基因工程名词解释.doc

名词解释一RNase:RNA水解酶Restriction endonucleasr：限制性核酸内切酶RBS:核糖体结合位点SD sequence：SD序列。可结合原核生物的核糖体。Ori：复制起始原点Promptor：启动子Klenow fragment：大肠杆菌pol1的大片段Reverse tranecriptase：反转录酶Transferred DNA：转移DNAMCS（multiple cloning site）：多克隆位点IPTG: 异丙基-D-硫代半乳糖苷X-gal：5-溴4-氯-3-吲哚-D-半乳糖苷GUS：-葡萄糖苷酸酶X-gluc：5-溴4-氯-3-吲哚-D葡萄糖苷酸酯Ampr（ampicillin resistance gene）：氨苄青霉素抗性基因Cmr：氯霉素抗性基因Tetr：四环素抗性基因Kanr：卡那霉素抗性基因Ermr:红霉素抗性基因Neor:新霉素抗性基因supF:琥珀突变抑制基因phagemid：噬菌粒plasmid：质粒YAC ( yeast artificial chromosome)：酵母人工染色体BAC(Bacterial Artificial Chromosome）：细菌人工染色体PAC（P1 artificialchromosome）：P1人工染色体TEL: 端粒重复序列CEN:着丝粒ARS: 自主复制序列Cosmid：黏粒PCR（Polymerase Chain Reaction）:聚合酶链式反应dNTP:脱氧三磷酸核苷RT-PCR:反转录(reverse transcriptase)PCR或实时定量(real-time)PCRDD(RT)-PCR:差异(反转录)显示PCRTAIL PCR：热不对称相错PCRRACE: cDNA末端的快速扩增RAPD：随机扩增多态性DNAAFLP:扩增片段长度多态性SSH：抑制性扣除杂交FISH:荧光原位杂交Vector:载体Blunt end：平末端Match end/cohesive end:匹配黏端/黏性末端Deoxyribonuclease：脱氧核糖核酸酶TAP：烟草算焦磷酸酶SDS：十二烷基磺酸钠PAGE：聚丙烯酰胺凝胶电泳PFGE：脉冲电场凝胶电泳PEG：聚乙二醇DEPC：焦碳酸二乙酯GFP：绿色荧光蛋白Competent cell:感受态细胞PNA：肽核酸Ptac：乳糖操纵子和色氨酸操纵子的杂合启动子GST(Glutathione S-transferase)：谷胱甘肽-S-转移酶DDT:二硫苏糖醇Tag：标记蛋白Polyhis-6：六聚组氨酸肽名词解释二1 同裂酶（isoschizomer）识别相同序列的限制酶称同裂酶同尾酶（isocaudarner）许多不同的限制酶切割DNA产生的末端是相同的，且是对称的，即它们可产生相同的黏性突出末端。2 质粒 质粒是细菌染色体外能自主复制的双链闭合环状DNA分子。可用作基因工程载体。 噬菌粒 将单链噬菌体的基因间隔区与质粒载体重组后的载体。主体为载体，在噬菌体辅助下可得到单链DNA。黏粒 是由人工构建的含有噬菌体DNA的cos序列和质粒复制子的载体。黏粒具有噬菌体的特性，具有质粒的特性。克隆外源DNA的容量大。3 克隆载体 通过目的基因整合于载体上导入宿主细胞，使目的基因随质粒的繁殖而得到大量复制载体。 表达载体 除具有复制载体的特点和元件外，还包括使外源基因整合并在宿主细胞中表达的表达元件（启动子，RBS，终止子等）。 穿梭载体 具两套不同复制元件和选择标记。使外源基因在两个不同的宿主中复制或表达。4 反向PCR（inverse PCR）是一种简单的扩增已知序列周边未知序列的方法。根据已知片段两端的序列设计引物，可将邻近的DNA片段扩增出来。反转录PCR 以mRNA为模板反转录出cDNA，再以cDNA为模板进行PCR扩增得到目的基因片段。差异显示PCR（differential display PCR,DD-PCR）是用于检测相似生物材料的基因表达谱差异的一种方法，是PCR和反转录有机结合并深化应用的产物。