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生物秀考研频道打造生物考研服务第一品牌HTP/WWBIOOCOM/KY/生物秀论坛资源共享、学术交流、互助社区HTP/WWBIOOCOM/BS/1CHAR_29983CHAR_29289CHAR_21270CHAR_23398CHAR_20064CHAR_39064CHAR_19982CHAR_32CHAR_31572CHAR_26696生生物物秀秀专专心心做做生生物物WWBBIOOCCOOM生生物物秀秀论论坛坛学学术术交交流流,资资源源共共享享,互互助助社社区WWBBIOOCCOOMM/BBS/来源承德医学院生物秀考研频道打造生物考研服务第一品牌HTP/WWBIOOCOM/KY/生物秀论坛资源共享、学术交流、互助社区HTP/WWBIOOCOM/BS/2第一章蛋白质的结构与功能本章要求1了解蛋白质是生命活动的物质基础的含义,掌握蛋白质的重要生理功能。2熟记蛋白质元素组成特点,多肽链的基本组成单位L,氨基酸,掌握肽键与肽链,了解医学上重要的多肽。3掌握蛋白质的构象。掌握蛋白质的一、二、三、四级结构的概念。4结合实例论述蛋白质结构与功能的关系。5熟记蛋白质重要的理化性质及有关的基本概念。6了解蛋白质的分离、纯化及结构分析。内容提要蛋白质是细胞组分中含量最丰富、功能最多的高分子物质。酶、抗体、多肽激素、转运蛋白、收缩蛋白以及细胞的骨架结构均为蛋白质。几乎在所有的生物过程中起着关键作用。蛋白质的基本组成单位是氨基酸。构成天然蛋白质的氨基酸有二十种,分为非极性、疏水性氨基酸;极性、中性氨基酸;酸性氨基酸和碱性氨基酸。氨基酸借助肽键连接成多肽链。多肽链是蛋白质分子的最基本结构形式。多肽链中氨基酸的排列顺序称为蛋白质的一级结构。蛋白质分子中的多肽链经折叠盘曲而具有一定的构象称为蛋白质的高级结构。又分为二、三、四级结构。二级结构是指局部或某一段肽链的空间结构,也就是肽链某一区段中主链骨架原子的相对空间位置。包括螺旋、折叠、转角和无规卷曲。三级结构是指整条肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置,也就是整条肽链的三维结构。四级结构是由两条或两条以上的多肽链借助次级键连接而成的结构。维持蛋白质空间结构的次级键有氢键、离子键、疏水键及范德华力。蛋白质在某些理化因素的作用下,其空间结构会发生改变,从而使其理化性质发生改变,生物学活性丧失,这称为蛋白质的变性作用。用某些方法可使蛋白质从溶液中析出,称为沉淀。蛋白质按形状分类可分为球状蛋白质和纤维状蛋白质。肌红蛋白和血红蛋白属于球状蛋白质。其功能均为运输或贮存O2。肌红蛋白由一条多肽链组成;血红蛋白由四条多肽链两条肽链,两条肽链组成。血红蛋白的氧解离曲线为S型而肌红蛋白的氧解离曲线为直角双曲线。用盐析及丙酮沉淀、电泳、透析、层析、分子筛及超速离心等方法可将蛋白质分离与纯化。用一定的方法可分析出多肽链中氨基酸的排列顺序。测试题一、单项选择题1测得某一蛋白质样品的含氮量为040G,此样品约含蛋白质多少克A200GB250GC640GD300GE635G2含有两个羧基的氨基酸是ACYSBGLUCASNDGLNELYS3在生理条件下,列哪种氨基酸残基的侧链所带的正电荷最多ACYSBGLUCLYSDTHREALA4下列哪种氨基酸为环状亚氨基酸AGLYBPROCTRPDTYRELYS5蛋白质分子中维持一级结构的主要化学键是A肽键B二硫键C酯键D氢键E疏水键6在中性条件下混合氨基酸在溶液中的主要存在形式是A兼性离子B非极性分子C带单价正电荷D疏水分子生物秀考研频道打造生物考研服务第一品牌HTP/WWBIOOCOM/KY/生物秀论坛资源共享、学术交流、互助社区HTP/WWBIOOCOM/BS/3E带单价负电荷7蛋白质的一级结构及高级结构决定于A分子中氢键B分子中盐键C氨基酸组成和顺序D分子内部疏水键E亚基8血清蛋白PI为47在下列哪种PH值溶液中带正电荷APH40BPH50CPH60DPH70EPH809蛋白质合成后修饰而成的氨基酸是A脯氨酸B胱氨酸C赖氨酸D蛋氨酸E天门冬氨酸10蛋白质变性是由于A氨基酸排列顺序的改变B氨基酸组成的改变C肽键的断裂D蛋白质空间构象的破坏E蛋白质的水解11蛋白质在280NM处有最大光吸收,主要是由下列哪组结构引起的A组氨酸的咪唑基和酪氨酸的酚基B酪氨酸的酚基和色氨酸的吲哚环C酪氨酸的酚基和苯丙氨酸的苯环D色氨酸的吲哚环和苯丙氨酸的苯环E苯丙氨酸的苯环和组氨酸的咪唑基12蛋白质溶液的稳定因素是A蛋白质溶液有分子扩散现象B蛋白质在溶液中有“布朗”运动C蛋白质分子表面带有水化膜和同种电荷D蛋白质溶液的粘度大E蛋白质分子带有电荷13蛋白质变性不包括A氢键断裂B肽键断裂C疏水键断裂D盐键断裂E二硫键断裂14关于蛋白质等电点的叙述下列哪项是正确的A在等电点处蛋白质分子所带净电荷为零B等电点时蛋白质变性沉淀C不同蛋白质的等电点相同D在等电点处蛋白质的稳定性增加E蛋白质的等电点与它所含的碱性氨基酸的数目无关15维持蛋白质分子二级结构的主要化学键是A氢键B二硫键C疏水键D离子键E磷酸二酯键16天然蛋白质中不存在的氨基酸是A脯氨酸B半胱氨酸C蛋氨酸D丝氨酸E瓜氨酸17有一混合蛋白质溶液,各种蛋白质的PI为46;50;53;67;73。