甾体激素类药物

1、氢化可的松、醋酸地塞米松、地氢化可的松、醋酸地塞米松、地 塞米松磷酸钠、曲安奈德、塞米松磷酸钠、曲安奈德、甲睾甲睾 酮、丙酸睾酮、苯丙酸诺龙、酮、丙酸睾酮、苯丙酸诺龙、黄黄 体酮、醋酸甲地孕酮、米非司酮体酮、醋酸甲地孕酮、米非司酮、 雌二醇、炔雌醇、炔诺酮和炔诺雌二醇、炔雌醇、炔诺酮和炔诺 孕酮等甾体激素类药物的基本结孕酮等甾体激素类药物的基本结 构与分类、鉴别试验和含量测定。构与分类、鉴别试验和含量测定。 基本内容基本内容 掌握掌握甾体激素类药物的基本结构与甾体激素类药物的基本结构与 分类；各类药物的结构特征及其与分类；各类药物的结构特征及其与 分析方法的关系。分析方法的关系。 熟悉熟悉甾体

2、激素类药物的紫外分光光甾体激素类药物的紫外分光光 度法、四氮唑比色法和异烟肼比色度法、四氮唑比色法和异烟肼比色 法法；柯柏反应比色法；柯柏反应比色法 。 了解了解 甾体激素类药物的特殊杂质甾体激素类药物的特殊杂质 及其检查方法。及其检查方法。 基本要求基本要求 第一节基本结构与分类第一节基本结构与分类 甾体激素是一类具有甾体结构的甾体激素是一类具有甾体结构的 激素类药物激素类药物 维持生命维持生命 调节性功能调节性功能 免疫调节免疫调节 皮肤病治疗皮肤病治疗 生育控制生育控制 甾甾 一、母核一、母核 AB CD 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17

3、 环戊烷骈多氢菲环戊烷骈多氢菲 C C10 10、 、C C13 13位上基团为角甲基 位上基团为角甲基 C20 C21 19 18 甾甾 环上双键的表示方法：环上双键的表示方法： n 用用“ ”表示表示 ,双键的位置写在双键的位置写在 的右上角。的右上角。 双键位置 双键位置 4 5 4 1 4 2 5 1,4 5 6 5 10 5 5(10) 甾环构型 位取代位取代 n二、分类二、分类 按生理作用分为：按生理作用分为： 肾上腺皮质激素 性激素 雄性激素 雌性激素 雌激素 孕激素 1肾上腺皮质激素肾上腺皮质激素 C CH2OH O O HO 17 18 19 20 21 皮质酮皮质酮的衍生物

4、的衍生物 4-3-酮结构酮结构 C CH2OH O O去氧皮质酮去氧皮质酮 n代表药物有：代表药物有： C CH2OH O O OOH 可的松可的松 C CH2OH O O OHHO 氢化可的松氢化可的松 n人工合成药物：人工合成药物： C CH2OH O O OHHO CH3 F 地塞米松地塞米松 C CH2O H O O O HHO 氢化泼尼松氢化泼尼松 (泼尼松龙泼尼松龙) n 结构特点结构特点： 含有含有21个个C A环：环： 4 4-3-3-酮结构（酮结构（ , , - -不饱和不饱和 酮）酮） 17位：醇酮基，位：醇酮基，有还原性有还原性。 C CH2OH O O HO 17 18

5、 19 20 21 n 供分析官能团供分析官能团： A环的环的 4-3-酮酮 17位的醇酮基位的醇酮基 17、21-二羟基二羟基-20-酮酮 11位羟基或羰基受立体效应影位羟基或羰基受立体效应影 响响,无利用价值。无利用价值。 C CH2OH O O HO 17 18 19 20 21 n2雄性激素及蛋白同化激素雄性激素及蛋白同化激素 O OH 17 18 19 睾丸素睾丸素的衍生物的衍生物 O OH CH3 代表药物：代表药物： O OCOC2H5 甲睾酮甲睾酮 丙酸睾酮丙酸睾酮 蛋白同化激素在睾丸素基础上结蛋白同化激素在睾丸素基础上结 构修饰得到，如构修饰得到，如 苯丙酸诺龙苯丙酸诺龙 O

