浙科版选修1 第四部分 第7课时 植物的组织培养 学案.docx

第7课时植物的组织培养知识内容要求考情解读植物的组织培养掌握程度参考实验与探究能力1.进行菊花的组织培养。2.尝试植物激素的应用。3.说明植物组织培养的原理。一、植物的组织培养1概念：取一部分植物组织，如叶、芽、茎、根、花瓣或花粉等，在无菌的条件下接种在三角瓶中的琼脂培养基上，给予一定的温度和光照，使之产生愈伤组织，或进而生根发芽。2原理：植物细胞的全能性。3过程：外植体愈伤组织芽、根植株4实验中使用的激素(1)人工合成的萘乙酸代替生长素，人工合成的苄基腺嘌呤代替细胞分裂素。(2)两者的摩尔浓度比决定组织是生根，还是生芽。细胞分裂素与生长素的比例高时，诱导芽的生成；两者比例大致相等时，愈伤组织继续生长而不分化；两者比例低时，会趋于生根。思考本实验用人工合成的激素，而不用植物中存在的天然激素，为什么？答案植物中存在的天然激素都有相应的使之分解的酶，这样，天然激素在植物体内作用和存在的时间就较短，而人工合成激素在植物中没有相应分解它的酶，所以作用和存在的时间长，作用效果明显。探究1理性思维根据图示植物组织培养的过程，回答相关问题：1b是愈伤组织，其特点是：细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。2a过程是脱分化，是指由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，又叫去分化。3c过程是再分化，是指愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程。4植物体上的细胞没有表现出全能性，而是分化成了不同的组织器官，这说明植物细胞全能性表达需要在离体的条件下进行。5植物组织培养的理论基础植物细胞的全能性。6植物体细胞表达全能性的条件：(1)离体；(2)适宜的外界条件(一定的营养物质、激素、温度等)。探究2科学探究1激素在植物组织培养过程中的作用(1)培养基中加入的植物激素是生长素和细胞分裂素。(2)两者的摩尔浓度比决定组织是生根还是生芽。(3)在植物组织培养中，应把握好生长素和细胞分裂素的浓度、用量比例及使用顺序。下表为生长素和细胞分裂素使用先后顺序对植物细胞发育方向的影响。使用顺序实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于细胞分裂，但细胞不分化先使用细胞分裂素，后使用生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率提高下表为生长素与细胞分裂素用量比例对植物细胞发育方向的影响比例结果细胞分裂素浓度生长素浓度诱导芽生成细胞分裂素浓度生长素浓度愈伤组织继续生长而不分化细胞分裂素浓度生长素浓度诱导根生成2.在植物组织培养再分化阶段中，逐渐改变培养基中植物激素x和植物激素y的浓度比，细胞群的变化情况如下图所示：若培养基中植物激素x的浓度为a、植物激素y的浓度为a0.2，则细胞群分化的结果最可能是c试管，分析图可知，植物激素x的浓度小于植物激素y的浓度时，有利于根的生成。例1下列关于影响植物组织培养的因素，说法正确的是()a不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料培养的难易程度相同b在植物组织培养过程中，培养基中必须添加植物激素c植物激素中生长素和细胞分裂素的作用是互相独立的dph、温度、光照条件等因素对植物组织培养特别重要答案d解析不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料也会因年龄、保存时间的长短等因素导致组织培养的难易程度不同；在植物组织培养过程中，培养基中常常要添加植物激素，但不是都必须添加植物激素，如菊花茎段组织培养不必添加植物激素；各种植物激素的作用是相互联系的，而不是互相独立的。