电泳时欲使其中4种泳向正极,缓冲液的PH应该是A40B50C60D80E7018下列关于蛋白质结构叙述中,不正确的是A螺旋是二级结构的一种B无规卷曲是在一级结构基础上形成的C只有二、三级结构才能决定四级结构D一级结构决定二、三级结构E三级结构即具有空间构象19使蛋白质和酶分子显示巯基的氨基酸是A赖氨酸B半胱氨酸C胱氨酸D蛋氨酸E谷氨酸20蛋白质多肽链具有的方向性是A从5端到3端B35C从N断到C端DC端到NE以上都不是21螺旋每上升一圈相当于氨基酸残基的个数是A48B27C36D30E2522组成蛋白质的基本单位是AL氨基酸BD氨基酸CDDLEL,D氨基酸23关于蛋白质分子三级结构的描述,其中错误的是A具有三级结构的多肽链都具有生物学活性B决定盘曲折叠的因素是氨基酸残基C亲水基团多聚集在三级结构的表面D三级结构的稳定性主要是次级键维系E天然蛋白质分子均具有这种结构生物秀考研频道打造生物考研服务第一品牌HTP/WWBIOOCOM/KY/生物秀论坛资源共享、学术交流、互助社区HTP/WWBIOOCOM/BS/424具有四级结构的蛋白质特征是A分子中必定含有辅基B靠亚基的聚合和解聚改变生物学活性C依赖肽键维系四级结构的稳定性D在两条或两条以上具有三级结构多肽链的基础上,肽链进一步折叠、盘曲形成E每条多肽链都具有独立的生物学活性25关于蛋白质的四级结构正确的是A亚基的种类、数目都不定B一定有种类相同、而数目不同的亚基数C一定有多个相同的亚基D一定有多个不同的亚基E一定有种类不同、而数目相同的亚基数26下列正确描述血红蛋白HB概念是A是含有铁卟啉的单亚基球蛋白B血红蛋白氧解离曲线为S型C1个血红蛋白可与1个氧分子可逆结合D血红蛋白的功能与肌红蛋白相同E血红蛋白不属于变构蛋白27在饱和硫酸铵状态下析出的蛋白质是A清蛋白B纤维蛋白原C球蛋白D1球蛋白E28有一蛋白质水解产物在PH6用阳离子交换剂层析时,第一个被洗脱下来的氨基酸是AVALPI596BASPPI277CLYSPI974DTYRPI566EARGPI107629以下属于分子伴侣的是A胶原蛋白B细胞色素CCRNASEAD热休克蛋白HEATSHOCKPROTEINE谷胱甘肽GSH30蛋白质沉淀、变性和凝固的关系,下面叙述正确的是A变性蛋白不一定失去活性B变性蛋白一定要凝固C蛋白质沉淀后必然变性D变性蛋白一定沉淀E蛋白质凝固后一定变性31一个含有葡萄糖、N乙酰谷氨酸、天冬氨酸、精氨酸和丙氨酸的溶液,在PH6条件下通过阴离子交换树脂,被保留最多的是A精氨酸B天冬氨酸C丙氨酸D葡萄糖E亮氨酸32向卵清蛋白溶液中加入01NNAOH使溶液呈碱性,并加热至沸后立即冷却,此时A蛋白质变性沉出B蛋白质水解为混合氨基酸C蛋白质变性,但不沉出D蛋白质沉淀但不变性E蛋白质变性,冷却又复性33利用分子筛原理来分离蛋白质的技术是A阴离子交换层析B阳离子交换层析C凝胶过滤D亲和层析E透析34关于蛋白质变构,下列哪种叙述是错误的A氧对血红蛋白的作用属于正协同效应B氧对血红蛋白的作用属于负协同效应C氧与血红蛋白结合呈S型曲线D蛋白质变构效应是生物体内重要的代谢调节方式之一E氧是血红蛋白的变构剂35下列哪一条肽链不能形成螺旋AALAILEASNMETVALGLNBTYRTRPVALGLUALAASNCASNPROALAMETTYRALADHISTRPCYSETGLYALAEMETLYSTRPHISPHEALA36蛋白质分子中螺旋构象的特点是A靠盐键维持稳定B肽键平面充分伸展C多为左手螺旋D螺旋方向与长轴垂直E以上都不是37多肽链中主链骨架的组成是ACHNOCHNOCHNOBCONHCONHCONHCNCCNNCCNNCCNDCNHOCNHOCNHOECNOHCNOHCNOH38下面哪种方法沉淀出来的蛋白质具有生物学活性生物秀考研频道打造生物考研服务第一品牌HTP/WWBIOOCOM/KY/生物秀论坛资源共享、学术交流、互助社区HTP/WWBIOOCOM/BS/5A重金属盐B盐析C苦味酸D常温下有机溶剂E强酸强碱39以下有关结构域的叙述正确的是A结构域即亚基B通常在较小蛋白质分子中存在C与蛋白质分子整体以次极键相连结D与蛋白质分子整体以共价键相连结E以上都不是40可用于测定多肽N端氨基酸的试剂有A甲酸B溴化氰C丹磺酰氯D巯基乙醇E羟胺二、多项选择题1侧链带羟基的氨基酸包括ASERBTHRCPHEDTRPETYR2含硫氨基酸包括A蛋氨酸B苏氨酸C组氨酸D半胱氨酸E丝氨酸3下列哪些是酸性氨基酸A谷氨酸B赖氨酸C精氨酸D天冬氨酸E酪氨酸4蛋白质中的非共价键有A氢键B二硫键C盐键D肽键E疏水键5蛋白质的二级结构