6、 OCOCH2CH2 n结构特点：结构特点： 含有含有19个个C A环的环的 4-3-酮酮 17位羟基、甲基、酯位羟基、甲基、酯 供分析官能团：供分析官能团： A环环 4-3-酮酮 O OH 17 18 19 n3孕激素孕激素 CO O CH3 17 18 19 20 21 黄体酮黄体酮 O CH3H CH3 HH CH3 O CH3 OCH3 O 醋酸甲地孕酮醋酸甲地孕酮 CO O CH3 OCOCH3 CH3 安宫黄体酮安宫黄体酮 米非司酮米非司酮 n 结构特点：结构特点： 含有含有21个个C A环的环的 4-3-酮酮 17位位甲酮基甲酮基 供分析官能团：供分析官能团： A环的环的 4-3

7、-酮酮 17位上的甲酮基。位上的甲酮基。 CO O CH3 17 18 19 20 21 n4雌激素雌激素 O H HO 17 18 OH HO CCH 雌二醇雌二醇 炔雌醇炔雌醇 n 结构特点：结构特点： 含有含有18个个C A环：苯环，环：苯环， 3位上有酚羟基，位上有酚羟基， 10位无甲基位无甲基 17位：羟基、乙炔基位：羟基、乙炔基 供分析官能团供分析官能团： A环的酚羟基及环的酚羟基及17位的羟基乙炔基位的羟基乙炔基 OH HO CCH l口服避孕药口服避孕药 O C OH CH O C O H C H A环有环有 4-3-酮结构；酮结构； 有的第有的第17位有羟基和乙位有羟基和乙

8、炔基；炔基； 第第10位无甲基。位无甲基。 炔诺酮炔诺酮 异炔诺酮异炔诺酮 小结小结 甾体激素甾体激素碳原子数碳原子数 A环环 17位取代基位取代基 肾上腺皮质激素肾上腺皮质激素21 4-3-酮酮醇酮基醇酮基 雄性激素雄性激素19 4-3-酮酮 -OH -CH3 孕激素孕激素 21 4-3-酮酮 甲酮基甲酮基 雌激素雌激素 18 苯环苯环 C3-酚酚OH -OH -CCH 第二节鉴别试验第二节鉴别试验 一、呈色反应一、呈色反应 黄褐色醋酸可的松 42SO Con.H 1母核母核 能与能与H2SO4，H3PO4， ，HClO4， ，HCl等等 呈色和荧光；呈色和荧光； 机制机制：母核的质子化。：

9、母核的质子化。 如：如： 显显 色色 荧光荧光 加水稀释加水稀释 - nm515 42 nm465 42 max max SOHor -SOH 荧光性红色 稀释 稀水 黄色 乙醇 雌激素类药物 vKober反应：反应： 指雌激素雌激素与硫酸硫酸乙醇乙醇共热呈色， 用水或稀硫酸稀释后，重新加热发 生颜色改变，并在515nm附近有最大 吸收的反应。（特征反应） C C O O H O H H n2官能团官能团 n C17-醇酮基醇酮基: 肾上腺皮质激素肾上腺皮质激素 类药物特征反应。类药物特征反应。 机理：机理：C17-醇酮基有强还原性，与 氧化剂作用，被氧化成水合醛。水合醛。 C C H 2 O

10、 H O 氧化剂 水和醛 斐林试剂 肾上腺皮质激素 红色 OCu 2 水和醛 氨制 肾上腺皮质激素Ag TSAgNO 3 水和醛甲臢肾上腺皮质激素 有色 BTor TTC TTCTTC：氯化三苯四氮唑氯化三苯四氮唑( (红四氮唑红四氮唑RTRT） BTBT：蓝四氮唑：蓝四氮唑 生成生成FormazanFormazan，用于皮质激素类药物，用于皮质激素类药物 鉴别和含量测定。鉴别和含量测定。 +水合醛水合醛 n 羰基羰基 3位位,20位羰基可与羰基试剂反应位羰基可与羰基试剂反应 羰基试剂羰基试剂:羟胺、羟胺、2,4-二硝基苯二硝基苯 肼、异烟肼肼、异烟肼 、氨基脲、苯肼等、氨基脲、苯肼等 O O

