毕业实习报告 (4).doc

精品文档西南科技大学生命科学与工程学院本科毕业生毕业实习报告专业班级： 农学0601 学生姓名： 李 琪 学生学号： 20062869 指导教师： 姚海根 教师职称： 嘉兴市农科院院长、研究院 实习单位： 嘉兴市农科院 报告时间： 2010年6月10日 .毕业实习成绩评定表实习单位指导教师姓名姚海根职 称嘉兴市农科院院长研究员实习单位指导教师技术专长水稻育种专家毕业实习主要内容介绍： 我于2010年3月1日至2010年5月7日，嘉兴市农业科学研究院水稻育种组中实习，实习分了两个阶段进行：2010年3月1日至2010年4月6日在嘉兴市农科所内工作，期间主要进行了水稻花培、分子标记、发芽率和发芽势的测定等实验室工作；在田间进行了栽种水稻的准备工作。与2010年4月7日去海南进行南繁育种，主要进行了除杂、收钟、晒种、分种、杂交脱粒等工作。至2010年5月2日结束南繁育种的工作，于2010年5月3日返回嘉兴进行了米质测定的工作。于2010年5月7日结束实习工作返校。校内指导教师评语：毕业实习成绩评定（百分制）指导教师签字： 年 月 日第1章 嘉兴市农科院简介嘉兴市农科院是浙江省重点试验基地-嘉兴水稻育种实验基地的依托单位。水稻育种是嘉兴市农科院的优势，九五”以来育成水稻新品种24个，获得各级科技成果奖38项（次），其中省科技进步一等奖1项，二等奖1项，市一等奖7项；累计推广稻麦新品种、新技术1亿余亩，社会经济效益约25亿元。所育成的水稻良种继续覆盖浙江、江苏、上海等省市，拥有各种不同的水稻基因型上万份，为项目提供了可靠的材料基础。全院现有高级职称的专业人才12名，博士生3名和硕士生7名。嘉兴市农科院近年来已新建了分子生物学和植物组织培养实验室350多平方米，配有水稻病虫抗性筛选鉴定、米质分析、农化生理、组织培养和生物技术实验等方面的仪器设备，可开展组织培养和一些分子生物学实验。与浙江大学、中科院、中国水稻所等建立了良好的合作关系，与英国、日本等国有关研究机构和国际水稻研究所等建立了良好的国际交际与合作关系。第2章 指导老师姚海根院长简介 姚海根从事水稻遗传与育种研究40多年，目前是浙江省水稻育种重大攻关项目首席专家，先后获全国五一劳动奖章和全国先进工作者、全国优秀科技工作者、全国科普工作先进工作者等荣誉称号及国务院特殊津贴。因为全市同行及姚海根的付出，嘉兴市水稻亩产连续8年超过500公斤，达到国内先进水平。40 多年中，他亲手育成并通过各级审定，在生产上大面积推广应用的水稻品种达68个，累计推广种植面积2.8亿亩，增产粮食达70多亿公斤。1979年，通过利用国外抗稻瘟病种质与嘉兴丰产品种配组，成功培育出他的处女作抗稻瘟病品种“秀水48”，成为浙江新一代当家品种，在重病区增产达20%以上，获农业部技术改进一等奖、浙江省科技进步一等奖。自此，姚海根持之以恒、百折不挠，相继又成功地培育了秀水11、秀水27、秀水04、秀水63、秀水110、嘉花1号共四代晚粳当家品种，又获省科技进步一等奖两个、二等奖四个。 姚海根作为基层科研单位的水稻育种工作者，育成品种之多、覆盖面积之广、应用时间之长、应用成效之大，为国内外农作物育种界所罕见，成为水稻育种史上的一个奇迹，被江浙沪广大农业科技工作者和农民誉为“江南水稻育种大王”。 第3章 毕业实习的主要内容我于2010年3月1日至2010年5月7日在嘉兴市农业科学研究院进行了为期两个月的实习。在实习期间学习到得不仅仅是新知识，新的操作技能，更需要一种艰苦奋斗的精神。用不眠不休来形容这次实习并不过分，两个多月的实习期间只休息了一天，这不仅仅知识我，整个水稻育种组都是如此，这或许就是整个干农学所必须有的精神。这两个月我做过实验室的工作，下过田，晒过种，去海南做过南繁育种。下面我就这两个月所进行的工作进行一个分述。3.1水稻花培刚进农科院恰好在进行花粉组织培养的工作。由于我在校期间进行过无菌操作，所以上手很快。操作采用的是双人单面超净台（该超净台先前只在书本上看过）。在进行操作前先开紫外灯同时喷洒酒精消毒，打开超净台半小时后，消毒完毕就可以进入无菌室了，和一般无菌操作相同，双手进入超净台前先进行酒精消毒。