包括A螺旋B片层C转角D无规卷曲E双螺旋6下列哪些因素影响螺旋的形成AR基团的大小BR基团的形状CR基团所带电荷性质D螺旋的旋转方向E带同种电荷的R基团集中区7下列哪种蛋白质在PH5的溶液中带正电荷API为45的蛋白质BPI74CPI为7的蛋白质DPI65EPI为35的蛋白质8蛋白质变性后A肽键断裂B一级结构改变C空间结构改变D分子内亲水基团暴露E生物学活性改变9关于肽单元的叙述,下列哪些是正确的A是组成多肽链的二级结构的基本单位BC1,C,O,N,H和C2六个原子在一个平面内C两个碳呈反式结构D在肽单元中,与碳相连的单键可以自由旋转E相邻两个肽单元的相互位置与碳两侧单键旋转无关10蛋白质沉淀、变性和凝固的关系,下列叙述正确的是A蛋白质沉淀后必然变性B蛋白质凝固后一定会变性C变性蛋白一定要凝固D变性蛋白不一定会沉淀E变性就是沉淀,沉淀就是变性11谷胱甘肽的功能包括A解毒B是细胞内的重要还原剂C参与细胞间的信息传递D参与氨基酸的吸收及向细胞内的转运E是细胞的重要供氢体12下列哪些叙述符合折叠A只存在于纤维状蛋白质中B是蛋白质的二级结构C相邻肽链主链的NH和CO之间形成有规则的氢键D在折叠中,所有的肽键都参与链间氢键的交联E氢键与肽链的长轴接近垂直13蛋白质变性后会出现下列哪些现象A生物活性丧失B溶解度降低C粘度增加D易被蛋白酶水解E分子量发生改变14关于蛋白质的组成正确的有A由C、H、O、N等多种元素组成B氨基酸组成生物秀考研频道打造生物考研服务第一品牌HTP/WWBIOOCOM/KY/生物秀论坛资源共享、学术交流、互助社区HTP/WWBIOOCOM/BS/6C可水解成肽或氨基酸D含氮量约为1615关于蛋白质二级结构的论述哪些是正确的A一种蛋白质分子只存在一种二级结构形式B是多肽链本身折叠盘曲而成C主要存在形式有螺旋和折叠D维持二级结构的化学键是肽键和氢键E二级结构的存在形式是由氨基酸的组成决定16分子伴侣A是一种蛋白质B在蛋白质二硫键正确形成中起作用C可引导肽链正确折叠D在亚基聚合时发挥作用E是一种调控因子17蛋白质一级结构A是空间结构的基础B指氨基酸序列C并不包括二硫键D与功能无关E主要靠肽键维持稳定18蛋白质三级结构A存在于每个天然蛋白质分子中B是指局部肽链空间构象C包括结构域D属于高级结构E靠次级键维系19利用离子交换层析法分离纯化蛋白质,其原理是A蛋白质分子与其结合的配体不同B蛋白质的溶解度不同C组成蛋白质氨基酸的种类和数目不同D蛋白质的分子量不同E蛋白质所带的电荷不同20关于螺旋的叙述不正确的是A酸性氨基酸集中区域有利于螺旋的形成B每36个氨基酸残基为一周,螺距为34NMC氨基酸侧链R基团分布在螺旋的外侧D其结构靠氢键维持E螺旋是一种左手螺旋构象21用下列哪些方法可测定蛋白质分子量A密度梯度离心BSDS聚丙烯酰胺凝胶电泳C双缩脲反应D凝胶过滤E免疫沉淀法22关于蛋白质中的肽键哪些叙述是正确的A肽键可以自由旋转B比一般CN单键长CCN单键短D具有部分双键性质E与肽键相连的氢原子和氧原子呈反式结构23关于蛋白质结构的叙述正确的有A链内二硫键不是蛋白质分子构象的决定因素B带电荷的氨基酸侧链伸向蛋白质分子的表面,暴露在溶剂中C蛋白质的一级结构是决定高级结构的重要因素D只有极少数氨基酸的疏水侧链埋藏在分子的内部E所有蛋白质都有一、二、三、四级结构24使蛋白质沉淀但不变性的方法有A中性盐沉淀蛋白质B常温乙醇盐沉淀蛋白质C低温乙醇盐沉淀蛋白质D鞣酸沉淀蛋白质E重金属盐沉淀蛋白质25蛋白质变性A由肽键断裂而引起B可增加其溶解度C空间结构改变D可使其生物活性丧失三、填空题1组成蛋白质的元素有_、_、_、_。2不同蛋白质中含量相近的元素是_,其平均含量为_生物秀考研频道打造生物考研服务第一品牌HTP/WWBIOOCOM/KY/生物秀论坛资源共享、学术交流、互助社区HTP/WWBIOOCOM/BS/73氨基酸的种类很多,但构成天然蛋白质的氨基酸只有_种,根据氨基酸的结构和性质不同可将其分为以下四类_、_、_、_。4稳定蛋白质构象的次级键包括_,_,_,_等。5氨基酸在PI时以_离子形式存在,在PH大于PI的溶液中大部分以_离子形式存在,在PH小于PI的溶液中,大部分以_离子形式存在。6PH600时将一个丙、精、谷氨酸三种氨基酸的混合溶液进行电泳,移向正极的是_,移向负极的是_,留在原点的是_。7蛋白质由许多_通过_形成一条多肽链,在每条多肽链的两端有自由的_基和自由的_基,这两端分别称为_末端和_末端。8蛋白质二级结构的主要构象形式有_和_。9蛋白质颗粒表面的_和_是蛋白质亲水胶体稳定的两个因素。10维持蛋白质分子一、二、三、四级结构稳定的主要化学键分别是_、_、_、_。11蛋白质可受_、_或_的作用而水解,最后彻底水解为各种_的混合物。12常用的蛋白质沉淀法有_、_、_和_。其中_和_法沉淀,可保持蛋白质不变性。13由于肽单元上_原子所连的二个单键的_,决定了两个相邻肽单元平面的相对空间位置。