11、H CH3 N CONHN H2 OH CH3 CONHN N + _H 2O O OH CH 3 N CONHN H 2 OH CH 3 CONHN N + _H 2O O OH CH 3 N CONHN H 2 OH CH 3 CONHN N + _H 2O 甲酮基甲酮基-孕激素特征反应孕激素特征反应 第第1717位的甲酮基和亚硝基铁氰化位的甲酮基和亚硝基铁氰化 钠作用钠作用, ,形成蓝紫色的络合物。形成蓝紫色的络合物。 C O O CH3 蓝紫色 亚硝基铁氰化钠 NO)CN(FeNa 5 2 H2O2+ -4 Fe 5 CNNOCH C O O n 乙炔基乙炔基 OH CCH HO OH

12、 CCAg HO 白 3 AgNO 炔雌醇炔雌醇 OH CCH HO 酚羟基：酚羟基： C CH2OH O O OHHO CH3 F 有机氟有机氟 F 有机破坏有机破坏 有机氯有机氯 Cl 茜素氟蓝茜素氟蓝 硝酸亚铈硝酸亚铈 硝酸硝酸硝酸银硝酸银 AgCl 呈色呈色 (蓝紫色蓝紫色) 氧瓶燃烧氧瓶燃烧 有机卤素有机卤素 丙酸氯倍他索 KOH OCOCHR 醇制醇制 OCOCHCHCH SO H OHHC 戊酸戊酸戊酸雌二醇戊酸雌二醇 醇制醇制 NaOH H 己酸己酸己酸羟孕酮己酸羟孕酮 醇制醇制 OH H 黄体酮双酮肟 盐酸羟胺 黄体酮 240235.pm 苯甲酸酯 苯甲酰氯 炔雌醇 .p .

13、m 二二 制备衍生物测定制备衍生物测定m.p. .p .m睾丸素丙酸睾酮 醇制KOH 盐酸氨基脲 苯丙酸诺龙 分解约180.pm 缩氨基脲衍生物 n代表药物有：代表药物有： C CH2OH O O OOH 可的松可的松 C CH2OH O O OHHO 氢化可的松氢化可的松 CO O CH3 17 18 19 20 21 黄体酮黄体酮 C CH2OH O O OHHO CH3 F O H HO 17 18 OH HO CCH 雌二醇雌二醇 炔雌醇炔雌醇 O OH CH3 O OCOC2H5 甲睾酮甲睾酮 丙酸睾酮丙酸睾酮 三、薄层色谱法三、薄层色谱法 CH 33003000cm-1 HC 30

14、002700cm-1 OC 19001650cm-1 CC v 16501450cm-1 四、红外光谱法四、红外光谱法 IR 法法 中国药典上收载的甾体激素类 药物均有红外光谱图。 37503300cm-1 OH CO O O OH CH2OCOCH3 OH 醋酸酯,C20 酮, C11 酮基,43酮基 结构特征结构特征：酚羟基、：酚羟基、C17 OH C17 乙炔基乙炔基 炔雌醇炔雌醇 OH CCH HO 一、有关物质一、有关物质 TLC（多采用自身稀释对照法，（多采用自身稀释对照法， 已经介绍）已经介绍） HPLC（可与含量测定同时进行）（可与含量测定同时进行） （合成起始物、中间体、副产

