胃癌的HER检测

胃癌的HER2检测,胃癌的HER2检测,胃癌和HER2胃癌中的HER2表达ToGA 研究胃癌HER2检测方法推荐,胃癌和HER2,1 = 基因拷贝数2 = mRNA 转录3 = 细胞表面受体蛋白表达4 = 细胞外受体功能域释放,A = HER2 DNAB = HER2 信使RNAC = HER2 受体蛋白,正常,过度表达/扩增,细胞核,细胞质,细胞膜,1,2,3,4,C,B,A,HER2阳性的细胞存在于身体各处,大部分研究认为：胃癌中HER2过表达可提示差的预后。Yonemura Y, et al. Cancer Res 1991; 51: 10341038: 260例胃癌中研究发现，HER2表达与肿瘤大小、浆膜面浸润、淋巴结转移相关。Uchino S, et al. Cancer 1993; 72: 31793184. 108例胃癌中研究发现，HER2过表达与差的10年生存率相关。 Mizutani T, et al. cancer. Cancer 1993; 72: 20832088. 226例胃癌中研究发现，HER2阳性的早期胃癌患者预后显著差于阴性者。 Nakajima M, et al. Cancer 1999; 85: 18941902. 在早期胃癌中，HER2过表达是仅次于淋巴结状态的提示预后差的第二大指标。,胃癌中HER2的表达与预后,胃癌中HER2的表达与预后,Ross JS, McKenna BJ. Cancer Investigation 2001; 19: 554-568. HER2基因与胃肠道肿瘤：在中晚期胃腺癌中可提示差的预后 Tanner M, Hollmen M, Junttila TT et al. Annals Oncol. 2005; 16: 273-278. 胃癌中的HER2扩增与肠型，差的预后以及对赫赛汀敏感性的研究Charoin JE, Jacqmin P, Banken L et al. Abstract, Population Approach Group (PAGE) 2004, Uppsala. 含赫赛汀的治疗方案的长期性观察研究Allgayer H, Babic R, Gruetzner KU, et al. J Clin Oncol; 2000; 18:2201-2209. HER2是独立的胃癌预测因子,芬兰研究-131患者HER2扩增情况与OS(总生存率)的关系,Month,Tanner, et al. Annals of Oncology 16: 273278, 2005,CISH检测,德国研究-全部189例患者HER2表达与DFS(无病生存率)的关系,0,1,2,3:IHC检测,Heike Allgayer, et al. Journal of Clinical Oncology, Vol 18, No 11 (June), 2000: pp 2201-2209,德国研究-139例R0根治的患者HER2表达与OS(总生存率)的关系,0,1,2,3:IHC检测,Heike Allgayer, et al. Journal of Clinical Oncology, Vol 18, No 11 (June), 2000: pp 2201-2209,胃癌中HER2的表达,Hofmann M, Stoss O, Shi D, et al. Histopathology. 2008 Jun;52(7):797-805.,胃癌中HER2的表达：IHC,Hofmann M, Stoss O, Shi D, et al. Histopathology. 2008 Jun;52(7):797-805.,胃癌中HER2的表达：FISH/CISH,胃癌中HER2表达的阳性率：IHC：阳性率报道集中在10-40%，平均近20%FISH/CISH：阳性率道集中在10-40%，平均近20%ToGA研究中的阳性率 22.1%,胃癌中HER2的表达,ToGA 研究,ToGA 研究,全球例数最多的HER2检测研究 3807例覆盖24个国家赫赛汀三期临床研究第一个大型的生物靶向药物胃癌研究中国筛选病人614例，15家医院,由于胃癌和乳腺癌病理组织染色方面的区别 (如肿瘤异质性高, 因蛋白水解活性增加导致蛋白降解增加，及HER2受体对IHC亲和性较差等)，在ToGA研究中同时使用IHC和FISH检测，这也使研究者获得了关于蛋白过表达和基因扩增的完整的信息。,ToGA中HER2检测方法,ToGA 研究的设计,HER2-阳性晚期胃癌患者 (n=584),5-FU 或 卡培他滨a + 顺铂(n=290),R,5-FU 或 卡培他滨a + 顺铂+ 赫赛汀(n=294),全球、多中心、随机、开放III期临床研究,1Bang et al; Abstract 4556, ASCO 2009,3807 位患者接受筛选1 810 HER2-阳性 (22.1%),HER2检测：进行IHC 和 FISH,ToGA中HER2 阳性的定义,ToGA研究同时用IHC和FISH对入组病人进行筛选，有一项阳性即可入组。