14血红蛋白的氧解离曲线为_,说明第一个亚基与O2结合可_第二个亚基与O2结合,这被称为_效应。15用凝胶过滤分离蛋白质,分子量较小的蛋白质在柱中滞留的时间较_,因此最先流出凝胶柱的蛋白质,其分子量_。16蛋白质可与某些试剂作用产生颜色反应,可用作蛋白质_和_分析。常用的颜色反应有_和_。17蛋白质变性主要是破坏了_键,使其_结构遭到破坏,而_结构未破坏;其_性质改变,_丧失。18分子伴侣的化学本质是_,其功能是_和_19蛋白质在_NM处,对紫外光有最大吸收,据此可对蛋白质进行_。20用电泳分离蛋白质时,其移动速率主要取决于蛋白质所带_、_和_。四、名词解释1肽单元PEPTIDEUNIT2蛋白质变性作用DENATURATIONOFPROTEIN3蛋白质等电点ISOELETRICPOINTOFPROTEIN4肽键PEPTIDEBOND5分子伴侣MOLECULARCHAPERON6模序MOTIF7变构效应ALLOSTERICEFECT8协同效应COOPERATIVEEFECT9结构域DOMAIN10蛋白质的一级结构PRIMARYSTRUCTURE11蛋白质的三级结构TERTIARYSTRUCTURE生物秀考研频道打造生物考研服务第一品牌HTP/WWBIOOCOM/KY/生物秀论坛资源共享、学术交流、互助社区HTP/WWBIOOCOM/BS/812蛋白质沉淀13透析DIALYSIS14螺旋15亚基SUBUNIT五、问答题1酸性氨基酸和碱性氨基酸各包括什么2哪些氨基酸属于必需氨基酸3使蛋白质变性的因素有哪些变性后性质有哪些改变4什么是蛋白质的一、二、三、四级结构,维系各级结构的键或力是什么5写出四种有甘氨酸参与合成的不同类型的生物活性物质,并分别说明他们的主要作用6简述分子伴侣在蛋白质分子折叠中的作用7举例说明蛋白质的结构与功能的关系8列举分离纯化蛋白质的主要方法,并扼要说明其原理9有哪些方法可用于蛋白质或多肽链的N末端分析或C末端分析10沉淀蛋白质的方法有哪些各有何特点参考答案一、单项选择题1B2B3C4B5A6A7C8A9B10D11B12C13B14A15A16E17E18C19B20C21C22D23A24B25A26B27A28B29D30E31B32C33C34B35C36D37B38B39C40C二、多项选择题1ABE2AD3AD4ACE5ABCD6ABCE7BCD8CE9ABCD10BD11ABD12BCDE13ABCD14ABCD15BCE16ABC17ABE18ACDE19CE20ABE21AB22CDE23BC24AC25CD三、填空题1CHON2N16320非极性疏水性氨基酸中性极性氨基酸酸性氨基酸碱性氨基酸4氢键盐键疏水键范德华力5兼性离子负正6谷氨酸精氨酸丙氨酸7氨基酸肽键羧基氨基碳氮8螺旋折叠9电荷层水化膜10肽键氢键疏水键次级键11酸碱酶氨基酸12盐析法有机溶剂沉淀某些酸类沉淀重金属盐沉淀盐析低温有机溶剂13碳自由旋转度生物秀考研频道打造生物考研服务第一品牌HTP/WWBIOOCOM/KY/生物秀论坛资源共享、学术交流、互助社区HTP/WWBIOOCOM/BS/914S型促进正协同15长大16定性定量茚三酮反应双缩脲17次级键空间一级理化生物学活性18蛋白质可使肽链正确折叠在二硫键正确配对中起重要作用19280定量测定20电荷数量分子量大小分子形状四、名词解释1在多肽分子中肽键的6个原子C1,C,O,N,H,C2位于同一平面,被称为肽单元肽键平面。2在某些理化因素的作用下,使蛋白质的空间结构受到破坏但不包括肽键的断裂,从而引起蛋白质理化性质的改变及生物学活性的丧失,这种作用称为蛋白质的变性作用。3当蛋白质溶液处于某一PH值时,其分子解离成正负离子的趋势相等成为兼性离子,净电荷为零,此时该溶液的PH值称为该蛋白质的等电点。4一个氨基酸的氨基与另一个氨基酸的羧基脱去一分子的水,所形成的酰胺键称为肽键。5是蛋白质合成过程中形成空间结构的控制因子,是一类帮助多肽链正确折叠的蛋白质它可逆地与未折叠肽段的疏水部分结合随后松开,如此重复进行可以防止错误的聚集发生,使肽链正确折叠。分子伴侣对于蛋白质分子中二硫键的正确形成起到重要作用。6在蛋白质分子中,可发现二个或三个具有二级结构的肽段,在空间上相互接近,形成一个特殊的空间构象,并具有相应的功能,被称为模序。7蛋白质空间构象的改变伴随其功能的变化,称为变构效应。具有变构效应的蛋白质称为变构蛋白,常有四级结构。以血红蛋白为例,一分子O2与一个血红素辅基结合,引起亚基构象变化,进而引起相邻亚基构象变化,更易与O2结合。8是指蛋白质中的一个亚基与其配体结合后,能影响该蛋白质中另一个亚基与配体的结合能力。如果是促进作用则称为正协同效应;反之,则称为负协同效应。9分子量大的蛋白质三级结构常可分割成1个和数个球状或纤维状的区域,折叠的较为紧密,各行其功能,称为结构域。10蛋白质分子中氨基酸的组成和排列顺序。11是指整条多肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置,也即整条多肽链所有原子在三维空间的排布位置。