打开酒精灯，镊子在酒精中预消毒后再在酒精灯火焰上进行高温消毒，之后就可以进行操作了，其原料是从海南空运回来的孕穗期的稻杆，先放冰箱冷处理两天，拿出来后剥去外面的稻杆皮，拿出其中的幼穗，不同品种的分类捆扎，挂上标签，然后移入无菌室，进行升汞消毒，后移入超净台，用已消毒的剪刀剪去一半颖壳，注意不能伤及花药，然后把下半部分颖壳剪入已高温灭菌的培养皿中待用。培养基的处理：按要求配好培养基后进行分装，每个试管内倒入1/6容积的培养基，塞上棉花塞，装入灭菌框，在高温灭菌锅内设定122，23min的温度和时间进行高温蒸汽灭菌，灭菌完成后移入无菌室冷却，凝固待用。在超净台上，我们用镊子夹起培养皿中已剪去一半颖壳的稻穗，把里面的花药敲入已处理好的试管内，一支试管内敲入20棵颖壳的花药量，完后用已高温消毒的塑料薄膜封口，在试管上用记号笔注明品种名称、操作日期，操作人员的名字等信息后放入试管框内，移入培养室（暗室）。这样，花培第一步操作完成，虽然看上去很简单，但由于基数庞大，需要做一万多个试管，所以工作量也很大，同时，要时刻注意无菌的环境，以防带入杂菌，导致实验的失败，所以工作也很花精力，也相当单调，耳朵里充斥的满是叮叮当当的敲击声，脑子里绷紧的是防杂菌的那根弦，看上去容易的重复也变得不那么简单。而酒精对双手的腐蚀作用也在几周后慢慢显现。虽然在做了其他工作后回想起来这是最轻松的工作。在暗室恒温培养大约一个月左右，愈伤组织就可以长出，挑出愈伤组织长得大一点的试管放在光照培养室让其长出绿苗，同时挑出已污染的试管，这个工作要持续进行，直到所有的试管都被挑出。在光照培养室内长得大一点的绿苗移至锥形瓶中，继续培养直至移栽到大田。整个花培过程就是如此，由于时间有限，我只进行了第一、第二步的操作，期间对整个操作过程有了初步的了解，对于一个只是在书本上学习过的知识，通过实践对其有了更为深刻的认识。原先以为这已经是很高技术含量的事情了，实际操作后感觉也不过如此，听说此技术早已成熟，也感叹，是不是我们学的知识也已经落伍了。3.2 分子标记 如果说花培我还能马上上手的话，那么做分子标记我只能试着充当一个助手。 分子标记也是分几个步骤进行的：粉碎叶片，提取DNA，进行PCR扩增，电泳。 粉碎叶片：先把叶片放在液氮里冷却，再用电钻碾磨，其实也就这么简单，但就液氮-196的超低温来说就具有一定的危险性，也是我到目前为止接触到得最低温。原本以为液氮一接触到空气就马上汽化，蒸发干净了，其实不是的，我把液氮从储氮罐中倒入保温瓶中，液氮在保温瓶中就如同水沸腾一样，但能在保温瓶中以液氮的形式保存很长时间。当把水稻叶片放入其中，就好比把烧红的铁放入水中的效果一样，液氮猛烈的沸腾，然后平静。无色无味的液氮除了超低温其它的也便和水没啥两样。 提取DNA：其步骤也很固定，在粉碎的叶片中加入提取液，水浴加热，离心上清液加酒精，再离心取其沉淀，该沉淀就是所需的DNA，沉在离心管底，很小的一块。 PCR扩增：在上步提取出来的DNA沉淀中加入实验所需的底物、酶，放在PCR仪中设定好程序后进行DNA扩增，后拿出备用。这两步虽然步骤固定，但由于品种多，数量大，步骤繁琐，所以要注意不要弄错。 电泳：最后一步也就是电泳的过程，用特制的琼脂，加电解液加热溶解，溶解完后加一滴EB。EB分子能和DNA相结合起到荧光显色作用，同时EB有着极其恐怖的致癌能力，实验室都区分污染区和非污染区，在具体操作的时候需要戴双层塑料手套，同时注意不要吸入加热蒸发出来的水汽。如此小心也是为了确保安全，当琼脂溶液冷却至4050的时候就可以做凝胶了，做两排电泳孔的凝胶，做完，冷却凝固后放入电泳槽。在扩增后的DNA溶液内分别点入染色剂，后加入凝胶孔内，打开开关，两端加上电压进行电泳。电泳完成后在紫外显色条件下拍摄条带，子代与亲对照以确定其特定基因是否导入子代。通过分子标记就可以在子代中快速挑选出所需的基因型，这样就加快了育种的速度，当现代科技融入传统育种中，的确能产生全新的变化，演化出全新的育种方法。