方法技巧外界条件对植物组织培养的影响(1)温度：大多数植物通常采用(252)的温度。(2)光照：对愈伤组织的生长和分化有很大的影响。(3)ph：进行菊花组织培养时，ph应控制在5.8左右。例2某愈伤组织在如图甲所示的培养基中培养一段时间后得到如图乙所示的结构。经分析可知该培养基中()a细胞分裂素多，生长素少b细胞分裂素少，生长素多c细胞分裂素和生长素的用量相等d只有生长素答案b解析从图乙中可以看出，该培养基有利于生根且抑制芽的形成，所以可推断该培养基中生长素多，细胞分裂素少。二、菊花的组织培养过程1发芽培养基和生根培养基的比较(1)发芽培养基：细胞分裂素摩尔浓度大于生长素摩尔浓度的培养基。(2)生根培养基：生长素摩尔浓度大于细胞分裂素摩尔浓度的培养基。2实验内容以菊花为材料进行组织培养。首先，用细胞分裂素相对较多和生长素相对较少的培养基(发芽培养基)进行培养，使其长出较多的丛状苗；然后，将丛状苗分株培养。分株后，再移入细胞分裂素相对较少和生长素相对较多的培养基(生根培养基)中，使其生根；将生根的苗从三角瓶中移至草炭土或蛭石中继续生长，待苗健壮后再移至土中。3菊花的组织培养操作流程思考如果在自然界取植物样本进行组织培养，你认为应采取什么措施保证样本不被污染？答案(1)操作环境洁净。(2)植物样本洁净。(3)操作敏捷迅速。探究1科学探究下面是菊花组织培养的实验操作流程。1植物组织培养过程中的无菌技术包括培养环境、培养基、培养器械的灭菌、植物材料(外植体)的消毒，对培养材料进行表面消毒时，一方面要考虑药剂的消毒效果；另一方面要考虑植物材料的耐受力。不同药剂、不同植物材料，甚至不同器官要区别对待。2愈伤组织培养：每天光照不少于14.5 h。3试管苗培养：要先进行生芽培养，再进行生根培养，试管苗培养要在光照条件下进行。4外植体的选择：根据植物细胞的全能性原理，原则上选择任何活的植物体都能培养出组培苗，但不同植物的各种组织和器官的分裂能力不同，同时还要考虑消毒处理的特殊情况，因此，选择恰当的外植体进行接种既有利于消毒，避免污染，又有利于在较短时间内形成组培苗，从而提高组培成功率。探究2理性思维1ms培养基(植物组织培养用的培养基)的成分及各成分的作用成分作用微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐蔗糖提供碳源，维持细胞渗透压甘氨酸、维生素、烟酸、肌醇满足离体植物细胞在正常代谢途径受一定影响后所产生的特殊营养需求与lb培养基相比，ms培养基有何特别之处？答案lb培养基以蛋白胨、酵母提取物等有机营养为主，ms培养基则需提供大量的无机营养，无机盐混合物包括植物生长必需的大量元素和微量元素两大类。此外进行植物组织培养，培养基中需添加特定配比的生长素和细胞分裂素。2进行植物组织培养时为何必须保障“无菌”？为此需对外植体、培养基分别进行何种处理？答案若有杂菌污染，一方面可争夺营养，更重要的是可以产生毒素，从而使外植体受毒害而死亡，故必须保障无菌操作。为保障无菌，外植体需消毒，培养基则必须予以高压蒸汽灭菌。3在选取菊花茎段时，为何要选取生长旺盛的嫩枝？答案外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一，生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。4不同植物、不同组织的生根和生芽是否都可使用与本实验相同的生长素和细胞分裂素浓度？答案不可以。例3以野生菊花为材料进行的组织培养步骤如下图所示：请回答：(1)按照菊花的需求量，ms培养基由大量元素、微量元素和 组成。