15、物、降（合成起始物、中间体、副产物、降 解产物）解产物） 第三节杂质检查第三节杂质检查 nm A 环己烷环己烷 苯并苯硒二唑苯并苯硒二唑 二氨基萘二氨基萘 ,Se , .pH SeSe 盐盐酸酸羟羟胺胺氧氧瓶瓶燃燃烧烧 三、有机溶剂残留量三、有机溶剂残留量( (甲醇和丙酮甲醇和丙酮) ) 气相色谱法。气相色谱法。 四、游离磷酸四、游离磷酸 原理：原理： 与对照品比较 钼蓝磷钼酸 钼酸盐 磷酸盐 730nm max H O 2 nH)4 10 P(MoO 3 H H 43 POH 第四节含量测定第四节含量测定 一、紫外分光光度法一、紫外分光光度法 1原理原理 “C=C-C=C”或或“C=C-C=

16、O”共轭共轭 体系，有紫外吸收。体系，有紫外吸收。 4-3-酮结构，酮结构， max在在240nm A环为苯环，环为苯环， max在在280nm 2讨论 前提是原料药中前提是原料药中“其它甾体其它甾体”必须合必须合 格，否则，不适用。需进行分离后再格，否则，不适用。需进行分离后再 测定。如炔孕酮测定。如炔孕酮 测定制剂时，赋形剂在测定制剂时，赋形剂在240nm240nm附近有附近有 吸收需经前处理后测定。吸收需经前处理后测定。如醋酸地塞 米松片,氢化可的松片和注射液,醋酸 可的松片和注射液,醋酸泼尼松片,甲 睾酮片,醋酸甲地孕酮片,炔雌醇片, 炔诺酮片。 习题：醋酸氢化可的松滴眼液的含量测定习

17、题：醋酸氢化可的松滴眼液的含量测定 方法如下：取本品，摇匀，精密量取方法如下：取本品，摇匀，精密量取2ml， 置置100ml量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度， 摇匀；精密量取摇匀；精密量取10ml，置另一，置另一100ml量瓶量瓶 中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，在中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，在 241nm波波 长长 处处 测测 得得 吸吸 收度收度A=0.408，求，求 醋酸氢化可的松的标示百分含量。已知：醋酸氢化可的松的标示百分含量。已知： 醋酸氢化可的松的吸收系数醋酸氢化可的松的吸收系数E1%1cm =395； 本品规格为本品规格为3ml15mg . %1

18、1cm %1 1cm (103.3%) n 二二.四氮唑比色法四氮唑比色法 n 1四氮唑盐的种类：四氮唑盐的种类： （1）红四氮唑：）红四氮唑： 2,3,5三苯基氯化四氮唑三苯基氯化四氮唑 2,3,5 triphenyltetrazoliumchloride） 缩写缩写TTC 或或RT（Red tetrazolium） 还原产物为不溶于水的深红色三苯甲还原产物为不溶于水的深红色三苯甲 nmmax490480 朁 月朁 月 （2）蓝四氮唑：）蓝四氮唑： 3,3二甲氧苯基二甲氧苯基双双4，4 （3,5二苯基）氯化四氮唑二苯基）氯化四氮唑 3,3-dianisole-bis4,4-(3,5- dip

19、henyl) triphenyltetrazoliumchloride 缩写缩写BT ( Blue tetrazolium ) ，还原，还原 产物为暗兰色的双甲产物为暗兰色的双甲 ， nmmax525 朁 月朁 月 n2原理原理 17位位 -醇酮基具有还原性，醇酮基具有还原性， 在碱性条件下能将四氮唑盐定量在碱性条件下能将四氮唑盐定量 地为有色的甲地为有色的甲 ，在一定波长下，在一定波长下 具有最大吸收，可用比色法进行具有最大吸收，可用比色法进行 含量测定含量测定 朁 月朁 月 有色甲瓒 醇酮基 四氮唑盐 17 C 朁 月朁 月 3、测定法、测定法 nATTC法法: BP; Ch.P nBBT

20、法法 : USP Anmml Anmml mlmlml mlmlml 测定供试品溶液 测定对照品溶液 氢氧化四甲基铵氯化四氮唑无水乙醇 氢氧化四甲基铵氯化四氮唑无水乙醇 4851 4851 129 129 Anmml Anmml mlmlml mlmlml 测定供试品溶液 测定对照品溶液 氢氧化四甲基铵氯化四氮唑无水乙醇 氢氧化四甲基铵氯化四氮唑无水乙醇 4851 4851 129 129 暗处放置40-45min 4 4、讨论讨论 结构结构 溶剂和水分溶剂和水分 碱种类和加入顺序碱种类和加入顺序 空气中氧和光线空气中氧和光线 反应温度和时间反应温度和时间 反应速度反应速度 呈色强度呈色强度

