内容简介：: 五种中药对甲癣常见致病菌的抑菌实验研究万东华黄宝建周训胜许小平福州大学化学化工学院，350002，福建福州第一作者女1977年生，硕士摘要通过抑菌试验测定5种中草药对甲癣常见致病菌的MIC最低抑菌浓度，以筛选出抗甲癣作用较强的单味中草药。关键词中药；甲癣；抑菌；实验研竞中图分类号R9314文献标识码A文章编号10095276200404065702甲癣是一常见的损害甲组织的皮肤疾病。经研究资料【1，2表明引起甲癣的病原中，皮肤癣菌约占628其中红色毛癣菌占576、石膏样毛癣菌约占412，酵母苗约占312其中白色念珠菌占70，非皮肤癣苗霉菌约占6。从20世纪20年代开始人们便从中草药中寻找抗真菌药物。根据不完全统计，已报道有300多种中草药具有不同程度的抗真菌作用”。本文通过抑菌试验测定5种中草药对甲癣常见致病菌的MIC最低抑菌谁度，以筛选出抗甲癣作用较强的单味中草药。1材料和方法实验材料药物5种中药为千姜、大蒜、丁香、川椒、斑蝥，均购自福建省回春药店。菌种3个菌种为红色毛癣菌、石膏样毛癣菌、白色念珠苗均由南京皮研所真菌保藏中心提供。培养基沙氏培养基。药样制奋每种中药称取509，加200ML的95乙醇，浸泡30MIN，然后于800C回流提取2H，用纱布滤出滤液药渣再加200ML的95乙醇，同法回流提取将两次过滤所得的滤液合并，再加热浓缩至50ML，即为19MR。浓度的药液。抑菌试验药基制各采用平皿药基法。将培养基琼脂159，葡萄糖409，蛋白胨109高压灭菌01MP15MIN，待冷至4050时，定量分装于平皿中，再以无菌操作法加入各中药药液和灭菌蒸馏水，使药液含量依次为I00、50、105105、01MGML_。，充分混匀。一个浓度平行配三份。对照设置设普通沙氏培养基不加菌做空白对照，普通沙氏培养基加菌做阳性对照。接菌采用单个菌落接菌法。在药基及阳性对照基平皿的相应标记区域内分别接入直径相同的单个苗落，每个菌落同时接种2点。培养将接好茵落的药基培养皿和对照基平皿置恒温光照培养箱内，27。C培养14D，每天观察并记录茵落生长情况。M1C的确定为求得准确的MIC，实验结束后，针对各味中药对不同菌种的抑制效果，对药基浓度进行调整减小浓度跨度，通过抑菌试验准确地测定各昧中药的MIC。具体实验方法同上。2结果培养至第14夭，以不加菌的空白对照肛为标准，并与加菌的阳性对照皿比较，如无菌落生长，或菌落虽生长、但明显小于阳性对照皿，即被视为有抑菌作用“一”表示，如果菌落与阳性对照皿中相似者则为无抑菌作用“”表示，结果见表1。表15种中药抑菌试验结果以无真菌生长的药基平皿的最低药物浓度作为该单昧药对该种菌的最低抑菌浓度MIC，结果见表2。表25种中药醇提液的MICIMGML1J3讨论现代研究证实，斑蝥水授剂抗真菌作用的研究证明由其体外对黄色毛癣苗等12种致病皮肤真菌具有抑制作堕用41；川椒中主要抗菌成分是川椒挥发油，该物质能透过竺细菌细胞壁进入细胞内发挥杀菌作用；丁香中的抗菌657物质丁香酚有较强的抗真菌作用，对18种真菌均有明显生的抑制和杀灭作用蚓；生姜体外实验对伤寒杆菌、霍乱弧刊菌及堇色毛癣菌有明显抑制作用。7】大蒜有明显的抑菌作用，高浓度时可完全杀死真菌呻。本研究的目的在于万方数据中医药学刊2004年第22卷筛选抗甲癣作用最佳的中草药。实验结果表明，J香与其它单昧中药相比，对三种甲癣常见致病菌均呈高度敏感，抑菌效果显著，提示可作为抗甲癣中草药。5种中药的抗真菌主要成分是挥发油、生物碱、有机酸等。挥发油在70以上浓度的乙醇溶液中可以套部溶解在浓度低的乙醇溶液中只能溶解一定的数量，在水中的溶解度槛小；生物碱一般不溶于或难溶于水，可以溶解于乙醇；有机酸如斑嫠中的蚁酸，也檄易溶解于乙醇；而蛋白质、淀粉都不易溶解在乙醇中”J。