12分散在溶液中的蛋白质分子发生凝聚,并从溶液中析出的现象。13利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法称为透析。14多肽链的主链围绕中心轴有规律的螺旋式上升,每36个氨基酸残基盘绕一周,形成的右手螺旋,称为螺旋。15在具有四级结构的蛋白质分子中,其中每条具有三级结构的多肽链称为亚基,亚基和亚基之间以非共价键相连接。五、问答题1酸性氨基酸包括天冬氨酸和谷氨酸。碱性氨基酸包括精氨酸、组氨酸和赖氨酸。2苏氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、赖氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸。3引起变性的因素有物理因素如高温、紫外线、X射线、超声波、剧烈振荡等;化学因素如强酸、强碱、尿素、去污剂、重金属、浓酒精等。变性后生物学活性丧失;溶解度下降;粘度增加;易被蛋白酶水解。4多肽链中氨基酸残基的组成和排列顺序称为蛋白质的一级结构,连接一级结构的键是肽键。蛋白质的二级结构是指蛋白质主链原子的局部空间结构,并不涉及氨基酸残基侧链构象,二级生物秀考研频道打造生物考研服务第一品牌HTP/WWBIOOCOM/KY/生物秀论坛资源共享、学术交流、互助社区HTP/WWBIOOCOM/BS/10结构的种类有螺旋、折叠、转角和无规卷曲。氢键是维系二级结构最主要的键。三级结构是指多肽链主链和侧链原子的空间排布。次级键维持其稳定,最主要的键是疏水键。四级结构是指两条以上具有三级结构的多肽链之间缔合在一起的结构。其中每条具有三级结构的多肽链称为亚基,一般具有四级结构的蛋白质才有生物学活性。维持其稳定的是次级键,如氢键、盐键、疏水键、范德华力等。5GLY参与合成谷胱甘肽GSH。GSH的活性基团是半胱氨酸巯基SHGSH在体内的重要功能之一是保护某些蛋白质或酶分子中的SH不被氧化,从而维持各自的生物学功能。甘氨酸、丝氨酸、组氨酸、色氨酸都可提供“一碳基团”。“一碳基团”的主要生理功能是作为合成嘌呤和嘧啶的原料。GLY和琥珀酰COA及FE2合成血红素,而血红素是血红蛋白和肌红蛋白的辅基,在氧的运输和贮存中发挥极其重要的作用。GLY可以和游离型胆汁酸胆酸、鹅脱氧胆酸结合,形成结合型胆汁酸甘氨胆酸和甘氨鹅脱氧胆酸。胆汁酸是界面活性物质,他们在脂肪的消化和吸收中起重要作用。另外,甘氨酸和其他氨基酸都是蛋白质、肽类合成的原料。蛋白质、肽具重要的生理功能。尤其是结构蛋白胶原中,甘氨酸含量特别多。6分子伴侣是一类帮助新生多肽链正确折叠的蛋白质。它可逆地与未折叠肽段的疏水部分结合,随后松开,如此重复进行,可防止错误的聚集发生,使肽链正确折叠。分子伴侣在蛋白质二硫键的正确配对中也起重要作用。7一级结构是空间结构和功能的基础。一级结构相似其功能也相似,例如不同哺乳动物的胰岛素一级结构相似,仅有个别氨基酸差异,故他们都具有胰岛素的生物学功能;一级结构不同,其功能也不同;一级结构发生改变,则蛋白质功能也发生改变,例如血红蛋白由2条链和2条链组成,正常人链的第6位谷氨酸换成了缬氨酸,就导致分子病镰刀状红细胞贫血的发生,患者红细胞带氧能力下降,易溶血。空间结构与功能的关系也很密切,空间结构改变,其理化性质与生物学活性也改变。如核糖核酸酶变性或复性时,随之空间结构破坏或恢复,生理功能也丧失或恢复。变构效应也说明空间结构改变,功能改变。8蛋白质分离纯化的方法主要有盐析、透析、凝胶过滤分子筛、电泳、离子交换层析色谱、超速离心等方法。各自原理盐析主要是利用不同蛋白质在不同浓度的中性盐溶液中的溶解度不同,向蛋白质溶液加入中性盐,破坏水化膜和电荷两个稳定因素,使蛋白质沉淀。透析和凝胶过滤均根据分子大小不同而设计的。透析是利用仅有小分子化合物能通透半透膜,使大分子蛋白质与小分子化合物分离,达到除盐目的。凝胶过滤柱内填充带小孔的葡聚糖颗粒,样品中小分子蛋白质进入颗粒,而大分子蛋白质则不能进入,由于二者路径长短不同,故大分子先于小分子流出柱,可将蛋白质按分子量大小不同而分离。蛋白质是两性电解质,在不同PH溶液中所带电荷种类和数量不同,故在电场中向相反的电极方向泳动,电泳的速度取决于场强、蛋白质所带电荷数量和其分子大小与形状。如在层析柱内,带电荷蛋白质可与带相反电荷的离子交换树脂相结合,然后用盐溶液洗脱,随着盐浓度增加,电荷少与多的蛋白质先后被洗脱出来,分部收集洗脱液,达到分离蛋白质的目的。根据不同蛋白质的密度与形态区别,可用超速离心法,使其在不同离心力作用下沉降,达到分离目的。9多肽链的N末端和C末端分析,均可用化学法和酶法。N末端分析可用2,4二硝基氟苯法、二甲基氨基萘磺酰氯法、丹伯磺酰氯法(DABSYLCL)和EDMAN降解法,以及氨基肽酶法。C末端分析可用肼解法和羧基肽酶法。