补体Cd增强伪狂犬病毒gC基因免疫原性的研究.ppt

补体C3d增强伪狂犬病毒gC基因免疫原性的研究 汇报提纲 文献综述研究的目的 意义研究内容结果与分析结论 补体C3d的分子生物学特性 补体C3d晶体格结构 补体受体CR2晶体格结构 补体受体CR2与C3d结合的晶体格结构 抗原和补体C3d复合物与B细胞表面受体结合示意图 补体C3d的作用机理 伪狂犬病毒gC基因的结构与功能 PrV11种糖蛋白在免疫中的作用 研究内容 1 猪 鼠 羊补体C3d分子cDNA的克隆与序列分析2 补体C3d或受体结合功能区M28对gC基因核酸疫苗的免疫增强作用3 猪源补体C3d的分子免疫增强作用及小鼠动物模型的建立 试验技术路线图 RT PCR扩增 补体C3d分子 重组质粒的构建 动物免疫试验 体液免疫 细胞免疫 结果与分析 猪 鼠 羊补体C3d分子的克隆 ULIRUsTR 小鼠肝细胞总RNA的电泳结果 C3dcDNA的RT PCR扩增 不同物种间C3d氨基酸同源性的比较 鼠 羊补体C3d同源性81 鼠 猪补体C3d同源性82 两种不同形式的系统发育进化树 鼠 猪 羊补体C3d蛋白信号肽分析 鼠 猪 羊补体C3d均无信号肽 鼠 猪 羊的受体结合功能区 重组表达质粒的结构示意图 重组质粒的间接免疫荧光试验 A pcDNA3 1 B sgC C sgC C3d3 D sgC M284 A B D C Westernblotting分析融合蛋白表达 Westernblot检测pcDNA3 1 sgC sgC C3d3 sgC sC3d3和sgC M284在PK 15细胞中的表达 不同免疫组诱导的抗gCELISA抗体检测 鼠源C3d作用 猪源C3d作用 免疫组不同阶段诱导的中和抗体滴度 鼠源补体C3d 猪源补体C3d 各免疫组诱导的淋巴细胞刺激指数 鼠源补体c3d作用 猪源补体c3d作用 免疫组脾细胞IL 4 IFN 水平检测 鼠源补体c3d免疫增强作用 鼠源补体c3d免疫增强作用 攻毒后小鼠的存活情况 鼠源补体C3d 猪源补体C3d 攻毒后各免疫组小鼠的体重变化情况 鼠源补体c3d作用 猪源补体c3d作用 结论 克隆了猪 鼠 羊的补体C3d分子 其中羊补体C3d分子的克隆为首次报道 2 证明gC基因与C3d融合能够显著增强gC基因常规DNA疫苗所诱发的体液免疫水平 调节Th1 Th2免疫反应平衡 提供更强的免疫保护作用 3 补体C3d的受体结合功能区M28可以增强gC基因常规DNA疫苗所诱发的ELISA与中和抗体水平 但是较全长C3d的免疫增强作用略差 4 猪源补体C3d同样可以显著增强gC基因常规DNA疫苗抗体水平 提供更强的免疫保护作用 5 建立了小鼠模型 研究猪源补体C3d分子免疫佐剂作用 TiezhuTong HuiyingFan YadiTan ShaoboXiao JieyuLing HuanchunChen AizhenGuoC3denhancedDNAvaccinationinducedhumoralimmuneresponsetoglycoproteingCofpseudorabiesvirusBiochemicalandBiophysicalResearchCommunications 2004IF 2 904 2 TiezhuTong HuiyingFan YadiTan ShaoboXiao HuanchunChen AizhenGuoImmunogenicityofaPseudorabiesvirusgC C3dfusionproteincontainingaporcinehomologofC3dVaccine submitted 3 TiezhuTong HuiyingFan YadiTan HuanchunChen AizhenGuoC3denhancementofgCglycoproteinimmuneresponseagainstpseudorabiesvirus19thInternationalPigVeterinaryCongress 硕士期间发表文章 硕士期间发表文章 4 HuiyingFan Chunmei Ju TiezhuTong HongliangHuang JiangqiangLv HuanchunChenImmunogenicityofEmptyCapsidsofPorcineCircovirusType2ProducedinInsectCells Veterinaryresearchcommunications5 佟铁铸 樊惠英 谭亚娣 陈焕春 郭爱珍鼠 猪 羊补体C3d