临床耐多粘菌素CRE菌株的分子流行病学研究

临床耐多粘菌素CRE菌株的分子流行病学研究杜 鸿,2016年8月19日,Superbug：超级细菌,MRSA,碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌 （carbapenem-resistant Enterobacteriaceae，CRE）,Superbug：超级细菌,Superbug：超级细菌,一位49岁的妇女2016年4月因尿路感染症状在宾夕法尼亚州的部队医院求医，分离到一种能够抵抗多种药物的大肠杆菌菌株，携带有15种不同的耐药基因，集中在两种能在细菌之间轻松移动的质粒上。一个质粒含有CTX-M型超广谱 -内酰胺酶；另外一个就是含有新发现的可怕的mcr-1基因（导致多粘菌素抗药性的基因）。,Superbug：超级细菌,美国现首例“超级细菌”全球无任何抗生素可治！,Colistin Resistance,1、多粘菌素之所以能坚挺到现在，是由于它从抗生素早期开始就是一种毒性药物，由于副作用的缘故而很少被列入处方之中；正因为其很少被使用，细菌才没能适应它。2、在此之前，许多细菌已经能够耐受几乎所有的抗生素，而多粘菌素则是我们最后的防线。3、而MCR-1之所以这么麻烦，是因为它为细菌提供了抵抗多粘菌素的能力。,1、 Walter Reed陆军研究所的Patrick 和Walter Reed国家军事医疗中心的Kurt 在报告中表示，这项发现“预示着真正的泛耐药病原菌即将出现” 。2、“我们有身处后抗生素世界的风险”， 美国疾病控制和预防中心(CDC)主任弗里登(Tom Frieden) 。3、美国疾控中心人畜共患传染病研究部门主任Beth Bell表示，疾控中心已经开始与宾夕法尼亚卫生局合作研究：“这位女士是如何携带上这种有着高度耐药性的细菌？”4、宾夕法尼亚州州长Tom Wolf声明确认了这起病例，以及疾控中心参与联合调查一事。,7,1 Hancock RE, Scott MG. The role of antimicrobial peptides in animal defenses. Proc Natl Acad Sci USA, 2000, 97: 8856-8861.,细菌对多粘菌素耐受的传统机制,细菌对多粘菌素耐受的传统机制,Emergence of plasmid-mediated colistin resistancemechanism MCR-1 in animals and human beings in China,very serious phenomenon that occurs nowadays,Super-superbug,Emergence of the mcr-1 colistin resistance gene in carbapenem-resistant Enterobacteriaceae（CRE),?,一、有没有耐多粘菌素的肠杆菌科细菌？,二、如有耐受菌是否同时又是CRE菌株？,三、菌株是否保存？,CRE (碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌)+mcr-1的研究,CRE+mcr-1的研究,对我院（苏州大学附属第二医院）2011-2015 年的多粘菌素耐受菌株进行了调查分析，发现： 1、有4株分离自住院病人的肠杆菌科细菌携带MCR-1质粒，其中2株为MCR-1质粒整合与含NDM-5 (New Delhi metallo-lactamase-5) 质粒的CRE菌株； 2、 整合MCR-1质粒的CRE菌株表现出对包括多粘菌素、亚胺培南、美洛培南在内的几乎所有抗菌药物均耐药，感染该菌株的患者最终由于抗生素治疗无效而导致死亡。,质粒接合转移试验,大肠埃希菌J53AZ-R,SZ03,SZ04,+NaN3,+多粘菌素,37,过夜,单菌落,SZ03,SZ04,大肠埃希菌J53AZ-R,(1ml)LB+NaN3,(1ml)LB+多粘菌素,鉴定,成功获得mcr-1的转移结合子，证实了 MCR-1 质粒能够水平转移至受体菌。,PCR质粒复制子分型：MCR-1质粒为IncI2和IncX4,中科院JCR分区：一区影响因子：22.433,相关评论,17,调查分析中国CRE菌株携带多粘菌素抗性基因mcr-1的临床现状,中美CRE合作团队,1、高CRE流行地区（北部：北京；东部：苏州；南部：广州）2、低流行地区（西北：银川和西南：成都）3、边境地区的云南省昆明市。云南与缅甸、老挝、越南接壤，又靠近印度和孟加拉国（NDM高发病率）。,6家三甲附属医院,美国Rutgers大学公共卫生研究院Kreiswirth教授,纽约斯隆凯特林纪念医院汤一苇教授,中美CRE合作团队,20,菌株来源,菌株来自20142015年中国北部（北京）、东部（苏州）、南部（广州）、西北部（银川）、西南部（成都和昆明）的6家三甲医院 ，共264株。,21,CRE菌株耐药基因分析,表达mcr-1基因的CRE菌株有3株大肠杆菌(CDA6, BJ10, BJ13)、2株肺炎克雷伯菌(SZ03, SZ04),MCR-1菌株多位点序列分型（MLST）,肺炎克雷伯菌管家基因(rpoB,gapA,mdh,pgi,phoE,infB,tonB),大肠杆菌管家基因(adk,fumC,gyrB,icd,mdh,purA,recA),23,CRE+MCR-1菌株,1、这种耐多粘菌素的MCR-1质粒蔓延到了CRE菌株，产生泛耐药株，提示我国CRE菌株的耐药现状异常严峻，若想打赢抗生素耐药性这场仗，就迫切需要更好