ms培养基含有十几种化合物，配制不方便也难以称量准确，可将培养基中的各种成分扩大510倍分别称量，配成 ，用时稀释。(2)步骤x中的野生菊花一般选择 。a开过花的老枝b未开花植株的茎上部新萌生的侧枝c正在开花的枝条d任何枝条均可(3)野生菊花外植体在接种前要用70%的 和5%的 溶液进行表面消毒。(4)过程a在无菌的条件下把消毒后的野生菊花外植体接种在三角瓶的琼脂培养基上，给予适宜条件，使之产生愈伤组织。过程b要在 培养基上进行培养，使之长出较多的丛状苗。植物组织培养实验用人工合成的植物生长调节剂，而不用植物中存在的天然激素的原因是 。(5)步骤y表示 ，再移植到土中培养(定植)，即可长成植株并开花。答案(1)有机成分母液(2)b(3)乙醇次氯酸钠(4)发芽(或细胞分裂素多于生长素)人工合成的植物生长调节剂在植物中没有相应使之分解的酶，作用时间长，作用效果明显(意思合理即可)(5)移栽锻炼例4(2017慈溪开学考试)请分析回答下列有关生物技术专题方面的问题。(1)下表是一种培养基配方，请回答下列问题：成分kh2po4na2hpo4mgso47h2o葡萄糖尿素琼脂含量1.4 g2.1 g0.2 g10.0 g1.0 g15.0 g该培养基高压蒸汽灭菌时要在 g/cm2压力下灭菌30分钟，为了防止尿素加热分解，需要单独用 过滤去除细菌。该培养基属于什么培养基(多选) 。a液体b固体c鉴定d选择f天然如果要对培养的菌落进行纯化，一般采用 (方法)，操作的第一步及每次划线之前都要对接种环进行 处理，目的是对接种环进行 。制备培养基的操作步骤是 (填选项字母)。a倒平板b计算c溶化d称量e灭菌aabcde bebdcacbdcae dbdcea(2)如图是植物组织培养的示意简图，请回答下列问题：b表示的是 ，它是由高度液泡化的、呈无定型状态的薄壁细胞组成的。a能被培养成为c的根本原因是 。植物激素中 是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。答案(1)500g6玻璃砂漏斗bd划线分离法灼烧灭菌d(2)愈伤组织a具有发育成该种植物所需的全部基因细胞分裂素和生长素解析(1)题干培养基配方中有葡萄糖，所以在高压蒸汽灭菌时要在500 g/cm2压力下灭菌30分钟，为了防止尿素加热分解，需要单独用g6玻璃砂漏斗过滤去除细菌。该培养基中添加了琼脂，尿素作为唯一氮源物质，故该培养基属于固体培养基和选择培养基，用于选择含有脲酶的细菌。如果要对培养的菌落进行纯化，一般采用划线分离法，操作的第一步及每次划线之前都要对接种环进行灼烧灭菌。制备培养基的操作步骤是：计算称量溶化灭菌倒平板。(2)外植体经脱分化产生愈伤组织，愈伤组织是由高度液泡化的、呈无定型状态的薄壁细胞组成的。外植体a能被培养成为植株c的根本原因是a具有发育成该种植物所需的全部基因。植物激素中细胞分裂素和生长素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。方法技巧植物组织培养技术和微生物培养技术的区别项目植物组织培养技术微生物培养技术原理植物细胞具有全能性利用微生物(如大肠杆菌)作为载体，培养出人类所需要的东西(如单克隆抗体)营养物质矿质元素(大量元素、微量元素)、蔗糖、维生素、植物激素及其他有机成分碳源、氮源、维生素、无机盐和水，不含促进植物生长的激素无菌操作实验室培养阶段无菌(移至土中定植时，为自然环境)全程无菌温度1825 通常37 培养，4 保存光照需光照无需光照ph5.8左右细菌：通常中性偏碱环境霉菌：通常中性偏酸环境基本流程1(2017慈溪一中期中)植物组织培养和微生物培养都需要无菌操作，下列不适宜用高压蒸汽灭菌的是()a接种环和镊子b三角瓶和广口瓶c发芽培养基和生根培养基d用于培养的幼茎和幼芽答案d解析微生物培养和植物组织培养过程中所需的操作器具、培养基均需要高压蒸汽灭菌，而微生物的菌种和植物组培的幼茎和幼芽不能用高压蒸汽灭菌，否则会造成其死亡，d项符合题意。