生化实验课件实验八聚合酶链反应_第1页
生化实验课件实验八聚合酶链反应_第2页
生化实验课件实验八聚合酶链反应_第3页
生化实验课件实验八聚合酶链反应_第4页
生化实验课件实验八聚合酶链反应_第5页
已阅读5页，还剩4页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

聚合酶链反应,PCR,目的,掌握聚合酶链反应的原理和方法,原理,PCR技术实际上是在模板DNA、引物和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应。PCR反应分3步:变性:通过加热使DNA双螺旋的氢键断裂，双链解离形成单链DNA，退火：当温度突然降低时，使引物和其互补的模板在局部形成杂交链，延伸：在DNA聚合酶和4种脱氧核糖核苷三磷酸底物及Mg2+存在的条件下，53的聚合酶催化以引物为起始点的DNA链延伸反应，以上3步为一个循环，每一循环的产物可以作为下个循环的模板；数小时之后，介于两个引物之间的特异性DNA片段得到了大量复制，数量可达2106-7拷贝。,实验步骤,一、PCR反应体系,Tag酶：放在写着“T”字小管，每管内装10l模板：放在写着“模”字小管加最后一个试剂时多吹吸几次混匀,二、PCR反应循环设置,944min9430sec5530sec25cycles7230sec725min,三、电泳鉴定,Marker:1lDNA染料2l上样缓冲液9lDNAMarker样品:1lDNA染料2l上样缓冲液9l扩增后DNA样品电泳电压:110-120V，约30分钟DNAMarker为D2000,实验结果观察,本次实验模板在400-500bp位置,本次实验模板为大肠杆菌位置
人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论