5 基因敲除 利用特定基因敲除载体的基因序列与靶基因序列的同源性实现重组，达到使靶基因敲除和失活的目的。基因敲入 利用与基因敲除相同的原理，将外源基因放在载体上，通过同源重组将外源基因整合到宿主染色体的特定位点上。基因下调 RNA干扰技术。通过干扰RNA分子的作用达到转录后基因沉默的效应。6 .T4连接酶和大肠杆菌的DNA连接酶相同：二者活性相似相似，均能催化5磷酸集团和3羟基之间形成磷酸二酯键。不同：T4连接酶反应过程无需NAD+的参与，大肠杆菌的DNA连接酶需NAD+的参与。T4连接酶可连接RNA，大肠杆菌的DNA连接酶不连接RNA，平末端链接效率低。7 基因文库 DNA文库是指某一生物体全部或部分基因的集合，可分为基因文库和cDNA文库。 基因组文库 将某生物体全部的基因组切割，与合适的载体组建后转化宿主细胞，所获得的所有阳性菌落构成的。 cDNA文库 cDNA是由某一生物的某一特定器官的特定发育时期细胞内所表达的mRNA反转录后形成的。不包括全部基因。8 宿主的限制和修饰作用 限制作用就是限制酶降解外源DNA，维护宿主遗传稳定性的机制。 修饰作用是通过甲基化酶来的甲基化作用，是宿主细胞能识别自身遗传物质和外来遗传物质的机制。9 比较pRB322和pUCpBR322质粒载体的相对分子质量较小，带有一个复制起始位点，该质粒只在大肠杆菌细胞中行使复制。具有两种抗生素抗性基因氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因。pUC载体是在pBR322质粒载体的基础上，组入了一个在其5-端带有一段多克隆位点的lacZ基因，而发展成为具有双功能检测特性的新型质粒载体系列。10 核酸水解酶和限制性核酸内切酶都可将长链DNA切割为短片段DNA或核苷酸，前者切割无特异性，将核苷酸逐一水解下来。后者只识别特异位点，是核酸内切酶的一种。11 Southern biotting 将两条DNA链杂交，其中一条被标记的链叫做探针。 Northern biotting 将DNA与mRNA或者总RNA杂交Western biotting 抗原抗体杂交，用于检测外源基因蛋白质水平的表达。12 选择基因 与外界存在的筛选压力如抗生素等相互作用，以筛选出被转化的细胞；报告基因 报告基因是指其编码产物能够被快速测定、常用于判断外源基因是否成功地导入受体细胞，是否启动表达的一类特殊用途的基因。应用不依赖于外界选择压力的存在。13 基因打靶 是指通过DNA定点同源重组，改变基因组中的某一特定基因，从而在生物活体内研究此基因的功能。同源重组（Homologous Recombination) 是指发生在姐妹染色单体（sister chromatin) 之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合。14 一元载体 是中间表达载体与改造后的卸甲载体Ti通过同源重组所产生的一种复合型载体，通常亦称为共整合载体(co-integrated vector) 。双元载体(binary vector) 是指由两个分别含T-DNA和Vir区的相容性突变质粒构成的双质粒系统，也因为其T-DNA与Vir基因在两个独立的质粒上，通过反式激活T-DNA转移故称之为反式载体(trans vector)。卸甲载体 将Ti质粒上T-DNA中的致瘤基因全部去掉，仅保留其两侧边界与T-DNA准确转移所必需的25个碱基序列，故称之为卸甲载体。15 基因操作: 对基因进行分离、分析、改造、检测、表达、重组和转移等操作的总称。基因工程: 主要是利用DNA 重组技术，将生物的某个基因或一个DNA片段通过基因载体（DNA载体）运送到另一生物的活性细胞中，然后经过克隆和行使正常功能（表达），从而创造生物新品种或新物种的遗传学分子技术（从细菌到高等生物）。DNA 重组：用酶学方法将不同来源的DNA进行切割连接，组成一个新的DNA分子。16 克隆：将一个亲本细胞经过无性繁殖产