生物秀考研频道打造生物考研服务第一品牌HTP/WWBIOOCOM/KY/生物秀论坛资源共享、学术交流、互助社区HTP/WWBIOOCOM/BS/110沉淀蛋白质的主要方法有盐析、有机溶剂、某些酸类、重金属盐、加热凝固。上述方法的特点中性盐破坏蛋白质的水化膜和电荷,采用不同浓度盐可将不同蛋白质分段析出,盐析得到的蛋白质具有生物学活性。有机溶剂可破坏蛋白质的水化膜使其沉淀,常温下操作,蛋白质无活性,低温下操作,则有活性。某些酸类如钨酸、三氯醋酸等的酸根与带正电荷的蛋白质结合而沉淀,前提是溶液的PH值小于PI。该法得到的蛋白质无活性。与酸类相反,重金属离子PB2等可与带负电荷的蛋白质结合而沉淀,故要求溶液PH大于PI。该法得到的蛋白质也无活性。在等电点时加热蛋白质可形成凝块沉淀。该法得到的是变性蛋白质。第二章核酸的结构与功能本章要求1熟悉核酸的分类、细胞分布及其生物学功能。2熟悉碱基、核苷和核苷酸的基本概念及其结构。掌握常见核苷酸的缩写符号。3掌握核酸元素组成特点。掌握两类核酸(DNA与RNA)分子组成的异同。掌握核苷酸的连接,掌握核酸的一级构的概念。4掌握DNA的双螺旋结构及碱基配对规律。了解DNA的三级结构。5熟记核酸的理化性质及相关的重要概念,准确叙述DNA变性、复性及分子杂交的概念。6熟悉RNA的结构与功能。内容提要核酸是生物体遗传的物质基础。各种生物都含有两类核酸,即核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)。病毒只含有DNA或RNA。核酸的基本组成单位是核苷酸,核酸是由数十个到数十万核苷酸连接而成的,故也称为多核苷酸。核苷酸由碱基、戊糖和磷酸组成。碱基与戊糖结合后的生成物称核苷。核苷与磷酸以磷酯键相连称为核苷酸,又分为一磷酸核苷、二磷酸核苷和三磷酸核苷等。核酸分子的结构分为三级一级结构是组成核酸的核苷酸按一定顺序排列,以3,5磷酸二酯键相连的结构。具3和5末端。二级结构及三级结构统称为高级结构,DNA和RNA各有其特点。DNA的二级结构为双螺旋结构。其特点为双链双螺旋、两条链反向平行、碱基向内互补(AT配对,GC配对),氢键和碱基堆积力维持双螺旋结构的稳定。DNA的三级结构,原核生物为超螺旋;真核生物为核小体,核小体形成的串珠状结构再进一步卷曲成筒状,即染色质纤维。后者再形成染色体。RNA为单链结构,局部可形成双螺旋结构。RNA按功能不同可分为三类,即信使RNA(MRNA)、转运RNA(TRNA)及核蛋白体RNA(RRNA)。MRNA分子为线型单链结构,5端有一个7甲基鸟苷三磷酸(M7GTP)的“帽”,3端有多聚腺苷酸(POLYA)的“尾”,中间为密码子,从53每三个相邻的核苷酸决定一个氨基酸。MRNA是蛋白质生物合成的模板。TRNA的二级结构呈三叶草型。有氨基酸臂,可结合氨基酸;有反密码环,其上的反密码子可识别MRNA上的密码子;另外还有DHU环、TC环和附加叉。TRNA的三级结构为倒“L”型。RRNA不单独存在,它与蛋白质结合成核蛋白体,作为蛋白质合成的场所。DNA双螺旋的一个重要物理特性是双链可分开成单链及重新形成双链。试管内这种分与合的过程,分别称为变性和复性。DNA在260NM波长处具有强吸收。DNA具有增色效应和减色效应。变性温度TM值的大小与核酸分子中的GC对含量多少及核酸分子的长度有关。如果把不同的DNA链放在同一溶液中作变性处理,或把单链DNA与RNA放在一起,只要有某些区域有成立碱基配对的可能,它们之间就可形成局部的双链。这个过程称为核酸杂交。在生物秀考研频道打造生物考研服务第一品牌HTP/WWBIOOCOM/KY/生物秀论坛资源共享、学术交流、互助社区HTP/WWBIOOCOM/BS/12核酸杂交的基础上发展起来的一种用于研究和诊断的新技术称探针技术。用已知序列的核苷酸片段判断被测DNA是否与其具有同源性。测试题一、单项选择1组成核酸的基本结构单位是A核糖和脱氧核糖B磷酸和核糖C含氮碱基D单核苷酸E多核苷酸2下列哪种碱基几乎仅存在于RNA中A腺嘌呤B鸟嘌呤C胞嘧啶D尿嘧啶E胸腺嘧啶3下列哪种碱基几乎仅存在于DNA中A腺嘌呤B鸟嘌呤C胞嘧啶D尿嘧啶E胸腺嘧啶4真核细胞的DNA主要存在于A线立体B核染色质C粗面内质网D溶酶体E滑面内质网5DNA携带生物遗传信息这一事实意味着什么A不论哪一物种的碱基组成均应相同B病毒的侵染是靠蛋白质转移至宿主细胞来实现的C同一生物不同组织的DNA,其碱基组成相同DDNA的碱基组成随机体年龄及营养状况而改变EDNA以小环状结构存在6关于DNA和RNA彻底水解产物的比较,下列哪项是正确的A碱基相同,戊糖不同B部分碱基相同,戊糖相同C碱基不同,戊糖相同D碱基相同,戊糖相同E部分碱基相同,戊糖不同7假尿苷中的糖苷键是ANN键BCC键CNC键DCOENO8核酸溶液在下列哪个波长有最大光吸收A280NMB260NMC340NMD225NE400N9核酸中核苷酸之间的连接方式是A2,3磷酸二酯键B35C2,5磷酸二酯键D糖苷键E氢键10可用于测量生物样品中核