尿液检验二三参考课件.ppt

三、尿液糖定性检查,尿糖一般是指尿液中的葡萄糖。正常人尿液中有微量葡萄糖，定性试验为阴性。糖尿：血糖超过肾糖阈（8.88mmol/L），或肾小管重吸收能力下降，尿糖阳性。,1,（一）检查尿糖目的,检查糖尿病的代谢情况。检测与评价糖尿病的治疗。,2,（二）测定方法及评价,1班氏定性法2干化学法3薄层层析法,3,1班氏定性法,稳定缺乏特异性,4,2干化学法,葡萄糖氧化酶法敏感、半定量还原物质可致假阴性,5,（三）结果判断,6,（四）参考值,空腹及餐后2h尿阴性,7,（五）质量控制,1.标本留取2.容器清洁3.及时送检4.干扰因素及处理5.判断结果6.过筛指标,8,4.干扰因素及处理,VitC：班氏，试带高比重尿及高酮体尿蛋白尿其他还原糖类,9,（六）临床意义,1.血糖增高性糖尿：糖尿病其他内分泌异常应激状态饮食因素2.血糖正常性糖尿：肾性糖尿3.其他糖尿,10,四、尿中酮体定性检查,酮体（ketonebodies）是脂肪氧化代谢过程中的中间代谢产物，包括乙酰乙酸、-羟丁酸、丙酮。在健康人中，少量的酮体以78%的-羟丁酸、20%的乙酰乙酸和2%的丙酮的比例存在于血液中。当肝脏内酮体产生的速度超过肝外组织利用的速度时，血中酮体增加，可出现酮血症（ketonemia），过多的酮体从尿中排出称酮尿（ketonuria）。,11,（一）测定方法及评价,1朗格（Lange）法2改良Rothera（粉剂）法3干化学法4其他,12,1朗格（Lange）法,乙酰乙酸或丙酮在碱性条件下与亚硝基铁氢化钠生成紫红色化合物。对-羟丁酸不反应。易受其他物质的干扰。,13,2粉剂法,14,3干化学法,与乙酰乙酸反应与乙酰乙酸和丙酮都起反应敏感、方便、快速,15,4其他,-羟丁酸定性试验对酮血症的早期诊断意义较大较繁琐,16,（二）参考值,阴性,17,（三）质量控制,1.尿液新鲜2.正确分析结果,18,（四）临床意义,尿液酮体检验主要用于糖代谢障碍和脂肪不完全氧化的判断与评价。1糖尿病酮症酸中毒2其他：饥饿、过分节食,19,五、尿液胆红素定性检查,20,（一）测定方法及评价,1.Harrison法胆红素与氯化钡反应，形成钡盐沉淀吸附胆红素，滴加酸性三氯化铁试剂，使胆红素氧化为胆绿素显绿色。操作较为复杂，但准确性高。2.干化学试带法结合胆红素在强酸性介质中，与2,4-二氯苯胺重氮盐起偶氮联反应而呈紫红色。敏感度不高、但操作简便、快速及半定量的作用，可用目视或仪器检测等优点，已得到临床广泛应用。,21,（二）参考值,阴性,22,（三）质量控制,1.标本要新鲜、避光。2.Harrison法可滴加硫酸铵试剂1-2滴，以促使沉淀形成，保证胆红素最大限度被吸附。3.注意药物的干扰：尿中含大量水杨酸和阿司匹林时易产生紫红色反应而干扰Harrison法的结果观察。VitC和亚硝酸盐能抑制偶氮反应而使试带法为假阴性；而大剂量氯丙嗪和高浓度的盐酸苯偶氮吡啶的代谢产物在酸性条件下则使试带法呈假阳性。4试带法结果可疑者，最好用Harrison法加以验证。,23,（四）临床意义,1.肝细胞性黄疸2.阻塞性黄疸3.先天性高胆红素血症,24,六、尿胆原定性检查,25,（一）测定方法及评价,1.改良Ehrlich法尿胆原在酸性条件下与对二甲氨基苯甲醛反应生成樱红色化合物。操作简便，但结果受胆红素、叶胆色素原以及某些药物的干扰。2.干化学法试带有两种：一种同干化学法，另一种是利用尿胆原与重氮化合物的偶联反应，根据产生红色的深浅判断尿胆原含量。试带法简单快速，可以半定量，不受尿中胆红素的影响。,26,（二）参考值,阴性或弱阳性120稀释后阴性,27,（三）质量控制,1.