2(2018绍兴一中模拟)诱导丛状苗时，培养基中应添加的植物激素及配比是()a生长素浓度高于细胞分裂素浓度b生长素浓度低于细胞分裂素浓度c生长素浓度低于赤霉素浓度d生长素浓度高于赤霉素浓度答案b解析诱导丛状苗时，培养基中应添加的植物激素及配比是细胞分裂素浓度大于生长素浓度，b项符合题意。3(2017效实中学期中)下图表示植物组织培养过程。据图分析，下列叙述正确的是()a试管的培养基中含有植物生长调节剂，不含有有机物b试管中的细胞能进行减数分裂c调节培养基中植物生长调节剂的比例可诱导产生不同的植物器官d植株根尖细胞的全能性比植株根尖细胞的强答案c解析试管的培养基中含有植物生长调节剂和有机物等，a错误；试管中的细胞进行分裂的方式是有丝分裂，b错误；调节培养基中植物生长调节剂的比例，可诱导产生根和芽，c正确；植株根尖细胞的全能性与植株根尖细胞相同，d错误。4(2017瑞安中学期中)如图为某二倍体植株花药中未成熟花粉在适宜培养基上形成完整植株的过程。下列有关叙述正确的是()a过程表示脱分化，过程表示再分化b过程需要避光，过程需要照光c过程说明花粉细胞具有全能性d过程获得的完整植株自交后代不会发生性状分离答案a解析图中过程表示脱分化，表示再分化，a正确；脱分化需要避光处理，再分化和植物生长需要照光，因此过程需要避光，过程、需要照光，b错误；过程、是植物组织培养过程，由花粉细胞最终获得了完整植物个体，说明花粉细胞具有全能性，c错误；过程获得的完整植株属于单倍体植株，高度不育，不能自交产生后代，d错误。5培育脱毒草莓的目的是利用植物组织培养技术避免病毒感染草莓幼苗，从而提高草莓的生命力和产量。脱毒草莓具有栽培容易、增产效果显著、周期短、经济效益高等特点，是发展我国高效农业和绿色有机农业的首选经济作物。请回答下列问题：(1)培育脱毒植物的原理是植物细胞具有 。外植体形成愈伤组织需要经过 过程，愈伤组织形成幼苗需要经过 过程。整个培养过程要在 条件下进行。(2)对培养基进行灭菌时，多采用 法，而在微生物培养实验中对接种环或涂布器灭菌时，则用 法。(3)进行植物组织培养需配制ms培养基，培养基中常用的凝固剂是 。该培养基中需要添加 、 等植物激素。欲利于根的分化，植物激素的用量比例应为 。答案(1)全能性脱分化再分化无菌(2)高压蒸汽灭菌灼烧灭菌(3)琼脂生长素细胞分裂素生长素多于细胞分裂素(合理即可)解析(1)植物细胞具有全能性，这是植物组织培养的理论基础。培养的外植体要经过脱分化和再分化过程才能形成幼苗，整个过程要保持无菌操作。(2)培养基常采用高压蒸汽灭菌，玻璃器皿常采用干热灭菌，接种环等金属器具常采用灼烧灭菌。(3)配制培养基时常用的凝固剂是琼脂，生长素与细胞分裂素等植物激素可调节脱分化和再分化过程。当生长素多于细胞分裂素时，利于生根。题组一植物组织培养的原理和基本过程1影响植物组织培养的因素包括()培养基的配制外植体的选取激素的使用 消毒温度、ph、光照a bc d答案a解析植物组织培养过程受多种外界因素的影响，其中包括温度、光照、ph等，而培养基的成分、外植体的选取和消毒是否严格等也影响植物组织培养。2下列有关植物组织培养的叙述，不正确的是()a植物组织培养就是将离体的细胞、组织、器官等培育成愈伤组织b植物组织培养的原理是植物细胞的全能性c培养基中生长素和细胞分裂素的比例会影响脱分化和再分化d植物组织培养过程需要严格的无菌操作答案a解析植物组织培养是将离体的细胞、组织、器官等培育成完整植株，愈伤组织的形成只是脱分化过程。