酸含量的元素是A碳B氢C氧D氮E磷11含有稀有碱基比例较多的核酸是A核DNAB线立体DNACTRNADMRNAERRNA12关于DNA碱基组成的规律,下列哪项是正确的ADNA主要由A、G、C、U四种碱基组成B在DNA中,AT/CGAC/GTCDNAAG/TC1DDNA中的碱基组成具有种族特异性和器官特异性E以上都不是13DNA的二级结构是A螺旋B片层C转角D超螺旋结构E双螺旋结构14核酸在260NM处有最大光吸收是因为A氢键B磷酸二酯键C嘌呤和嘧啶环上的共轭双键D糖苷键E核糖和脱氧核糖的呋喃型环状结构15关于TRNA的叙述哪项是错误的ATRNA二级结构呈三叶草形BTRNA分子中含有稀有碱基CTRNA分子中有一个额外环DTRNA的二级结构有二氢尿嘧啶环E反密码环上有CCA三个碱基组成反密生物秀考研频道打造生物考研服务第一品牌HTP/WWBIOOCOM/KY/生物秀论坛资源共享、学术交流、互助社区HTP/WWBIOOCOM/BS/13码子16在DNA双螺旋结构中,互补碱基配对规律是AAT,GUBAT,UCCGCTADACGTEAG,TC17WATSONCRICK的DNA结构模型是指A三螺旋结构B三叶草结构C右手双螺旋结构D核小体结构E左手双螺旋结构18维持DNA双螺旋横向稳定性的力是A碱基堆积力B碱基对之间的氢键C螺旋内侧疏水力D二硫键E磷酸二酯键19关于BDNA双螺旋的叙述,下列哪项是正确的ADNA分子由两条以糖磷酸作骨架的双链组成B以左手螺旋的方式围绕同一公共轴有规律地盘旋C每旋转一周包括10个碱基对D每一螺距为054NME双螺旋表面只有深沟20核酸变性会出现下列哪种现象A减色效应B增色效应C粘度增加D失去对紫外线的吸收能力E分子量发生改变21DNA变性是指A分子中磷酸二酯键断裂B多核苷酸链解聚CDNA分子由超螺旋转变为双螺旋D互补碱基之间氢键断裂EDNA分子中碱基丢失22现有一段DNA,其核苷酸的序列为5GGATGCAATGCGCATGGC33CCTACGTTACGCGTAACCG5它的TM值是A60B68C64D62E7823下列哪种分子含有核糖胸苷酸ARRNABDNACTRNADMRNAEHNRNA24关于DNA和RNA的叙述,下列哪项是正确的ADNA和RNA分子中均含二氢尿嘧啶和假尿嘧啶等稀有碱基BDNA和RNA的二级结构呈现三叶草结构CDNA和RNA的热变性随温度上升而逐渐发生DDNA和RNA都是单链线性分子EDNARNA变性后均出现增色效应25从某细菌中分离的DNA样品内含有151的腺嘌呤,那么其它碱基的百分含量是AG349BC151CT349DG698EC30226下列哪一种力不参与维持DNA双螺旋的稳定A碱基堆积力B互补碱基对间的氢键C范德华力D磷酸基团上的负电荷与介质中的阳离子之间形成的离子键E二硫键27关于真核细胞MRNA的叙述,下列哪项是错误的A在5端有帽子结构,在3端有多聚A尾巴B生物体内各种MRNA的长短差别很大C三类RNA中MRNA的合成率和转化率最快D聚A尾巴是DNA的转录产物E真核细胞的MRNA前身是HNRNA,在细胞核内合成,在核内剪接、加工而成28关于DNA变性的叙述哪一项是正确的A升高温度是DNA变性的唯一原因BDNA热变性是一种渐进过程,无明显分界线C变性必有DNA分子中共价键断裂D核酸变性是DNA的独有现象,RNA无此现象E凡引起DNA氢键断裂的因素都可使其变性生物秀考研频道打造生物考研服务第一品牌HTP/WWBIOOCOM/KY/生物秀论坛资源共享、学术交流、互助社区HTP/WWBIOOCOM/BS/1429在下列哪一种情况下,互补的两条DNA单链将会结合成DNA双链A变性B退火C加连接酶D加聚合酶E以上都不是30关于TRNA的叙述,下列哪项是错误的ATRNA由7090余个核苷酸构成BTRNA的3末端都为CPAPAOH,用来接受活化的氨基酸CTRNA含有1020的稀有碱基DTRNA分子中有反密码环E三叶草型是TRNA共同的二级结构31关于RRNA的叙述,下列哪项是错误的ARRNA是细胞内含量最多的RNABRRNA与核糖体蛋白共同组成核糖体C核糖体由易于解聚的大、小两个亚基组成D真核细胞的核糖体包括5S、16S和23S三种RRNAERRNA分子中有一些能配对的区域形成局部的双链32有关核酶的正确描述是A它是DNA分子,但具有催化功能BRNAC它是位于细胞核内的酶D它是专门水解核酸的蛋白质E它是由RNA和蛋白质构成的酶33有关DNA变性,错误的叙述是A变性后生物学活性改变B变性后3,5磷酸二酯键破坏C变性后理化性质改变D氢键破坏成为两股单链DNAE变性后粘度降低,出现高色效应34有关核小体的错误叙述是ADNA和组蛋白共同构成核小体BH2A、H2B、H3和H4各两分子组成的八聚体与DNA双螺旋构成核心颗粒CRNA和组蛋白共同构成核小体DDNA和组蛋白H1构成核小体连接区E核小体是染色体的基本单位35有关复性的正确叙述为A不同的变性DNA分子在缓慢降温后,都可结合成双链复性B核酸热