【毕业学位论文】（Word原稿）雌雄银杏根、茎、叶的显微观察-药学

毕 业 论 文 （本科生） 中文标题 雌雄银杏根、茎、叶的显微观察 英文标题 学生姓名 高庆剑 指导教师 马志刚 学 院 药学院 专 业 药学 年 级 2007 级 兰州大学教务处 高庆剑：雌雄银杏的根、茎、叶 诚信责任书 本人郑重声明：本人所呈交的毕业 论文（设计） ，是在导师的指导下独立进行研究所取得的成果。毕业 论文（设计） 中凡引用他人已经发表或未发表的成果、数据、观点等，均已明确注明出处。除文中已经注明引用的内容外，不包 含任何其他个人或集体已经发表或在网上发表的论文。 特此声明。 论文作者签名： 日 期： 高庆剑：雌雄银杏的根、茎、叶 1 目录 摘要 . 1 英文摘要 . 2 第一章 前言 . 3 1 银杏概况 . 3 银杏 . 3 银杏 . 3 银杏 . 3 银杏 . 3 银杏 . 4 银杏 . 4 银杏 . 4 银杏 . 4 2 甘肃银杏的资源调查和雌、雄银杏植物体形态学区别及意义 . 4 资源调查 . 4 雌、雄银杏植物体形态学区别 . 5 树枝的形态区别 . 5 树形区别 . 5 叶片形状的区别 . 5 3 本课题的重要意义 . 5 第二章 实验部分 . 6 1 实验材料、仪器、试剂 . 6 实验材料 . 6 仪器 . 6 试剂 . 6 2 实验方法 . 6 第三章 实验结果及结论 . 7 1 雌银杏 . 7 雌银杏根 . 7 雌银杏茎 . 7 雌银杏叶 . 8 2 雄银杏 . 9 雄银杏根 . 9 雄银杏茎 . 9 雄银杏叶 . 9 3 雌雄银杏的比较 . 10 4 小结与讨论 . 11 草酸钙簇晶 . 11 分泌腔 . 11 参考文献 . 12 致谢 . 13 高庆剑：雌雄银杏的 根、茎、叶 1 雌雄银杏的根、茎、叶的显微观察 学生： 高庆剑 指导老师 :马志刚教授 （兰州大学药学院，甘肃 兰州 730000） 摘要： 目的：通过观察 雌雄银杏根、茎、叶的显微构造，比较雌雄显微结构的不同之处。方法 : 应用来源、性状、显微及理化鉴别等方法。结果：雌雄银杏根茎叶的显微结构有所差别，详细描述了其横切片显微特征。 结论：雌雄银杏的根、茎、叶有所差别，实验结果为该药的鉴别、开发利用及补充生药学资料提供参考依据。 关键词 : 根；茎；叶；显微特征；区别 高庆剑：雌雄银杏的 根、茎、叶 2 730000) o of of he of he a of of be 高庆剑：雌雄银杏的 根、茎、叶 3 第一章 前 言 1 银杏概况 银杏 (.)又名公孙树、平仲树、白果树，雌雄异株植物，落叶乔木， 是裸子植物门银杏纲银杏科银杏属植物，为我国稀有的珍贵树种 。银杏树 5 月开花， 10 月成熟，果实为橙 黄色核果。银杏属于现存裸子植物中最古老的孑遗植物之一。银杏姿态优美，苗体高大，是非常理想的园林绿化、景观园林树种，与松、柏、槐并列为中国四大长寿观赏树种。 杏 银杏树为落叶乔木，高约 40m，直径可至 4m，幼年树皮较平滑，大树之皮呈灰褐色，有长枝与发育缓慢的距状短枝，无规则纵裂。寿命很长，可达千余年，生长比较慢。