3下列关于植物组织培养中的灭菌操作，错误的是()a外植体可以用酒精消毒b镊子等器械需酒精消毒c操作前手需用酒精消毒d培养基需高压蒸汽灭菌答案b解析植物组织培养需严格的无菌操作，包括：培养基需用高压蒸汽灭菌；操作前手需用酒精消毒；外植体应浸泡在酒精中杀菌；整个操作过程在酒精灯火焰旁进行，同时对镊子等器械灼烧灭菌。4进行植物组织培养的基本流程是()a配制培养基取外植体消毒接种培养移栽栽培b配制培养基取外植体消毒接种栽培移栽培养c配制培养基取外植体消毒接种移栽培养栽培d取外植体消毒配制培养基接种培养移栽栽培答案a解析进行植物组织培养的一般流程是：配制培养基并灭菌，再取植物幼嫩的部分(外植体)并消毒，然后接种到培养基上进行培养，形成愈伤组织后移栽长出试管苗，最后栽种在土壤中。题组二植物激素的应用5下列关于植物组织培养中植物激素使用的说法中，不正确的是()a植物组织培养中的关键性激素是生长素和细胞分裂素b先使用生长素，后使用细胞分裂素，有利于细胞分裂和分化c先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂又分化d同时使用生长素和细胞分裂素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向答案b解析用于植物组织培养的培养基中除营养成分外，还需添加植物激素，一般包括生长素和细胞分裂素；外植体脱分化、再分化的诱导方向取决于二者的比例；先使用生长素，后使用细胞分裂素，有利于细胞分裂，但细胞不分化；先使用细胞分裂素，后使用生长素，对细胞的分裂和分化均有利。6在植物组织培养过程中，生长素用量与细胞分裂素用量的比值高时，下列描述正确的是()a有利于根的分化和芽的形成b不利于根的分化和芽的形成c有利于芽的形成，抑制根的分化d有利于根的分化，抑制芽的形成答案d解析生长素用量与细胞分裂素用量的比值高时，有利于根的分化，抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化，抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的形成。题组三菊花组织培养的实验操作7植物组织培养过程中分化成的幼苗需要移栽，下列关于移栽措施的说法错误的是()a移栽时，应打开培养瓶的封口后马上移植b移栽时，应先将培养瓶的封口打开一段时间，让试管苗在培养间生长几日c移栽时需用流水清洗根部的培养基d幼苗需移植到消过毒的新环境下生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中答案a解析植物组织培养过程中，移栽生根的菊花以前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日，然后用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的草炭土或蛭石中生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中。因此，b、c、d均正确，a错误。8在菊花的组织培养操作完成了34天后，观察同一温室中的外植体，发现有的瓶内外植体正常生长，有的瓶内外植体死亡，你认为外植体死亡的原因不可能是()a接种时培养基灭菌不彻底b接种工具灼烧后未待冷却就接种外植体c愈伤组织形成初期没有给予充足的光照d培养过程中保持温度、ph的适宜，但没有及时调整各种营养物质、激素的比例答案c解析接种时培养基灭菌不彻底，外植体就会受到微生物的污染，从而导致实验前功尽弃，a不符合题意；接种工具灼烧后未待冷却就接种外植体，会导致温度过高而杀死外植体，b不符合题意；愈伤组织形成过程中，细胞还没有开始再分化，没有叶绿素和叶绿体的形成，不可能进行光合作用，因此愈伤组织形成初期不需要充足的光照，c符合题意；培养的不同阶段，对主要营养物质和激素的需求不同，所以培养过程中要及时调整各种营养物质、激素的比例，d不符合题意。