IHC检测-3+表示阳性;FISH检测-HER2:CEP17扩增2表示阳性。 研究中3667例病人成功进行了IHC和FISH检测，并根据以上标准分为以下五个亚组： IHC 0/FISH+IHC 1+/FISH+IHC 2+/FISH+IHC 3+/FISH+IHC 3+/FISH 或未知,Bang YJ, et al. J Clin Oncol 2009; 27:Abstract 4556.,ToGA 中HER2 筛选 : 最终结果,IHC和FISH HER2检测结果 (n=3280),2519 例IHC 0/1+ 病例中: 7.5% FISH+761例IHC 2+/3+ 病例中: 74.4% FISH+,HER2检测成功的病人,Bang YJ, et al. J Clin Oncol 2009; 27:Abstract 4556.,ToGA 3667例 HER2检测成功的病例中， 810 例 HER2阳性 (22%)610 例 HER2 蛋白高表达 (16%)594 例符合ToGA入选标准，随即分组入ToGA,HER2阳性的病例 (n=810),Bang YJ, et al. J Clin Oncol 2009; 27:Abstract 4556.,不同国家的HER2 阳性率,胃食管结合部的HER2阳性率更高,肠型的HER2阳性率更高,手术标本和胃镜标本HER2阳性率相当,赫赛汀可延长生存-主要研究终点: OS（总生存）,时间 (月),294290,277266,246223,209185,173143,147117,11390,9064,7147,5632,4324,3016,2114,137,126,65,40,10,00,处于风险的患者数,11.1,13.8,0.0,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,0.7,0.8,0.9,1.0,0,2,4,6,8,10,12,14,16,18,20,22,24,26,28,30,32,34,36,事件,FC + T,FC,事件167182,HR0.74,95% CI0.60, 0.91,p 值0.0046,中位OS13.811.1,T, 赫赛汀,第一个生存超过12个月的研究,亚组,中位 OS (月),全部,11.1 vs 13.8,初步分析,IHC 0 / FISH+IHC 1+ / FISH+IHC 2+ / FISH+IHC 3+ / FISH+IHC 3+ / FISH,7.2 vs 10.610.2 vs 8.710.8 vs 12.312.3 vs 17.917.7 vs 17.5,探索性分析,IHC 0 or 1+ / FISH+IHC 2+ / FISH+ or IHC 3+,8.7 vs 10.011.8 vs 16.0,0.2,0.4,0.6,1,2,3,4,5,0.921.240.750.580.83,0.48, 1.760.70, 2.200.51, 1.110.41, 0.810.20, 3.38,HR,95% CI,0.74,0.60, 0.91,1.070.65,0.70, 1.620.51, 0.83,相对危险度,倾向赫赛汀,倾向无赫赛汀,584,617015925615,131446,N,根据 HER2状态决定治疗的效果评价, p=0.0368,van Cutsem E, et al. J Clin Oncol 2009; 27:Abstract 4509.,HER2 状态对OS的影响,IHC 2+/FISH+ 或IHC 3+ 病人获益更多,1.0,0.8,0.6,0.4,0.2,0.0,36,34,32,30,28,26,24,22,20,18,16,14,12,10,8,6,4,2,0,11.8,16.0,FC + T,FC,Events120136,HR0.65,95% CI0.51, 0.83,中位OS16.011.8 4.2,0.1,0.3,0.5,0.7,0.9,月,113,218198,40,53,124,2011,228218,196170,170141,142112,12296,10075,8453,6539,5128,10,00,3920,2813,高危病人,生存率,探索性分析,van Cutsem E, et al. J Clin Oncol 2009; 27:Abstract 4509.,赫赛汀增强了肿瘤对药物的敏感性- 