银杏树高大挺拔，叶似扇形，叶形古雅，是著名的无公害树种。 杏 银杏最早出现于大约 炭纪 ，与动物界的 恐龙 一样，称霸于世。大约在50万年前，发生了第四纪 冰川运动 ，导致地球骤冷，绝大多数的银杏类植物濒于绝种，只有在中国奇迹般的保留下来。所以被称之为“植物界的熊猫”、“活化石”。至今，只有在我国的四川、浙江、云南等少数省份还保留着少量幸存的的银杏树，因此可以说 :“银杏起源于中国” 1,2。 杏 - 观赏价值 银杏具有很好的观赏价值，银杏树干通直，造型独特，春夏翠绿，深秋金黄，姿态优美，给人以华贵典雅、俊俏雄奇之感。银杏树是著名的长寿树种，银杏树制作的银杏盆景，具有很高的经济价值和观赏价值。银杏盆景干粗、根露、枝曲、古特幽雅、妙趣横生，是中国盆景中的一绝。 杏 - 经济价值 银杏是中国特有而丰富的植物经济资源。随着银杏研究的不断深入 和研究 范围的扩大，又发现 了 银杏叶 的 提取物还具有改善、增强记忆力、减肥、抗衰老美容、补充体内各种维生素等保健功效 。 由于 在 银 杏叶中 ，有 些活性成分具有 特殊 的调节功能 和 生理作用，世界上 许多 国家把银杏叶 的 制剂开发 作为 重点 ，逐渐 从药用 的 研究 范畴 扩展到保健、 食品 高庆剑：雌雄银杏的 根、茎、叶 4 添加剂 等方面， 而 且己经取得了 大量的 重要成果 3。 杏 - 生态价值 据科学测定，银杏是抗城市中大气污染能力最强的第二类树种。银杏的枝和叶富含水分， 树皮 具有栓质层，不容易燃烧，所以具有 较强的抗火烧能力。由于银杏树冠较大且荫浓，夏季的降温效果非常好。而且，银杏在生长季节夏季时，在银杏树附近， 苍蝇 、 蚊子明显减少。 杏 - 地区分布 银杏在 中国 、 日本 、 美国 、 朝鲜 、 加拿大 、 韩国 等国家和地 区都有大量分布。 银杏主要分布于中国的亚热带和 温带 的气候区内，边缘分布为“东至浙江省的舟山普陀岛，西抵西藏自治区的昌都，南达广东省的广州，东南到台湾省的南投，北至辽宁省的沈阳”，遍及中国的 3 个直辖市和 22 个省（自治区）。 杏 - 食用价值 银杏又称白果，属 干果 类。中国白果约占世界总产量的 90%，银杏的叶和果是出口创汇的重要材料，特别是在防治 高血压 、 心脏病 等方面，是重要的医药原料。银杏叶提取物可以“捍卫心脏，保护大脑”，同时，还用于预防和治疗老年性反应迟钝、动作缓慢、老年痴呆等作用 4。银杏果中的营养非常丰富，极具天然的保健作用，长期食用就 能达到延年益寿、延缓衰老的作用，在宋代被列为皇家贡品。 杏 - 药用价值 银杏的药用价值主要表现在医药、农药和兽药 3 个方面。明代李时珍在著作本才纲目中说：“银杏气薄、味厚，益肥气，定咳嗽，缩小便，又能杀虫消暑” 5。我国的清代学者张璐璐在本经逢源中记载，由于白果有降痰、杀菌清毒、杀虫的功能，因而可将其用于治疗“疮疥疽瘤、牙齿虫龋、乳痈溃烂、赤白带下、小儿腹泻、慢性淋浊、遗精遗尿 等症” 6。 2 甘肃银杏的资源调查和 雌、雄银杏植物体形态学区别 源调查 银杏是我国特有的珍稀树种 ， 雌雄异株 ，是 全球最古老的孑遗植物 之一。 