9实验中对已长出的健壮丛状苗，应该进行怎样的处理()a移入日光下，在生芽培养基中继续培养b移入日光下，在生根培养基中继续培养c转入黑暗遮阴环境中，在草炭土或蛭石中栽种d转入黑暗遮阴环境中，在80%以上湿度下，在任意自然泥土中栽种答案b解析植物的组织培养过程按照以下流程进行：植物组织丛状苗生根苗幼苗成体，从上述流程不难发现，只有选项b是正确的。10菊花的组织培养需要严格的无菌操作，下列说法不正确的是()a对培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌b幼苗要先移植到消过毒的蛭石或者草炭土等环境下生活一段时间c用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，一旦感染杂菌则前功尽弃d将菊花茎段插入时应注意方向，不应倒插，是为了防止杂菌污染答案d解析植物的组织培养需要严格的无菌操作，将菊花茎段插入时要注意茎段的形态学上下端，不应倒插，是为了生长素的极性运输，保证成活率，d项错误。11四倍体水稻的花药通过无菌操作接入试管，经培养形成试管苗，下列叙述中不正确的是()a用花药离体培养法获得的植株是二倍体b诱导产生愈伤组织的分裂方式为有丝分裂c培养基中应有无机养料、有机养料以及生长素和细胞分裂素d试管苗的生长发育需要光照答案a解析四倍体水稻的花药离体培养获得的是含有2个染色体组的单倍体植株，不能叫做二倍体；花药通过培养诱导产生愈伤组织的分裂方式是有丝分裂，同时，培养过程中要加入无机营养、有机营养、生长素和细胞分裂素等物质；培育成试管苗需通过光照进行光合作用，产生糖类，以满足自身生长需求。12(2017学军中学月考)菊花茎的切段在发芽培养基培养的过程中，有关描述错误的是()a茎的切段不能带有叶片b要始终保持在无菌环境中培养c培养基中苄基腺嘌呤与萘乙酸的比例要较高d茎的切段经过脱分化和再分化可形成丛状苗答案a解析菊花切段接种时，将每段放入1瓶生芽培养基中，每段至少有1张叶片，a错误；植物组织培养在生芽和生根的过程中，要始终保持无菌环境，b正确；生芽培养基中，细胞分裂素类激素的含量高于生长素类激素的含量，在菊花组织培养过程中，细胞分裂素类激素采用的是苄基腺嘌呤，生长素类激素采用的是萘乙酸，故c项正确；茎的切段(外植体)通过脱分化形成愈伤组织，再通过再分化产生胚状体或丛状苗，d正确。题组四综合应用13(2018浙江名校协作体联考) 下图表示菊花的嫩枝离体培养过程，请据图回答下面的问题：(1)若使用自然生长的嫩枝进行组织培养，需将材料放在70%乙醇中浸泡10 min，再放入 中浸泡5 min，然后用另一该溶液浸泡5 min，最后在 中用无菌水清洗。(2)实验中使用的生长素是人工合成的 ，培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值 (填“高”或“低”)时，有利于芽的分化。(3)待生根后，将苗移至草炭土或蛭石中，用玻璃罩或塑料布保持 以上的湿度，23天后打开玻璃罩逐渐降低湿度进行锻炼，直到将罩全部打开处于自然湿度下为止。a8% b30% c60% d80%答案(1)5%naclo(5%次氯酸钠)超净台(2)naa(萘乙酸)低(3)d解析(1)对自然茎段进行消毒时，具体操作为：70%乙醇消毒10 min5%次氯酸钠溶液浸泡5 min另一5%次氯酸钠溶液浸泡5 min在超净台中用无菌水清洗。