3.4 南繁育种 我于2010年4月7日从上海浦东机场坐飞机到三亚凤凰机场，到海南都已经是午夜时分，但外界气温还是有27，有种瞬间入夏的感觉，看他们接机的都穿的短袖，短裤的，而自己一身春装，反差真的很大。在路上随处都可以见到椰子树，真觉得自己进入了异国他乡。坐车来到嘉兴市农科所南繁基地所在地陵水黎族自治区。到那安排好住所，便睡下了。第二天7点醒来，开始了在海南南繁的工作。 3.4.1除杂：在海南南繁除了优质品种的繁种外就是做的杂交育种试验。第一天刚去，姚海明师傅就带我参观，并解说了整个试验田的基本情况。在小小的30亩地里，有杂交育种区，繁种区，还有水稻花培后出来的花培苗也种在这里，更有国内最新的研究成果BT转基因水稻的育种区，用高大的塑料膜隔离开来，目的是为了防止人工导入的BT基因的漂移。我在海南第一项工作就是除杂，由于杂交育种过程中对水稻品种的纯度要求很高，在实际操作过程中，种子的净度不可能达到100%，所以在田间的除杂工作就在所难免，这也是育种中保持杂种一代净度的最有效的方法，因为一颗有杂稻，影响的将会是一片种子的净度，所以在操作过程中遇到一颗杂稻就要除去旁边一大圈的稻子。以上是杂交育种里的除杂工作。在繁种区就简单多了，由于自花授粉的多，看见一颗杂珠除一颗就可以了。我本着宁可错杀一千不可放过一个的指导思想，除杂就这样开始进行了。拿着镰刀，带着草帽整天在地里晃悠，两个人跑3遍，这个除杂工作就差不多了。 3.4.2收钟：收种是整个实习中感觉最累的活了，由于都是小品种，收种的时候不可能拿个收割机来割，这样会导致品种的混杂，所以都是人工收种，顶着个大太阳，草帽是最好的防晒工具，和雇佣的海南人一起割稻，打稻，还蛮锻炼人的，这是个持续性的工作，一行8人，一天能打1亩半的稻，也算是不错了，打累了，休息的时候还有老革命摘来的椰子喝，感觉一个椰子能抵一瓶2升矿泉水的水量，现在想来当时也确实很渴了，一口气就把一个椰子水给喝完了，蛮撑的，不过，的确解渴。繁种量最大的是134，不过花了两天时间完成了对134品种的收种工作。 3.4.3晒种：收种收完接下来就是晒种的工作，其实也就是在场地上把种子铺开，晒一下，要是天气好的话就容易。但是晒种的那几天天天气时好时坏的，遇到下雨时得把晒场上的种子集中到一起，再用彩条布盖好，防水。等雨过，场地干了再晒出来。就这样断断续续的，把收上来的种子全部晒干入库。 3.4.4分种：为了回来做米质测定，稻瘟病、稻飞虱等抗病虫害测定，小区测定等一系列工作。就需要对不同的品种进行取样，一般就是一个品种取样装一个牛皮带然后写上品种名称。装订好，以便带回嘉兴。由于品种很多，这工作也是做了很久才完成，最后几天装箱的时候装了8个中号的邮箱。 3.4.5杂交脱粒：做杂交脱粒的活还是相对轻松的。在有空闲的时候，比如说下雨的时候、晚上看电视的时候都可以脱粒，脱粒的目的是为了提高后期的出芽率。也就间接提高了杂交的成功率。 我们与2010年5月2日晚从三亚凤凰机场飞到杭州萧山机场，这次还随机带回来点芒果、木瓜，那边的水果比这儿的甜很多，也难得去一趟，带回来让家人也尝尝鲜。等我回到家的时候都3号凌晨3点多了，匆匆洗个澡就睡了。没睡几个小时又去单位进行卸货的工作，忙完了，接下来就是米质测定的工作了。3.5米质测定米质测定我从4号开始着手做到7号，时间也不是很长，也只是初步的了解了一下过程，也就是碾磨，记录米质外观，加KOH恒温放置半天，进行糊化，观测糊化结果，还要加碘测直链淀粉含量。基本上这些就是我所知道的米质测定的过程，由于品种多，米质测定要重复进行很久才能完成。第4章 实习的体会通过这段期间的实习虽然苦，虽然累，但我的受益匪浅。凡是都要踏踏实实的做，厚积才能勃发。做农学这一行，特别是育种的，就是整天和土地打交道，育种的前提是栽培，如果你水稻都种不好，何谈什么育种。特别是在海南的那段日子，姚院长给了我很多的指导，也教了我许多做人的道理，勤和俭是他一直教导我的。的确，他们那一代人经历的已经太多太多了，要我们向他们学习的也太多太多了。他现已经67了，还和我们一样下田，烈日当空的时候还在选种，试问现在还有多少人能够做到。当下，他选