21、和稳定性和稳定性 4、讨论、讨论 （1）官能团位置的影响）官能团位置的影响 a C11： 11位位酮基酮基反应速度快于反应速度快于11位位羟基羟基 可的松可的松氢化可的松氢化可的松 b C21：-羟基（羟基（C21-OH） 21 -OH酯化后，较母体羟基反应酯化后，较母体羟基反应 速度慢速度慢 即：游离体即：游离体酯类酯类 如：可的松如：可的松醋酸可的松醋酸可的松 简单酯简单酯复杂酯，复杂酯， 醋酸酯醋酸酯磷酸酯磷酸酯 琥珀酸酯琥珀酸酯三甲基醋酸酯三甲基醋酸酯 n（2）溶剂和水分的影响：）溶剂和水分的影响： na 常用无水乙醇常用无水乙醇 含水量含水量 5%，对结果无影响，对结果无影响 含水量

22、为含水量为10%，吸收度约降低，吸收度约降低10% 含水量为含水量为30%，反应完全受到抑制，反应完全受到抑制 nb 用无醛醇用无醛醇 醇中不能含有醛类醇中不能含有醛类醛有还原性，使醛有还原性，使 吸收度吸收度 （3）试剂质量及加入顺序）试剂质量及加入顺序 a.灵敏度：灵敏度：BT TTC； BT：淡黄色，空白值高，稳定性差；：淡黄色，空白值高，稳定性差； TTC：无色，空白值较低，稳定性好：无色，空白值较低，稳定性好. USP规定：规定： BT：极淡黄色，空白：极淡黄色，空白A值与乙醇比较值与乙醇比较 0.030.06 b.加入顺序加入顺序：先加TTC或BT， 后加(CH3)4N+OH- 原

23、因原因：醇酮基与：醇酮基与(CH3)4N+OH-长长 时间接触，有部分分解。时间接触，有部分分解。 Ch.P:氢化可的松软膏,醋酸地塞 米松注射液,醋酸可的松眼膏,醋 酸泼尼松眼膏,醋酸泼尼松龙注 射液 n （4）氧及光线的影响）氧及光线的影响 对光敏感，在暗处显色。对光敏感，在暗处显色。 TTC法形成的甲法形成的甲 对空气中氧敏对空气中氧敏 感，使颜色强度感，使颜色强度，稳定性，稳定性。 BP规定：规定： 加入试剂后，要往容器中充加入试剂后，要往容器中充N2， 以置换反应容器中的空气。以置换反应容器中的空气。 朁 月朁 月 n（5）液性：）液性： 必要条件：强碱性 以(CH3)4N+OH-结

24、果较满意 （6）温度与时间）温度与时间 一般室温或一般室温或30 Ch.P: 25，暗处反应，暗处反应40-45min O OH CH3 N CONHN H2 OH CH3 CONHN N + _H 2O 三三.异烟肼法异烟肼法 1原理原理: C3酮基及某些其他位置酮基及某些其他位置 上的酮基能与羰基试剂异烟肼在上的酮基能与羰基试剂异烟肼在酸酸 性条件性条件下形成黄色异烟腙，在一定下形成黄色异烟腙，在一定 波长下具有最大吸收，可用于定量。波长下具有最大吸收，可用于定量。 max420nm 2 2、反应条件、反应条件 （1 1）溶剂：溶剂：无水乙醇，无水甲醇无水乙醇，无水甲醇 （2 2）酸的种类