自然界 的 被 高庆剑：雌雄银杏的 根、茎、叶 5 子植物多 数 是雌雄同株，雌雄异株的植物 只 占 约 6%7，雌雄不同的同种植物 通常具 有不同的利用价值， 许多 药用植物 的 雌雄植株在药用 有效 成分 的 含量上有很大 的 区别 7,8。银杏具有药用、营养及保健功能 ， 也是园林绿化、行道、防风林带、田间林网的理想种植树种。由于银杏 叶可 以 吸收空气中的粉尘和有毒气体， 能够 提供 良 好的大气环境 ，而且银杏的树干虬曲、葱郁庄重 ，因此银杏树成为 街道树的最佳选择 。 、雄银杏植物体形态学区别 本课题 在银杏异株的差异方面做了 相关的 文献研究 ，且在 当地做了 一些 观察， 希望在种植 银杏的早期 ，可以 采用 相对较 简单的方法鉴别雌 、 雄 ，能为 合理的 银杏 栽培布局 和银杏 叶 的用料 资源 选择 提供一定的参考 依据。 根据当地 的 考察 和相关 文献查阅，总结了雌、雄 银杏之 间的一些鉴别方法，如下 : 枝的形态区别 雌株 的 主枝与主干的夹角相对较大，可达 50 度 左右 ，向四周 方向 扩展生长，生长态势相对于雄株处于劣势，短枝 由于 连年 的 开花结果， 因 重力所压等 作用 导致枝条延伸 的 相对较长 ，同时 弧度较大 9； 雄株 的 成龄树，主枝与主干夹角 约 30 度，长势凶猛，挺直 ，短枝相对较短，一般仅 为 1 形区别 雄株 分布于 雌株同龄树之间，雌株比雄株相对矮小， 多半 雌株的树 形是 广卵圆形， 因常年挂果 而 造成树枝下垂 ;雄株形成树冠 的 时间相对雌株 稍 早一些，树枝 较 多而密乱， 切多数 是 塔形的树冠形状。 片形状的区别 雌叶相对 较 小，叶端相对 于 雄株多为浅裂 ； 雄株 的 叶片相对雌株较大，叶 片 上 的 锯齿较 深 。但是， 由于雄树营养充足， 且 吸收丰富，叶子颜色比雌树的 稍微 深一些，雌叶 的 秋季变色期、落叶期 都 较早，即物后期相对雄株 较 长 10。 3 本课题的重要意义 银杏是裸子植物门银杏纲银杏科银杏属植物，为我国稀有的珍贵树种，集药用、食用、观赏、生态价值于一体。银杏最主要的有效成分是黄酮和内酯这两大类化合物，具有重要的药用价值，用于治疗心脑血管方面的疾病，现在各种银杏制剂已广泛应用于临床。雌雄银杏的根、茎、叶有一定差别，实验结果为该药的鉴别、开发利用及补充生药学资料提供参考依据。 高庆剑：雌雄银杏的 根、茎、叶 6 第二章 实验部分 1 实 验材料、仪器、试剂 验材料 雌雄银杏的根、茎、叶均采自甘肃省徽县地区，采集时间均为 2002 年 10 月。经过兰州大学药学院马志刚教授鉴定为银杏 （ .） 的根、茎、叶 。 为了达到实验的平行性，减少外界因素所引起的显微结构差异，雌雄银杏树均采自地区差异小，生长环境一致，生长过百年的雌、雄银杏树。最后，雌雄的判断以是否挂果和当地调查这两方面作为判断依据。在采集雌雄银杏的根、茎、叶时，采集部位均大致相同，并且要求根、茎的粗细一致。 样品采集后，先用水冲洗干净， 再用 定液（ 福尔马林，醋酸，酒精的混合物 ）储存待用。 器 刀片 ,尖头镊 ,盖玻片 ,载玻片 ,酒精灯 ,吸水纸 ,显微镜 ,擦镜纸。 剂 水合氯醛 ,间苯三酚试液 ,浓盐酸 ,稀甘油 ,蒸馏水。 