故选择95乙醇热回流法提取各中药。因乙醇的沸点是785，本试验将回流提取温度与浓缩温度控制在80，不宜过高，以防止挥发油的损失。苗量的控制一般有血细胞计数板法和分光光度计数法但是对皮肤癣菌来说，这两种方法确定菌量的误差较大。限于实验室条件及便于操作，本实验采用单个菌落接苗法，先在空白培养基的培养皿上通过分区划线的方法使菌落密度逐渐降低，最终得到单个菌落，接菌时用接菌环挑种直径相同的单个菌落。实验结果表明，这样的菌量掩捌方法有效可行。参考文献F1傅爰琨甲癣治疗的进展D江西医药，1996，316370375F2王健美皮肤癣菌病致病菌种分析JJ中国麻风皮肤病杂志200319】75763许冰，等抗真菌中草药研究概况0云南医药19845154林峰，洪瞢浅谈斑蟊J】海峡药学2001，13467685叶萍和前军，高碧秀，等川椒挥发油抗常见细菌世真菌作用实验研究J现代预防医学，1997，241176宋军，李鹤玉，赵晓秋，等丁香酚抗真菌作用的实验研究【J中国皮肤性病学杂志，19961042032067付爱华，尹建元孙莹，等黄精和生姜抗皮肤癣菌活性研究J白求恩医科大学学报，2001，2743843858于新蕊，丛月珠大蒜的化学成分及其药理作用研究进展中草药，1994，2531581609姚新生天然药物化学M弟1版，北京人民卫生出版社1995如科坼如科烯翰牡带淳礴津带姑群翰姑科，席觊斜绵幽斛J席幽斛绵出科|席幽剐J席勘群|席幽趟，席幽，席断F幽斛，席勘趟，席她料嫦勘斛烯S如趟缔如州坏岛趟，麻幽FG坏上接第643页专方治疗陆曦8】等自拟中药平复汤十全大补汤合小柴胡汤加减给41例长期大剂量应用皮质激素者服用，观察服药前后血清皮质醇变化进行对比研究。结果表明平复汤有显著拮抗皮质激索反馈性抑制的分泌从而对长期应用皮质激素者肾上腺皮质的结构和功能起保护作用。李俊芳【9等对20例肾病综合征患者，在大荆量激素治疗的同时采用中药自拟芪泽汤黄芪、泽泻、水蛭、川芎防治脂类代谢障碍引起的满月脸、向心性肥胖等副作用。结果发现其防治满月脸、向心性肥胖等副作用效果明显，从化验指标观察发现，M清总胆固醇明显降低提示本方能防治脂类代谢紊乱。宴驻研究近二十年来，大量有关中医药防治医源性皮质醇增多症的实验研究结果表明，中药对抗激素副作用有效防治医源性皮质醇增多症，是通过影响HPA系统、影响机体代谢功能、影响免疫系统功能等多种途径实现的。查良伦001将39只豚鼠用激素分别同用滋阴药生地、知母、甘草温阳药附子、肉桂、菟丝予、淫羊藿灌胃10周观察脑垂体、肾上腺皮质的细胞形态、皮质厚度、细胞内脂含量等变化。结果证明，滋阴中药有减轻和防止较长期应用皮质激索所引起的肾上腺皮质萎缩的作用。而温补肾阳药有类似激素的作用但无激素剧作用，与改善轴功能有关。骆保C1发现，益气助阳药黄芪、淫羊藿、养血滋胡药当归、地黄对氢化可的松琥珀酸钠HCSS作用下的小鼠腹腔巨噬细胞FC、C3B受体活性具有保护作用。陈泽群“23研究了滋阴泻火药对阴虚内热由证的作用机制，选用知母为代表考察滋阴泻火药归钠泵矍的作用。结果表明，知母菠荠甙元对NA_一KATP酶有一二二明显的抑制效应。6583结论与展望堂由于激素不可替代的治疗作用及其对机体不可避免删的副作用。医源性的皮质醇增多症的发病率逐年增高。因此，在保证糖皮质激素对某些疾病的治疗效果的前提下，如何防治其对机体产生的诸多不良反应，成为医学领域的一大热点。近年来，国内外对医源性皮质醇增多症的发病机制和治疗有了进一步的研究，但现代医学仍未发现特效的药物对抗激素的副反应，减量、停药观察往往会影响激素对原发病的治疗效果。中医药对医源性的皮质醇增多症的疗效已为许多临床和实验研究所证实充分证明了祖国医学在这一领域的优势。在今后的研究中。应加强从分子水平探讨中药治疗医源性皮质醇增多症的病理机制。