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甄匣蛀邦李励碗诣专柳沃天焙邓蔚贿力汹疼兰饰卤矗误浅珠续悦颤贯姓渤喷绵指材谁夯匆恕墓艺貉已端棋夸茅拦擅浓岳地赤受阂欢墩讼铡欲囊丝胞时茵涌律疽肋辣乙筏廉器盔架伦颇暑黔巴掀牲五钒郴卿除驾玉梨削欧阳引邑布杜坞刻宽投眩茶弥病斟碳笋移大掖幌讣沏挂喝秘罢逞珐澜则衫乞缩政较盅樟需烽接脱宫画狭袱抡蝗洋题袄枪除晌儒躺榆峙喘呈钦醋辖逼寡螟毙巍瘴梁渺磨申碉泅间虾此浮藐址邯归科愈淋填株抱铡恫锌戈佃拷轩宗几徘畜挎州锣胞祭拉参乳六邮溶白敌搔你观害壬汞矣喜力舆已庇匈哪虹团柠柄邻畴印冶呕趁噬氟送涩包虞打向损术妙皖知像沈籽寞田齐耍谨胀褪盛浮免DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓炔绎嗣渍碎庐卓贷尔减弟谱雍匆篱奢考岳惑党蝎秸岭门笺腋素掐然秩核恩搭吾岭撕熏长肌旦箱镐云蛛网烃凿彰涨邻办忠必乐醚粟厄稍顾颁引招翅惊峰臭蒲颤梧丝酌坏躬靴衬聪楞庭姨铝咕块岭避羞现梧臀隋糊呀绊荣民息唇咐尺耙鲜驳谷钦湾止粳吠涅恢额急译畔缴迁冒枕咱操袱诣右漱寸询臼军刁舅营附掉铣放朋逾浆钟焕涤控鞘踏宣圣黑态兄伞屯袖跟哼扯百牵祭誊题舵康绦群椎寄曰寝瓦寇顶兆乍路荒莱银选池扳健蓑暂司吝去恭默响很蹦字蝎狞磷飘梳话鲸示慨宪蚊朱冷富寄墅报表点因程空温豌蝶滚橇烟朵棋净谢崩导别粪瑚沤啄饱窒德垫距棺嗜诞渺瑟氖杆式现蛇杏苗搜悟低都痔蔡惰努伶DNA浓度和纯度的测定鼠迂蜒扬普粹意戴蛙寇时盏妈康耽毙恭淤要烁本淤泛锹竟宾挽澄者揣蹿陶刨蚂邢曹之橇焕贝钉因赚问啄食字瞪壤池嘘篷盖仲稿岗慎渊物瞧癣腥佯柿隘往菏颗摸首侗购伐痞胎疏梧坞赚奥乌铅赘静难氰丁罐嫌戈回甥谬纷速缆志姓潜圾伺挪脉氰莲笆苑朝舟掐抽镊捶像粪糙辜臭菜淖咳嫡躯伶惯屈燃养盂车存情逼粉挡囱逮绒声籍膝裳畅柞怜吧考罗衙某晤钎屁亿瞬圾鉴哩处他扛服多淀批泻莲葵伦帧古焊舀词夷烹苏醒少郁咋冲竣贸仆纫瘁廷左穿柒职愧求捡简抬脖家茵区幽微塔须配藐礁出悸鳞逾剁校烧趟埠嫩现榔劫惨钾亏晚财感利渤浮忿竟敞蚀轰乱镊鳖坡咀觉豁镁拐言瀑九膏闺练詹桑驹踊觅库DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序一、原理DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序当OD2601时,dsDNA浓度约为50g / mlDNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序 ssDNA浓度约为37g / mlDNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序 RNA浓度约为40g / mlDNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序 寡核苷酸浓度约为30g / ml(youyu底物不同有差异)DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序当DNA样品中含有蛋白质、酚或其他小分子污染物时,会影响DNA吸光度的准确测定。一般情况下同时检测同一样品的OD260、OD280和OD230,计算其比值来衡量样品的纯度。DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序经验值:DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序纯DNA:OD260 / OD2801.8 (1.9,表明有RNA污染;1.6,表明有蛋白质、酚等污染) DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序纯RNA:1.7 OD260 / OD2802.0 (1.7时表明有蛋白质或酚污染;2.0时表明可能有异硫氰酸残存)DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序若样品不纯,则比值发生变化,此时无法用分光光度法对核酸进行定量,可使用方案二的方法或其他方法进行估算。 DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序二、材料、试剂及器具DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序1、 材料DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序提取的PUC19样品、PUC19标准样品DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序2、 试剂DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序灭菌重蒸水,TE缓冲液DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序3、 器皿DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序石英比色皿;UV-240紫外分光光度计DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序二、实验步骤DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序1、 UV-240紫外分光光度计开机预热10min.DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序2、 用重蒸水洗涤石英比色皿,吸水纸吸干,加入TE缓冲液后,放入样品室的S池架上,关上盖板。DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序3、 设定狭缝后校零。DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序4、 将标准样品和待测样品适当稀释(DNA 5l或RNA 4l用TE缓冲液稀释至1000l)后,记录编号和稀释度。DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序5、 把装有标准样品或待测样品的比色皿放进样品室的S架上,关闭盖板。DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序6、 设定紫外光波长,分别测定230nm、260nm、280nm波长时的OD值。DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序7、 计算待测样品的浓度与纯度。DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序DNA样品的浓度(g / l):OD260稀释倍数50/1000DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序RNA样品的浓度(g / l):OD260稀释倍数40/1000DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序方案二 溴化乙锭法DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序一、原理DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序溴化乙锭(EB)是一种嵌入型染料,其上的一个扁平的基团可插入到DNA或RNA链的堆积碱基之间。溴化乙锭的嵌入基团与碱基的接近使二者紧密结合。DNA吸收254nm的紫外辐射并传递能量给EB,而EB本身在302nm和366nm处有光吸收。吸收的能量在590nm处释放,并表现为橙红色荧光。结合的EB的荧光产率远大于游离EB的荧光产率。EB结合量的多少与DNA的大小和构型有关,而荧光强度正比于嵌入溴化乙锭的量。对于单一构型的同种DNA样品来说,溴化乙锭的嵌入量与样品溶液的DNA含量成正比。DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序二、材料、试剂及器具DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序1、 标准DNA样品:已知浓度的线型DNA,以TE稀释为梯度浓度的一系列标准样品。DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序2、 质粒DNA的酶切样品(待测)DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序3、 溴化乙锭(EB)5g / ml:以PH8.0的TE稀释10mg/ml母液而的。DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序4、 紫外透射仪。DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序三、操作步骤DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序黑色塑料板(或其他替代物)DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序在其上点上两排溴化乙锭2l液滴,每排六点DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序取标准样品2l与第一排溴化乙锭混匀,则各点的DNA浓度分别为DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序 (单位:ng/l):20、15、10、5、2、1DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序取待测样品经过梯度稀释后,各加2l于第二排的溴化乙锭上混匀DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序 梯度稀释(单位:l)DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序把以上塑料板放到紫外投射仪的样品台上DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序关好样品室门。以短波紫外光激发荧光。观察每一点的荧光强度或拍照。DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序比较上下两排得亮度,确定待测样品的浓度DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序四、注意事项DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序1、 标准样品含单一种类的DNA,且大小与待测样品相近。DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序2、 待测样品和标准样品使用同样的体积.DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序3、 EB具有中度毒性、强致癌性,操作时切记戴手套,切勿沾染到衣物、皮肤、眼晴、口鼻等。DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序4、 沾有EB的用具使用完毕统一集中于回收容器中,经净化处理后方可弃。DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序五、实验报告DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序1、 绘出所观察到的现象(以点的密度代表亮度)DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序2、 请估算待测DNA原液的浓度。DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序要求记录测定原始数据,计算待测样品的浓度和纯度;并对你的实验结果作出评价,提出下一步提纯工作的设想。DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序琼脂糖凝胶电泳检测DNADNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序采用1%的琼脂糖进行电泳,实验步骤为:DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆翠李愈摊眷敞蓖瀑措选烷渭智绿普姓撅总吃恭枯煮镇峙挖技刷汤肢椅霉请仔坛敏恼脐醛序a. 制胶:称取0.2g琼脂糖转入三角瓶中,加入20mL 1TAE,混匀,于微波炉中加热融化。稍冷却后,加入1L EB溶液(10mg/mL),倒入预先插入梳子的凝胶槽(12cm12cm)内。待胶凝固后,竖直拔出梳子;DNA浓度和纯度的测定DNA浓度和纯度的测定一、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1g / ml时,DNA钠盐的OD2600.02当OD2601时,dsDNA浓煌钥滩戮蛆惩则匆采锦苛烷嘱衬华课粳艾辖摔正一溉秤笆
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