标本采集与送检2.假阳性尿的鉴别3.假阴性4.温度5.结果观察,28,（四）临床意义,1.鉴别黄疸2.反映肝细胞损伤的敏感指标3.药物影响,29,七、尿血红蛋白定性检查,尿血红蛋白来源：血管内溶血肾及上尿路出血隐血试验：肉眼无变化，化学定性阳性,30,（一）测定方法及评价,1.湿化学法血红蛋白所含的血红素有类似过氧化物酶活性，能催化一种供氢（电子）体脱氢，使供氢体分子结构发生变化而显色。2.干化学试带法与湿化学法原理相同。简便、快速，敏感度高。上述方法干扰因素很多，特异性差。VitC等其它还原性物质可抑制酶活性使反应呈假阴性；高浓度的葡萄糖和蛋白质会降低反应的敏感性；一些铁剂、碘化合物等氧化物可使反应呈假阳性。这些试剂与肌红蛋白也起反应。因而,需加以鉴别。3.单克隆抗体免疫胶体金法采用抗人血红蛋白单克隆抗体进行隐血检测。敏感度更高，特异性强，简便、快速；但目前费用较高。,31,32,（二）参考值,阴性,33,（三）质量控制,1.尿液要及时测定2.保证试剂、试带质量3.控制干扰因素：VitC、标本污染4.综合分析结果,34,（四）临床意义,1.辅助诊断泌尿系统疾病2.辅助诊断肾前性溶血性疾病,35,八、尿液亚硝酸盐定性检查,尿中含有硝酸盐还原酶的病原菌可将硝酸盐还原为亚硝酸盐。常见菌：大肠杆菌、克雷伯杆菌、变形杆菌。,36,（一）测定方法及评价,Griss原理：亚硝酸盐先于对氨基苯磺酸或氨基苯磺酰胺反应生成重氮盐，再与-萘胺结合形成红色偶氮化合物。感染的病原微生物的种类尿液滞留时间硝酸盐的存在,37,1.湿化学法：方便、快速。2.干化学法：主要用于检出大肠杆菌。（二）参考值：阴性,38,（三）质量控制,1.防止假阳性干扰2.控制假阴性：晨尿、尿量、抗生素等。3.综合分析结果,39,（四）临床意义,泌尿系感染的过筛实验阴性不能排除感染,40,第四节尿液其他蛋白质的检查,尿中本-周蛋白定性检查尿液肌红蛋白定性检查尿液清蛋白定量测定尿总蛋白定量测定尿2-微球蛋白定量测定尿免疫球蛋白定量测定,41,一、尿中本-周蛋白定性检查,本周蛋白(Bence-Jonesprotein，BJP)是免疫球蛋白轻链，能通过肾小球滤过膜。又称为凝溶蛋白。免疫球蛋白轻链在血液中的浓度增高，超过了肾近曲小管重吸收阈值时，可出现本周蛋白尿。,42,测定方法及评价,1.热沉淀法：在40时开始混浊，60时凝固，继续加热至90-100时溶解，当温度恢复为4060时又凝固。2.对甲苯磺酸沉淀法：对-甲苯磺酸能沉淀相对分子质量较小的本周蛋白，而对相对分子质量较大的清蛋白和球蛋白不起反应。3.电泳法或免疫法,43,参考值,阴性,44,质量控制,1.标本要新鲜，以去除其他蛋白质的干扰。2.严格控制pH。3.如尿中出现其他球蛋白(大于5.0g/L)可出现假阳性，需进行确证试验。4.电泳法或免疫法：浓缩。5.使用利福平类抗结核药时，可出现。,45,临床意义,1.辅助诊断：MM、巨球蛋白血症2.预后观察：肾功能不全,46,二、尿液肌红蛋白定性检查,Mb有种属特异性自由透过肾小球膜类过氧化物酶活性可被100%的硫酸铵沉淀不被80%的硫酸铵沉淀,47,测定方法及评价,化学法：隐血实验分光光度法：吸收光谱单克隆抗体免疫法：最敏感、特异,48,参考值,阴性,49,质量控制,1.标本新鲜2.缓慢加入硫酸铵，轻微振荡,50,临床意义,1.大面积外伤2.缺氧、缺血3.其他,51,三、尿液清蛋白定量测定,测定方法及评价：免疫分析法、化学定量参考值：晨尿6.55.1mg/L随机尿1.270.78mmolCr或11.216.93mg/gCr24h尿5.72.6mg/24h,52,质量控制免疫比浊法,1.