变性后,使其温度缓慢下降,变性的两股单链DNA可复性C变性DNA的浓度越高,复性越慢D热变性DNA迅速冷却后即可相互结合E热变性的DNA迅速降温过程称为退火36关于核酸分子杂交的错误叙述是A通过分子杂交技术,可从基因文库中筛选出目的基因BRNA可与编码的多肽链结合成为杂交分子C分子杂交原理可用于聚合酶链式反应D不完全互补的二链在复性时的结合称为杂交E核酸杂交类型有DNADNA、DNARNA、RNARNA37DNA的解链温度是指ADNA开始解链时的温度BA260在达到最大值时的温度CA260在达到最大值50时的温度DA28050EDNA完全解链时的温度38TM值愈高的DNA分子,其AGC含量愈高BAT含量愈高CAGDTCEAC含量愈低39下列各DNA分子中,碱基组成比例各不相同,其中哪种DNA的TM最低AAT占15BGC占25CGC40DAT80EGC占3540DNA的一级结构是指A单核苷酸通过3,5磷酸二酯键连接而成的多核苷酸链B核苷酸中核苷与磷酸的连接链C磷酸和戊糖的链形骨架DDNA分子中碱基通过氢键连接链EDNA反向平行的双螺旋链二、多项选择题1DNA存在于A粗面内质网B线粒体C溶酶体生物秀考研频道打造生物考研服务第一品牌HTP/WWBIOOCOM/KY/生物秀论坛资源共享、学术交流、互助社区HTP/WWBIOOCOM/BS/15D染色体E高尔基体2DNA水解后可得到下列哪些产物A磷酸B脱氧核糖C腺嘌呤D胞嘧啶E尿嘧啶3TRNA二级结构的特征A有反密码环B3端有多聚AC有氨基酸臂D为倒L型E有DHU环4关于DNA的二级结构正确的是A为右手螺旋B两条多核苷酸链反向平行C碱基平面与螺旋轴垂直D螺旋每旋转一周含36个碱基对E为螺旋5真核细胞RRNA有哪几种A28SB18SC16SD58SE5S6关于DNA分子组成的叙述,下列哪些是正确的AAG/CT1BA/T1CA/C1DAG/GC1E碱基脱氧核糖PO41117关于TRNA的叙述,下列哪些是正确的A三级结构呈倒L型B有反密码环C含有多种稀有碱基D3端有CCAOH序列E5POLYA序列8关于MRNA的叙述,下列哪些是正确的A由大小两个亚基组成B二级结构含有局部双螺旋C3端有CCAOH结构D在三种RNA中更新速度最快E由7090个核苷酸组成9关于RNA的叙述,下列哪些是正确的ATRNA的分子量最小BTRNA分子中有反密码子,可与MRNA的密码子配对C通常由单链组成,分子内可形成局部双螺旋DRRNA的含量在RNA中占的比例最大10DNA与下列哪些重要的生命活动有关A复制B转录C重组D逆转录E修复11DNA有下列哪几种不同的结构AADNABDNACXDNADYDNAEZDNA12核酸杂交是A原来完整的DNA链变性后复性B来源不同的DNA链某些区域能建立碱基配对C突变的DNA所缺失的部分D单链DNA与其转录的RNA之间建立的碱基配对E被测DNA与有同源性探针之间的碱基配对13根据DNA双螺旋结构,DNA可具有以下哪些功能A携带遗传信息B进行半保留复制C有核酶功能D进行切除修复EDNA与同源RNA杂交14TRNA分子中的稀有核苷酸包括A假尿嘧啶核苷酸B二氢尿嘧啶核苷酸C胸腺嘧啶核苷酸D嘌呤脱氧核苷酸E次黄嘌呤核苷酸15含有腺苷酸的辅酶有ANADBFMNCNADPDFADECOASH16DNA二级结构的特点有A两条多核苷酸链反向平行围绕同一中心轴构成双螺旋B以AT,GC方式形成碱基配对C双链均为右手螺旋D链状骨架由脱氧核糖和磷酸组成E螺旋每旋转一周含36个碱基对17DNA变性时发生的变化是A链间氢键断裂,双螺旋结构破坏B增色效应C粘度增加D沉降速度增加E共价键断裂18MRNA的特点有A分子大小不均一B有3多聚腺苷酸尾C有编码区D有5CCA结构E有三叶草结构生物秀考研频道打造生物考研服务第一品牌HTP/WWBIOOCOM/KY/生物秀论坛资源共享、学术交流、互助社区HTP/WWBIOOCOM/BS/1619TM是表示DNA的A最适温度B变性温度C水解温度D解链温度E复性温度20DNA分子杂交的基础是ADNA变性后在一定条件下可复性BDNA的粘度大C不同来源的DNA链某些区域能建立碱基配对DDNA变性双链解开后,在一定条件下可重新缔合EDNA的刚性与柔性21DNA分子中的碱基组成是AACGTBCGCATDCGATEAG22有关热变性DNA复性的正确说法是A热变性后迅速冷却有利于复性B热变性后缓慢冷却有利于复性C复性后成为单链结构D复性又叫退火E变性DNA浓度高易于复性23核小体是指A原核生物的细胞核B真核生物的细胞核C由DNA和组蛋白组成D组蛋白包括H2A、H2B,H3,H4各2分子和H1E核心颗粒之间的连接区是DNA和H1组蛋白构成24有关核酶的正确描述为A其化学本质是蛋白质B它的生理功能是水解某些RNAC可作为治疗肿瘤和病毒的手段之一D是核酸和蛋白质组成的结合蛋白质酶类E是具有

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