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文档简介

,单倍体育种,花药离体培养(N),单倍体植株(N),秋水仙素处理,使染色体翻倍,植株(2N),意义:1.明显缩短育种年限,2.后代植株都为纯合子,正常植株(2N),花的结构,花丝,花药:囊状结构,内有很多花粉,花粉是由花粉母细胞(即小孢子母细胞)经过减数分裂而形成的,因此,花粉是单倍体的生殖细胞。,(一)被子植物的花粉发育,雄蕊,一、基础知识,花粉的发育要经历:四分体时期、单核期、双核期等阶段。,(一)被子植物的花粉发育,1花粉母细胞(2n),4个小孢子(小孢子四分体)(n),减分,有分,1个花粉管细胞核(n),1个生殖细胞核(n),有分,2个精子,单核居中期(n),单核靠边期(n),(一)被子植物的花粉发育,分离,(一)被子植物的花粉发育,体细胞胚(胚状体):在组织培养过程中,某些体细胞在形态上转变为与受精卵发育成的胚非常相似的结构,发育过程亦与受精卵胚类似,被称为体细胞胚(胚状体)。,(二)产生花粉植株的两种途径,形成原因:主要取决于培养基中的激素的种类及其浓度的配比,(三)影响花药培养的因素1.材料的选择不同植物同一植物的不同生理状况(花期早期初花期)合适的花粉发育期(单核居中期与靠边期之间)植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等2.培养基的组成,为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难?,花瓣松动后,微生物就可能侵入到花药,给材料的消毒带来困难。,(一)材料选取,2.通过镜检来确定是否处于适宜的发育期。(1)醋酸洋红法(将染色体染成红色)(2)焙花青-铬矾法(花粉细胞核染成蓝黑色)。,1.从花药看:月季的初花期从花粉看:单核期从花蕾看:完全未开放的,二、实验操作,(二)材料的消毒,5.无菌水冲洗35次花药的外面有花萼、花瓣保护,通常处于无菌状态,1.花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30秒,2.无菌水清洗,3.无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分,4.放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中24分钟(质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液),剥取花药,接种花药,培养,分化培养基培养,鉴定和筛选,不要损伤花药?,要彻底除去花丝?,常常会出现染色体组数的变化?,每个培养瓶接种(710个)个花药温度?光照?,花药长出愈伤组织还要转移到哪?,主要原因是营养核和生殖核融合造成的,(三)接种和培养,植物组织培养技术与花药培养技术的异同点,基因型为AaBb的水稻(条染色体)的花药通过无菌操作,接入试管后,在一定条件下培养成试管苗。()愈伤组织是花粉细胞分裂形成的不规则的细胞团,愈伤组织必须从培养基中获得()()和小分子有机物等营养物质。()要促进花粉细胞的分裂分化,培养基中应有()()两种激素。愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根,由芽发育成叶茎。这一过程必须给予光照,其原因是()利用光能制造有机物促进试管苗生长发育。()试管

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