注意非特异性浊度的控制2.注意抗原抗体的比例3.每次更换试剂后应重新制作标准曲线,53,临床意义,1.早期肾损害的筛检2.过敏性紫癜的肾功能监测3.肾小球肾炎的病情观察4.其他,54,四、尿总蛋白定量测定,测定方法及评价：双缩脲法染料结合法比浊法免疫比浊法或放射比浊法,55,双缩脲法,蛋白质中的肽键（-CONH-）在碱性溶液中能与Cu2+作用而产生紫红色络合物，其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比，而与蛋白质的分子量及氨基酸成分无关。40-150mg/24h,56,染料结合法,丽春红S法46.518.1mg/L考马斯亮蓝法58.6-134mg/24h,57,质量控制,方法选择标本要求尿液浓缩消除尿液颜色的干扰,58,五、尿2-微球蛋白定量测定,测定方法及评价：免疫参考值：2MG0.3mg/24h2MG排泄率0.2mg/(gCr)2MG排泄率3mg/L,59,质量控制：标本处理、试剂临床意义：1.肾小球滤过功能受损的敏感指标。2.肾小管疾病的早期诊断指标。3.鉴别上、下尿路感染。4.观察肾移植排斥反应。,60,六、尿免疫球蛋白定量测定,血浆尿路感染局部免疫反应产生肾脏疾病,61,测定方法及评价：晨尿或24h尿液免疫学方法参考值：IgG0.30.2mg/LIgA0.70.3mg/LIgM0.030.01mg/L临床意义：诊断肾小球性蛋白尿评价肾小球的损害程度肾炎型肾病,62,第五节尿液酶的检查,NAG、GGT、AAP、AMY、TR尿酶活性计算：肌酐换算8h尿量计算酶清除率,63,一、尿N-乙酰-D氨基葡萄糖苷酶,肾小管损伤的标志物测定方法及评价：比色法荧光光度法电泳法参考值：比色法30U/L尿质量控制；标本、试剂,64,临床意义,肾脏病变：肾小管损害肾移植排异反应：早发现上、下尿路感染的鉴别,65,二、尿-谷氨酰基转移酶,连续检测法肾脏受损的早期诊断：肾小管炎症肾小球肾炎的疗效观察肾癌的标志物肾移植排异反应观察指标,66,三、尿丙氨酸氨基肽酶,速率法各种肾脏疾病诊断的辅助指标肾移植术后排异反应的观察肾毒性损害的早期诊断,67,四、尿淀粉酶,急性胰腺炎慢性胰腺炎其他,68,五、尿胰蛋白酶,测定方法：连续检测法、免疫法参考值：阴性质量控制：采样时间抗原抗体比例结果判断临床意义：急性胰腺炎阳性胰腺癌阴性,69,第六节尿液其他化学成分检查,一、尿葡萄糖定量测定二、乳糜尿定性检查三、尿绒毛膜促性腺激素检查四、尿含铁血黄素定性检查五、尿卟啉定性检查六、尿苯丙酮酸定性检查,70,一、尿葡萄糖定量测定,测定方法及评价：己糖激酶法邻甲苯胺法葡萄糖氧化酶法质量控制：立即检测参考值2.8mmol/d(0.5g/d)0.1-0.8mmol/L临床意义,71,二、乳糜尿定性检查,乳糜尿含有大量脂肪颗粒，与蛋白质组成的乳糜状浑浊尿。脂肪可溶于乙醚，加乙醚萃取后乳糜尿变澄清，即为乳糜试验阳性。乳糜尿中脂肪小滴可用脂溶性染料使之着色，在显微镜下观察识别。,72,（一）测定方法及评价,73,（二）质量控制,乳糜尿常与过多的盐类结晶或脓尿混淆，前者加热或加酸后浑浊消失，后者显微镜检查有大量白细胞可以鉴别。本实验阳性应注意在尿沉渣中查找微丝蚴。（三）参考值：阴性,74,（四）临床意义,淋巴管阻塞少数由结核、肿瘤、腹部创伤或手术导致,75,三、尿绒毛膜促性腺激素检查,胎盘滋养层分泌、多肽链组成为HCG特有主要存在于孕妇的血、尿、羊水、初乳和胎儿,76,测定方法及评价,1.胶乳凝集抑制试验2.单克隆双抗体酶免疫法3.单克隆抗体金标记免疫层析