2 实验 方法 取银杏叶制作临时装片 :取叶片 ,做徒手切片，取横切 ,加水合氯醛加热透化，滴间苯三酚 ,再加浓盐酸一滴 ,加稀甘油几滴，再盖上盖玻片，然后进行观察（可观察到细胞壁呈樱桃红或红紫色 ,即为木质化）。其他部位用同法制作 ,并分别加以标注。 高庆剑：雌雄银杏的 根、茎、叶 7 第三章 实验结果及结论 1 雌银杏 银杏根 横切面显微特征 木栓层为 20类方形棕色木栓细胞，栓内层不明显。皮层约为 7列类圆形细胞组成，细胞大小不等；石细胞偶见， 2成群或单个散在，呈类方形或不规则形，胞腔明显；分泌细胞密集分布，类圆形或长椭圆形。韧皮部宽厚，厚度与皮层相当，射线宽 2细胞，向外渐弯曲变宽，韧皮纤维束众多，非木化；分泌细胞随处可见，比皮层中较小。形成层环明显。木质部占根的半径的一半，导管 2，径向排列成放射状 ；导管木质化，射线宽 1 列细胞，由内向外逐渐变宽。（图 1） 图 1 雌根（ *60） 银杏茎 横切片显微 特征 木栓层发达，约为 20 多列类方形棕色木栓细胞组成细胞壁平直略弯曲，栓内层为 3类方形细胞。皮层约 10 列类圆形或长方形细胞组成，分泌细胞随处可见，其内充满黄色分泌物；草酸钙簇晶可见；类圆形分泌腔有规律的分布于皮层外侧，直径为 60柱鞘外侧由石细胞和纤维束断续组成环状，均木化，石细胞数个成群，外壁较厚，常呈不规则形或类圆形，其内侧均有纤维束断续成环状，非木化；韧皮部宽厚，厚度与皮层相当，其外侧分泌细胞随处可见，其内含黄色分泌物。形成层明显。木质部发 高庆剑：雌雄银杏的 根、茎、叶 8 达，约占半径的一半，导管单列，呈放射状排列。 髓由薄壁细胞组成，细胞类圆形，大小不等；分泌细胞偶见，草酸钙簇晶随处可见直径为 66图 2） 图 2 雌茎（ *60） 银杏叶 横切面显微特征 呈两面叶型构造。上表皮由一列较小类方形细胞组成，排列紧密，外被角质层。下表皮细胞类圆形，排列紧密，角质层呈嵴状突出，气孔内陷式，在维管束之间均有 6 个，等距离分布。栅栏组织由 3不规则细胞组成。海绵组织细胞为长圆形，呈水平分布。叶脉维管束为有限外韧型，在叶肉中等距离排列；维管束鞘为 3类圆形细胞，草酸钙簇晶偶见，直径约为 84下维管束鞘细胞内含有棕黄色分泌物。纤维束下表皮有纤维组织。分泌道在维管束之间时 有时无。 (图 3) 图 3 雌叶（ *100） 高庆剑：雌雄银杏的 根、茎、叶 9 2 雄银杏 银杏根 横切面显微特征 木栓层为 25类方形棕色木栓细胞，栓内层为 1细胞。皮层约 6 列类圆形细胞组成，细胞大小不等；分泌细胞随处可见，类圆形或长椭圆形；石细胞偶见，单个散在，呈不规则形， 壁较厚。韧皮部宽厚厚度比皮层较厚；射线宽 1细胞，向外渐宽稍弯曲；分泌细胞偶见，外侧较多，内侧渐少，呈类圆形，细胞比皮层中较小；韧皮纤维众多，非木化。形成层环明显。木质部占根的半径的一半，导管由 2细胞组成，径向排列成放射状；木质部射线由 1 列细胞组成，由内向外逐渐变宽。（图 4） 图 4 雄根（ *100） 银杏茎 横切面显微特征 木栓层约为 15 多层棕色木栓细胞 ，栓内层为 1类圆形细胞。