DNA重组的基本工具.ppt

定向基因改造设想 设想一 能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮 能否让细菌 吐出 蚕丝 设想二 能否让微生物产生出人的胰岛素 干扰素等珍贵的药物 设想三 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 什么叫基因工程 P 定向改造生物性状 基因重组 大胆设想 利用转基因技术如何让细菌 吐出 蚕丝 识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列 并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开 1 来源 2 种类 3 作用 4 结果 形成两种末端 一 分子手术刀 限制性核酸内切酶 1 来源 2 种类 限制酶切割DNA后形成的末端 黏性末端 平末端是如何形成的 什么叫黏性末端 判断 图中形成黏性末端的过程形成 个切口 断裂了 个磷酸二酯键 1 2 Sma 平末端平末端 什么叫平末端 P5图1 3 1 要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口 可产生几个黏性 平 末端 个切口 产生 个黏性 平 末端 2 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割 会怎样呢 会产生 的黏性 平 末端 然后让两者的黏性 平 末端黏合起来 就似乎可以合成重组的DNA分子了 思考 2 4 相同 P7思考与探究1 P4寻根问底 二 连接酶 分子缝合针 作用 DNA连接酶的种类 3 与DNA聚合酶作用相同吗 可把黏性末端之间的缝隙 缝合 起来 E coliDNA连接酶或T4DNA连接酶 即恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 T4DNA连接酶还可把平末端之间的缝隙 缝合 起来 但效率较低 T4DNA连接酶 只能将单个核苷酸连接到已有的核酸片段上 形成磷酸二酯键 形成磷酸二酯键 在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键 以一条DNA链为模板 将单个核苷酸通过磷酸二酯键连接成一条互补的DNA链 将DNA双链上的两个缺口同时连接起来 不需要模板 DNA分子复制的过程 1 载体的作用是什么 2 作为载体需要具备什么条件 可以从以下几个方面思考 作为载体没有切割位点将怎样 假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎样 目的基因是否进入受体细胞 你如何察觉 如果载体对受体细胞有害将怎样 3 质粒是什么 三 载体 分子运输车 阅读P6 作业 P6重组DNA分子的模拟制作 材料自备 立意自选 交成品没买课本的下周买来可以买一本教辅资料 新课 例 根据基因工程的有关知识 回答下列问题 1 限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段 其末端类型有 和 2 质粒运载体用EcoR 切割后产生的片段如下 为使运载体与目的基因相连 含有目的基因的DNA除可用EcoR 切割外 还可用另一种限制性内切酶切割 该酶必须具有的特点是 3 按其来源不同 基因工程中所使用的DNA连接酶有两类 即 DNA连接酶和 DNA连接酶 黏性末端 平末端 切割产生的DNA片段末端与EcoR 产生的相同 4 基因工程除质粒外 和 也可做载体 5 请画出质粒被切割形成黏性末端的过程 GGATCC 噬菌体 动植物病毒 2 载体的条件 能自我复制 或能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达 有切割位点有遗传标记基因对受体细胞无害 容易分离比较容易得到 3 常见的载体 1 作用 1 在基因工程中 切割运载体和含有目的基因的DNA片段 需使用 同种限制酶B 两种限制酶同种连接酶D 两种连接酶 A 练习 2 不属于质粒被选为基因运载体的理由是A 能复制 B 有多个限制酶切点C 具有标记基因D 它是环状DNA D 能复制并带着插入的目的基因一起复制 有切割位点 有标记基因的存在 可用含青霉素的培养基鉴别 3 基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的 在