题：M培养基若用于真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素以抑制的生长，加入了链霉素的培养基属于培养基。答案细菌选择2.（人教版选修一P28“内文第二自然段”）刚果红（Congo Red，简称CR）是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。这样，我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。转换视角22.2018全国卷，37（3）若在M培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是，该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是_。答案碘液淀粉遇碘液显蓝色，产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，形成透明圈转换视角33.2014全国卷，39（2）（3）（1）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的。（2）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培养基甲培养基乙注：“”表示有，“”表示无。据表判断，培养基甲（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是；培养基乙（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是_。答案（1）红透明圈（2）不能液体培养基不能用于分离单菌落不能培养基中没有纤维素，不会形成CR纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌课后分层训练（时间：35分钟）1.（2018南通、泰州一模）下列检测某熟制食品中大肠杆菌是否超标的实验操作，不合理的是（）A.待检测食品需要经过灭菌操作后取样检测B.应设置未接种的培养基，作为实验的对照C.用稀释涂布平板法接种计数大肠杆菌的活菌数D.接种后将培养皿倒置并在适宜温度下培养解析待检测食品不能经过灭菌操作后取样检测，否则检测不到大肠杆菌，或者统计值偏小。答案A2.（2018通、泰、淮、连、扬、徐、宿三模）下列有关微生物培养的叙述，正确的是（）A.溶化牛肉膏时，称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯B.涂布接种时，涂布器应在干热灭菌箱中灭菌冷却后再使用C.纯化培养时，培养皿应倒置放在恒温培养箱内的摇床上培养D.观察菌落时，应将培养皿盖拿掉后在显微镜下进行观察计数解析涂布器使用前常浸在酒精中，然后再灼烧冷却后使用；纯化培养时，培养皿倒置在恒温培养箱内培养，但是不需要摇床处理；观察菌落时不能打开培养皿盖且无需在显微镜下观察。答案A3.在分离、纯化大肠杆菌实验中，划线接种（图1）、培养结果（图2）如下图。有关叙述错误的是（）A.接种前应对培养基进行高压蒸汽灭菌B.连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落C.接种过程中至少需要对接种环灼烧5次D.图1中a区域为划线的起始位置解析一般采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌，A正确；菌液经过连续划线，菌液中的菌体会越来越少，最终会获得单个细菌形成的菌落，B正确；每次划线前后都需要将接种环灼烧灭菌，因此按照图中划线顺序（dcba），整个划线过程需要对接种环灼浇5次，C正确；每次划线的菌种来自上一区域的末端，因此划线的起始区域菌落最多，由图乙可推知，图甲中的d区域菌落多，为划线的起始位置，D错误。答案D4.（2018苏锡常镇三模）下列有关微生物分离、纯化及计数的叙述，错误的是（）A.常用富含纤维素的培养基富集培养纤维素分解菌B.平板划线法通过连续划线将聚集的菌种分散并计数C.稀释涂布平板法通过系列梯度稀释可将微生物分散D.用血细胞计数板计数微生物时，实验结果往往偏大解析平板划线法可以用于分离微生物，但不能用于计数，稀释涂布平板法可以计数。用血细胞计数板计数微生物时，死菌、活菌都统计在内，实验结果往往偏大。答案B5.某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素等配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如图所示。下列有关叙述错误的是（）A.培养基中加入化合物A作为唯一碳源，目的是为了筛选目的菌B.实验培养过程中进行振荡培养，可使目的菌和培养液充分接触C.实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是防止外来杂菌污染D.将固体培养基得到的目的菌重复多次上述实验的目的是获得大量菌种解析本实验的目的是“筛选到能高效降解化合物A的细菌”，因此培养基中加入化合物A作为唯一碳源，目的是为了筛选目的菌，A正确；实验培养过程中进行振荡培养，可使目的菌和培养液充分接触，B正确；实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是防止外来杂菌污染，C正确；本实验中需要振荡培养，因此所用培养基为液体培养基，D错误。答案D6.（2018南京三模）（多选）日前微信传言手机屏幕细菌比马桶按钮上的多。两个兴趣小组分别展开如下图的实验过程。下列分析正确的是（）A.通过观察菌落的形态、大小，可知手机屏幕和马桶按钮上都存在多种微生物B.以上两组实验在接种过程中均需要用到酒精灯、接种环等C.