25、、浓度及异烟肼的浓度酸的种类、浓度及异烟肼的浓度 常用常用HClHCl HClHCl：异烟肼：异烟肼=2M:1M=2M:1M时，获最大吸收度。时，获最大吸收度。 HClHCl浓度浓度：0.0074mol/L0.0074mol/L （1000ml1000ml醇中含醇中含0.625mol0.625mol浓浓HClHCl） 异烟肼浓度异烟肼浓度：0.0365mol/L (0.5mg/ml)0.0365mol/L (0.5mg/ml) （3 3）水分、）水分、O2与光线的影响与光线的影响 甾体激素与异烟肼的缩合反应为可甾体激素与异烟肼的缩合反应为可 逆反应，所以含水量升高可促使反逆反应，所以含水量升高

26、可促使反 应逆转而水解，使吸收度降低应逆转而水解，使吸收度降低 (H(H2 2OAOA） 具塞玻璃容器中具塞玻璃容器中,光线和氧影响不大光线和氧影响不大 3 3、反应的专属性、反应的专属性 在该反应条件下在该反应条件下, ,对对4 43 3酮具有一酮具有一 定的专属性定的专属性 C20C20酮基反应慢，酮基反应慢， C17C17酮基反应慢；酮基反应慢； C11C11酮基不反应酮基不反应 4 43 3酮：室温下，酮：室温下，3030反应完全。反应完全。 如：醋酸地塞米松软膏如：醋酸地塞米松软膏 四四. kober反应及铁一酚试剂比色法反应及铁一酚试剂比色法 nm515 42 nm465 42 m

27、ax max SOHor -SOH 荧光性红色 稀释 稀水 黄色 乙醇 雌激素类药物 1、Kober反应：反应： 指指雌激素与硫酸雌激素与硫酸乙醇乙醇共热呈色，用共热呈色，用 水或稀硫酸稀释后，重新加热发生颜色水或稀硫酸稀释后，重新加热发生颜色 改变，并在改变，并在515nm附近有最大吸收的反附近有最大吸收的反 应。应。（特征反应）（特征反应） n改进方法：改进方法： n2铁酚试剂法铁酚试剂法 铁酚试剂的组成铁酚试剂的组成 硫酸亚铁铵硫酸亚铁铵 浓硫酸浓硫酸 过氧化氢过氧化氢 苯酚苯酚 浓硫酸和过氧化氢的作用浓硫酸和过氧化氢的作用 n浓硫酸和过氧化氢将2价铁氧化成3 价铁。 硫酸铁铵硫酸亚铁铵

28、 ， 244 2242 2424 )SO(FeNH OHSOH )SO()NH(Fe 三价铁的作用三价铁的作用 能够加快黄色生成的速度能够加快黄色生成的速度 能促进黄色向红色的转变能促进黄色向红色的转变 能增加红色的稳定性能增加红色的稳定性 苯酚的作用苯酚的作用 n可消除反应产生的荧光可消除反应产生的荧光 n能够促进红色的生成能够促进红色的生成 OH CCH HO OH CCAg HO白 3 AgNO 五五 硝酸银一硝酸银一NaOH滴定法滴定法 +HNO3 + NaOH滴定，同时做空白滴定，同时做空白 六六 非水溶液滴定法非水溶液滴定法 HClO4滴定，同时做空白滴定，同时做空白 米非司酮米非

29、司酮, C10位为位为 七七 HPLC法法 广泛用于此类药物原料和制剂的广泛用于此类药物原料和制剂的 含量测定含量测定 一般为内标法一般为内标法 掌握掌握甾体激素类药物的基本结构与甾体激素类药物的基本结构与 分类；各类药物的结构特征及其与分类；各类药物的结构特征及其与 分析方法的关系。分析方法的关系。 熟悉熟悉甾体激素类药物的紫外分光光甾体激素类药物的紫外分光光 度法、四氮唑比色法和异烟肼比色度法、四氮唑比色法和异烟肼比色 法法；柯柏反应比色法；柯柏反应比色法 。 了解了解 甾体激素类药物的特殊杂质甾体激素类药物的特殊杂质 及其检查方法。及其检查方法。 基本要求基本要求 D ABCD ABCDE B C A C B B D 17.用化学方法将下列药物鉴别开来， 并写出药物名称。 1. HO CO CH2OH OH O