皮层中，约 9 列类圆形或长圆形细胞组成，分泌细胞随处可见；分泌道有规律的分布在皮层外侧，直径为 60柱鞘外侧由石细胞和纤维束断续成环状，均木化，石细胞 3呈不规则形；中柱鞘内侧有纤维束断续排列成环状，非木化。韧皮部较窄，厚度约为皮层的一半，其外侧分泌细胞偶见，比皮层中较小，内含黄色分泌物；韧皮部外侧纤维成束，较多，壁较薄，非木化。形成层环明显。木质部宽广，木质部占整个半径的2/3，导管单列，呈放射状排列。髓由薄壁细胞组成，分泌细胞偶见。（图 5） 高庆剑：雌雄银杏的 根、茎、叶 10 图 5 雄茎（ *60） 银杏叶 横切面显微特征 呈两面叶型构造。上表皮由一列较小类圆形细胞组成，排列紧密。下表皮细胞类圆形，排列紧密，气孔内陷式，在维管束之间等距 离分布。栅栏组织由 1绵组织细胞为长圆形，呈水平分布。 叶脉维管束为有限外韧型，在叶肉中等距离排列，构造相同，大小相当，无主次之分，维管束鞘为 1类圆形细胞。离生式分泌道分布于维管束之间。维管束之间平均有一个分泌道，气孔均有 4 个，均匀分布。（图 6） 图 6 雄叶（ *100） 3 雌雄银杏的比较 不同部 位 雌 雄 根 木栓层 20 25 高庆剑：雌雄银杏的 根、茎、叶 11 栓内层 不明显 1细胞 韧皮部分泌细胞 随处可见 偶见 茎 木栓层 18 13 皮层、髓 有草酸钙簇晶 无草酸钙簇晶 分泌腔 6060皮部 占 1/8 半径 占 1/16 半径 叶 分泌道 678孔 （维管束之间） 平均 2 个 平均 4 个 4 小结与讨论 酸钙簇晶 在最初的显微观察中，银杏叶中没 有草酸钙簇晶，但是，如果不对其进行染色而制作切片，就能观察到很多草酸钙簇晶。这可能是因为在横切片制作过程中，用间苯三酚和浓盐酸染色，其中浓盐酸与草酸钙发生化学反应，使草酸钙簇晶在后期观察中消失不见。 泌腔 在光学显微镜下银杏的根、茎、叶各器官中，对分泌腔的发生和发育进程进行观察与研究。结果表明除根中无分泌腔外，其它器官的分泌腔都以相同的方式发生。分泌腔以裂溶生方式形成，分泌腔的原始细胞是一团染色较深、排列紧密、原生质很浓的细胞，它被液泡化细胞所包围。伴随着分泌腔的发 育，这一部分细胞慢慢液泡化，并逐渐向四周移动，形成一个空腔。当空腔增走到一定程度后，内层的分泌细胞部分溶解，并且脱落于腔内 11。到分化后期，分泌腔由一层染色较深的环带结构的分泌细胞和薄壁鞘状细胞所包围。各种器官中分泌腔的结构没有明显差别，成熟的分泌腔由一层分泌细胞围绕着的一个近圆形的腔道和周围的鞘细胞所构成 。 银杏的分泌腔在茎、叶器官中均有分布，在茎中分布于皮层和髓部之中，主要分布在皮层；在叶中分布于近上表皮的栅栏组织与海绵组织之间，与叶中的二叉脉交替出现。 高庆剑：雌雄银杏的 根、茎、叶 12 参考文献： 1林清洪 , 黄维南 , 林光荣 , 等 . 银杏资源的合理开发与利用 . 福建农业科技 , 2006, 28(3): 152崔月菱 , 施建芝 , 王梅荣 , 等 . 银杏资源的开发利用 . 河北林业科技 , 1995, 23(2): 473陈国华 , 邓福良 , 刘健平 , 等 . 银杏中氨基酸和维生素含量的分析湖南医科大学 . 200