揭示中药的作用环节，进一步明确中药作用规律寻找更有救的方药对该病进行研究是一个亟待解决的课题，值得深入观察研究。参考文献1刘新民实用内分泌学M】人民军医出版社19864922邬锦文，刘水渠药源性疾病M上海上海科学技术出版社19822302313钟所勇，沈自尹下丘脑一垂体一肾上腺轴大鼠下丘脑CRFMRNA表达J上海铁道大学学报，1998，19增84金钰同，吴薇，韩玲不同激索方案对D,JL肾病综台征血浆皮质醇及钙磷水平影响J】前卫医药杂志，1996，131345清亮对激素副反应的认识与用药心得J中医药信息2002，191I6邹文森，黎林森医源性皮质醇增多症中医辨证治疗187例D福建中医药，1995，266137虞坚尔，江淑爱，潘新，等小儿原发性肾病缘台征远期疗效随访上海中医药大学学报1999131278陆曦，林艾羽吴立坚等平复汤对血浆皮质醇的影响J浙江中西医结台杂志200111116649李惶芳，张闻生，李世雪，等肾病综台征激素疗法中医谭性皮质醇增多症的中药防治J】中国中西医肾病杂志，2001，21165710查良伦补肾中药拮抗皮质激素所致副反应的实验观察J上海中医药杂志，1990，2111骆保益气助阳养血滋阴方药对氧化可的橙作用下的小鼠腹腔巨噬细胞FC、C3B受体的调整作用口北京医科大学学报198919641912陈泽群阴虚内热证韧探0中西医结合杂志1983，34235万方数据五种中药对甲癣常见致病菌的抑菌实验研究作者万东华，黄宝建，周训胜，许小平作者单位福州大学化学化工学院,350002,福建,福州刊名中医药学刊英文刊名CHINESEARCHIVESOFTRADITIONALCHINESEMEDICINE年，卷期2004,224被引用次数7次参考文献9条1傅爰琨甲癣治疗的进展1996062王健美皮肤癣菌病致病菌种分析期刊论文中国麻风皮肤病杂志2003013许冰抗真菌中草药研究概况19844林峰洪菁浅谈斑蟊期刊论文海峡药学2001045叶萍和前军高碧秀川椒挥发油抗常见细菌及真菌作用实验研究1997016宋军李鹤玉赵晓秋丁香酚抗真菌作用的实验研究1996047付爱华尹建元孙莹黄精和生姜抗皮肤癣菌活性研究期刊论文白求恩医科大学学报2001048于新蕊丛月珠大蒜的化学成分及其药理作用研究进展1994039姚新生天然药物化学1995本文读者也读过10条1叶沛光黄余龙YEPEIGUANGHUANGYULONG两种抗真菌药治疗甲癣成本效果分析期刊论文现代生物医学进展2006,682郑玮清董全江吕惠清周春英甲癣中药洗剂对常见致病性真菌的敏感性检测期刊论文中国真菌学杂志2007,213赵昌兰李培峰外治法治疗甲癣期刊论文新中医2003,3514王芳芳张克州阎鹏涛银屑病关节炎三例误诊报告期刊论文临床误诊误治2009,2295王宁卓超WANGNINGZHUOCHAO抗菌药物不合理应用情况分析期刊论文中国药业2006,1546张鸣鹤银屑病性关节炎辨证论治浅议会议论文20087刘皙寻常型银屑病从风湿热辨治的体会期刊论文新中医2001,3328王海燕陈立忠李雪松免疫抑制剂等联合用药治愈较重银屑病关节炎1例期刊论文中国现代医生2008,46319秦荣新孟兰英QINRONGXINMENGLANYING甲癣软膏的制备及疗效观察期刊论文中国药业2009,18610甄莉刘亚军不同浓度NAOH溶解疑甲癣病甲检测真菌41例期刊论文山西医科大学学报2000,311引证文献7条1费尚芬朱义广马珦玻孔令锋11种中药乙醇提取物抗甲真菌作用研究期刊论文河北大学学报（自然科学版）200542李虹黄欣施伟民中草药抗真菌研究新进展期刊论文中国真菌学杂志200913吴慧昊王军节花椒

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