两组实验操作均正确且完全一致，但结果截然不同，原因可能是取样部位不同D.该实验对照组可以设置为取相同培养基接种等量无菌水进行培养解析由实验结果可知，两组实验均采用稀释涂布平板法，在接种过程中均需要用到酒精灯、涂布器等。答案ACD7.（2018常州一模）（多选）在三个培养皿中各加入等量但不同种的大肠杆菌培养基，在培养皿中培养36 h后统计细菌菌落数（见下表）。下列叙述正确的是（）培养皿培养基成分培养皿中的菌落数琼脂、糖类35琼脂、糖类和维生素250琼脂和维生素0A.培养皿、和表明琼脂是培养基中必需的营养成分B.培养皿和说明维生素是大肠杆菌需要的生长因子C.培养皿和说明糖类是大肠杆菌需要的碳源D.本实验使用的是固体、不完全培养基解析琼脂是凝固剂，不是营养成分；培养皿和的区别在于是否添加维生素，结果说明维生素是大肠杆菌需要的生长因子；培养皿和的区别在于是否添加糖类，结果说明糖类是大肠杆菌需要的碳源；本实验添加了琼脂，使用的是固体培养基，营养成分不完全，缺少无机盐、氮源等，说明使用的是不完全培养基。答案BCD8.（多选）下列有关微生物培养、纯化及筛选的叙述，正确的是（）A.为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应立即快速挑取菌落B.平板划线操作中第二次及其后的划线应从上一次划线的末端开始C.筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的唯一氮源D.在纤维素刚果红培养基上，能产生透明圈的为纤维素分解菌解析为了防止污染，接种环经火焰灭菌后需要冷却后再挑取菌落，否则会导致高温使菌种死亡，A错误；平板划线操作中第二次及其后的划线应从上一次划线的末端开始，B正确；筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的唯一氮源，C正确；在纤维素刚果红培养基上，能产生透明圈的为纤维素分解菌，D正确。答案BCD9.（2018全国卷，37）生物选修1：生物技术实践回答下列与酵母菌有关的问题：（1）分离培养酵母菌通常使用（填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麦芽汁琼脂”）培养基，该培养基应采用灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上，培养一段时间后可观察到菌落，菌落的含义是_。（2）酵母菌液体培养时，若通入氧气，可促进（填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”）；若进行厌氧培养，可促进（填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”）。（3）制作面包时，为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起面包松软的原因是_。解析（1）酵母菌为异养型生物，通常使用麦芽汁琼脂培养基培养；培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌；由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体称为菌落。（2）酵母菌为兼性厌氧型生物，有氧条件利于其繁殖，无氧条件下其进行酒精发酵。（3）酵母菌分解葡萄糖可产生二氧化碳，使面包松软多孔。答案（1）麦芽汁琼脂高压蒸汽由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体（2）菌体快速增殖乙醇产生（3）酵母菌分解葡萄糖会产生CO2，CO2使面包松软10.（2018淮中、南师附中、海门、天一四校联考）下图表示微生物的接种实验中的一些步骤。请回答下列有关问题：（1）步骤前的一步操作是，该操作用到的主要仪器是。（2）实验步骤的目的是，步骤之间还需要将接种环。（3）指出步骤操作不当的地方：_。（4）分别用三个平板培养三种细菌（E.coli、S.albus、B.subtilis），然后在培养基上打出直径为3 mm的孔，并在孔中加入一定浓度的甲抗生素，经过一定时间培养后，可以在孔的周围观察到一圈清晰区，此乃抑制细菌生长所致。测量清晰区的直径（如图所示），数据如下表。细菌不同浓度甲抗生素条件下清晰区直径/mm5 gmL1甲7.5 gmL1甲10 gmL1甲15 gmL1甲20 gmL1甲E.coli710141616S.albus581317B.subtilis5791419S.albus和B.subtilis对甲抗生素敏感的区别是_。 有人感染E.coli而患病，医生使用20 gmL1甲抗生素给予治疗，试用生物进化理论解释这种不明智的做法：_。采养殖池中的水样1 mL稀释100倍，吸取稀释后的水样1 mL，接种于E.coli选择培养基上培养，一段时间后观察菌落并计数，重复三次实验结果如下图。该养殖池每毫升水样含有E.coli个。 解析（1）据图分析，步骤是倒平板，前面一个步骤是灭菌，一般用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌。（2）实验步骤表示接种前灼烧接种环，目的是杀灭接种环上可能引起污染的微生物；步骤之间还需要将接种环冷却，避免高温杀死要接种的菌种。（3）步骤操作中，接种环划线的首尾区域不应相连。（4）根据表格分析，S.albus与B.subtilis相比，B.subtilis对于低浓度的甲抗生素较敏感。根据表格分析，相比15 gmL1，20 gmL1的甲抗生素不能起到更好地抑制E.coli效果，但会较快提高抗生素抗性基因的频率。 根据观察到的菌落数，取其平均值9，又因为该菌落数是1 mL水样稀释了100倍所观察的数据，所以该养殖池每毫升水含有9100900个E.coli。答案（1）灭菌高压蒸汽灭菌锅（2）杀灭接种环上可能