肿瘤缓解率,2.4%,5.4%,32.1%,41.8%,34.5%,47.3%,意向治疗人群（ITT）,总缓解率(ORR)=完全缓解率(CR)+部分缓解率(PR),p=0.0599,p=0.0145,F+C + 赫赛汀,F+C,p=0.0017,患者数 (%),CR,PR,ORR,赫赛汀联合化疗治疗 HER2阳性进展性胃癌/胃食管交界癌,赫赛汀是第一个使病人生存获益的生物靶向制剂,ToGA 研究,HER2状态有必要整合到胃癌患者诊断和治疗中去,胃癌HER2检测方法推荐,始于1986年：Sakai K, et al. J Natl Cancer Inst 1986; 77: 104752.90年代，使用多克隆抗体，阳性率为9-38%： Yonemura Y, et al. Cancer Res 1991; 51: 10341038.Ishida T, et al. Scand J Immunol 1994; 39: 459466.Tokunaga A, et al. Cancer 1995;75: 14181425.近年来，使用单克隆抗体(eg, HercepTest) ，阳性率集中在10-40%，平均近20%。,胃癌中HER2表达的检测方法：IHC,近年来开展了CISH和FISH的方法：,胃癌中HER2表达的检测方法：CISH/FISH,IHC与FISH/CISH检测符合率较高,Liang Z et al. BMC Cancer 2008, 8:363,IHC仍可能作为HER2相关靶向治疗的患者初步筛选检查。,中华消化杂志 2006年 第26卷 第10期,前瞻性研究中HER-2/neu蛋白CISH和IHC检测结果符合率为89.2%。,中国的研究-O485试剂盒检测胃癌中HER2的表达,中华消化杂志 2006年 第26卷 第10期,回顾性研究中HER-2/neu蛋白CISH和IHC检测结果符合率为77.0%。,中国的研究-O485试剂盒检测胃癌中HER2的表达,汇总后HER-2/neu蛋白CISH和IHC检测结果符合率为77.0%。,胃癌中HER-2/neu基因扩增和蛋白表达的多中心研究. 中华消化杂志, 2006, 6(10):657-660.,中国的研究-O485试剂盒检测胃癌中HER2的表达,回顾性、前瞻性研究及汇总后总病例中HER2 IHC评分+的病例CISH基因扩增符合率均90%。,中国的研究-O485试剂盒检测胃癌中HER2的表达,目前尚无公认统一的针对胃癌建立的HER2 IHC阳性评判标准,胃癌HER2免疫组化评分标准的初步探讨,ToGA研究评分标准来源,（一）材料与方法,病例：不同种族人群的168例 胃癌或食道胃交界腺癌手术标本组织学采用Lauren分型,（一）材料与方法,标本：中性福尔马林固定，石蜡包埋IHC： HercepTest（DAKO）判断标准：参照乳腺癌，DAKO, 10%FISH：HER2 FISH pharmDx (DAKO)判断标准：参照乳腺癌， DAKO, HER2/CEP172%,（二）结果分析,IHC和FISH 符合率达93.5%，与乳腺癌的相应符合率（82-100%）接近,11例FISH+/IHC 0-2+ 病例分析按HER2染色强度、膜染色完整性和被染色细胞的比例分别分析所有病例的IHC结果，并与FISH对照列表肿瘤异质性（染色细胞比例）？基底侧面型表达（不完整膜阳性）？,肿瘤异质性,胃腺癌肿瘤异质性(4.8%)： 比乳腺癌更常见(1.4%)对胃镜活检标本可能的影响强阳性细胞比例10%是否视为IHC3+？,肠型,印戒细胞型,高度扩增,不扩增,胃癌中肿瘤异质性更常见,基底侧面型表达,部分胃癌，尤其低级别者，仍可见腺上皮的极性分布，腔面的瘤细胞保留分泌功能而不被标记染色，形成U型（基底和侧面）不完整膜染色胃癌腺腔形成更多见，故此现象比乳腺癌多见此型表达是否应相当于乳腺癌的完整膜阳性？,用IHC法处理腺癌细胞，膜染色不完全,乳腺癌与胃癌HER2检测的不同点,由于胃癌及乳腺癌病理组织的差别，对胃癌HER2的评分系统需要进行修正,胃癌中肿瘤异质性更常见,用IHC法处理腺癌细胞，外膜染色不完全,Hofmann M, et al. Histopathology 2008; 52:797805.,（三）结论,HER2的乳腺癌IHC评分标准基本可用于胃腺癌的评判，但鉴于肿瘤异质性和分化好的腺腔结构导致HER2不完整膜表达在胃癌更常见，故需作适当调整。,图片来自 TARGOS,IHC 阴性 (0)不染色或 10% 的细胞膜染色较浅或仅有部分膜染色,IHC 可疑 (2+)10%的细胞膜或外膜轻到中度染色,IHC 阳性 (3+)在以下细胞膜或外膜中高度染色切除标本中10% 的细胞IHC 3+ 的活检标本,胃癌HER2 的IHC评分标准（推荐）,ToGA 研究中54.6% FISH阳性,胃癌HER2 的IHC评分标准（推荐）,与乳腺癌不同，在