(2)菊花的嫩枝离体培养过程中，使用的生长素是人工合成的萘乙酸(naa)，生长素和细胞分裂素的比值能够影响菊花茎段的分化，当培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值低时，有利于芽的分化，反之有利于根的分化。(3)待生根后，将苗移至草炭土或蛭石中进行湿度锻炼，先用玻璃罩或塑料布保持80%以上的湿度，23天后打开玻璃罩逐渐降低湿度进行锻炼，直到将罩全部打开处于自然湿度下为止，d项符合题意。14(2017温州适应测试)植物组织培养是一种无性繁殖技术，以下是实验室进行植物组织培养的一般过程。请回答：(1)以下设备及用品中，该实验无需使用的是 。a酒精灯 b灭菌锅c封口膜 d玻璃刮刀(2)培养过程中涉及的培养基有：ms培养基、 、生根培养基。与微生物培养基相比，植物组织培养一般要添加 、 作为生长调节剂。(3)下表所列该实验设备、用品及材料与其灭菌或消毒方法的对应关系中，错误的选项是 。选项对象方法a三角瓶高压蒸汽灭菌b培养基g6玻璃砂漏斗过滤c超净台紫外灯照射d自然生长的茎段70%乙醇和5%次氯酸钠先后浸泡(4)离体组织接种后脱分化形成 ，在不同配比激素的诱导下，依次经历 和生根苗两个阶段，形成试管苗。定植前还需要将试管苗移栽至草炭土或蛭石中继续培养，其目的是 。答案(1)d(2)发芽培养基生长素(或生长素类似物或萘乙酸)细胞分裂素(或细胞分裂素类似物或苄基腺嘌呤)(3)b(4)愈伤组织丛状苗湿度锻炼或炼苗(适应土壤种植)解析(1)在植物组织培养过程中，需要用到酒精灯、灭菌锅、封口膜，玻璃刮刀是在做微生物分离实验时使用的。(2)在植物组织培养过程中，涉及的培养基有：ms培养基、发芽培养基和生根培养基。与微生物培养基相比，植物组织培养一般要添加生长素和细胞分裂素或其类似物作为生长调节剂。(3)三角瓶和培养基都需要进行高压蒸汽灭菌，a正确，b错误；超净台需要用紫外灯照射，c正确；对自然生长的茎段，需要先后用70%乙醇和5%次氯酸钠进行浸泡，最后用无菌水清洗，d正确。(4)外植体经脱分化形成愈伤组织，在不同配比激素的诱导下，依次经历丛状苗和生根苗两个阶段，形成试管苗。定植前还需要将试管苗移栽至草炭土或蛭石中进行湿度锻炼。15(2018暨阳联谊学校联考节选)铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一，用组织培养技术繁殖其幼苗的流程如下：原球茎(类似愈伤组织)新生营养芽 丛状苗幼苗请回答以下问题：(1)选用新生营养芽为培养材料的原因是 ，原球茎细胞的细胞壁 (填“厚”或“薄”)。(2)某小组为研究培养铁皮石斛的培养基中蔗糖和光各自的作用，进行了对照实验，结果如下：培养条件加蔗糖不加蔗糖光正常生长，分化不生长，死亡暗只生长，不分化不生长，死亡根据以上实验结果，下列说法正确的是 。a光为生长提供能量，蔗糖促进细胞分化b整个组培过程中，培养基中都不用加入蔗糖也可发育成幼苗c光照只会影响到光合作用的效率d蔗糖为生长、分化提供能量，光促进细胞分化(3)生物碱属于铁皮石斛的 代谢产物，除了从植株中提取，也可以通过将含有原球茎的试管放在摇床上，通过 悬浮培养分散成单细胞，然后培养特定细胞系实现工业化生产。答案(1)分裂旺盛，全能性容易表达薄(2)d(3)次生液体解析(1)新生的芽幼嫩，分裂能力强，全能性易表达，植物组织培养过程中一般选用新生营养芽为培养材料。原球茎细胞类似愈伤组织，由于愈伤组织是一团未分化的薄壁细胞，因此，原球茎细胞的细胞壁薄。(2)通过对比加蔗糖条件下，有光组能够正常分化，无光组无法发生分化，说明光能促进细胞分化；比较不加蔗糖条件下，有无光照均死亡，说明蔗糖为生长提供能量。若保证组培正常，需要加入蔗糖，故a、b、c错误，d正确。(3)生物碱属于铁皮石斛的次生代谢产物，获取方法可以从植株中提取，也可以通过液体悬浮细胞培养，将愈伤组织(原球茎)分散成单细