最新食品中真菌毒素的分布及其检测

1、2021-11-61食品中真菌毒素的分布及其检测食品中真菌毒素的分布及其检测方法研究进展方法研究进展 上海市药品检验所中药室上海市药品检验所中药室 郑郑 荣荣2021-11-62 真菌毒素简介（种类，产生，危害，限度，检测真菌毒素简介（种类，产生，危害，限度，检测方法等）方法等） 几种真菌毒素（黄曲霉素，赭曲霉素，呕吐毒素，几种真菌毒素（黄曲霉素，赭曲霉素，呕吐毒素，伏马毒素，玉米赤烯酶酮，伏马毒素，玉米赤烯酶酮，t-2t-2毒素）毒素）2021-11-63真菌毒素的种类真菌毒素的种类真菌毒素（真菌毒素（mycotoxinmycotoxin），也称霉菌毒素，是真菌产生的次级代谢产物。），也称霉

2、菌毒素，是真菌产生的次级代谢产物。已知有已知有200200多种不同的真菌毒素，一般同时具有毒性强和污染频率高的特点。多种不同的真菌毒素，一般同时具有毒性强和污染频率高的特点。其中包括黄曲霉毒素其中包括黄曲霉毒素b1b1和和m1m1（aflatoxinsaflatoxins，fb1fb1、fm1fm1）；）；赭（棕）曲霉毒素赭（棕）曲霉毒素a a（ochratoxin aochratoxin a，oaoa）；）；脱氧雪腐镰刀菌烯醇（呕吐毒素）（脱氧雪腐镰刀菌烯醇（呕吐毒素）（deoxynivalenol,dondeoxynivalenol,don）；）；玉米赤霉烯酮（玉米赤霉烯酮（zearale

3、none,zen(f-2)zearalenone,zen(f-2)）；）； t-2t-2毒素（毒素（t-2 toxin,t-2t-2 toxin,t-2）；）；伏马霉素；伏马霉素；展青霉素（棒曲霉毒素）（展青霉素（棒曲霉毒素）（patulin,ptlpatulin,ptl）；）；杂色（柄）曲霉毒素（杂色（柄）曲霉毒素（terigmatocystinterigmatocystin）；串珠镰刀菌素（）；串珠镰刀菌素（moniliformin,mfmoniliformin,mf）三硝）三硝基丙酸；二乙酰镳草镰刀菌烯醇（基丙酸；二乙酰镳草镰刀菌烯醇（diacetoxyscirpenol dasdiac

4、etoxyscirpenol das）、麦角碱、黄米毒素、）、麦角碱、黄米毒素、岛青霉毒素、橘青霉素、皱褶青霉素、黄绿青霉素、红矢精、黄绿素、圆弧青霉偶氮岛青霉毒素、橘青霉素、皱褶青霉素、黄绿青霉素、红矢精、黄绿素、圆弧青霉偶氮酸和酸和f-2f-2毒素等。毒素等。 2021-11-64产生真菌毒素的霉菌产生真菌毒素的霉菌曲霉属曲霉属（aspergillus linkaspergillus link）：黄曲霉（）：黄曲霉（a. flavusa. flavus）、寄生曲霉（）、寄生曲霉（a. a. parasiticusparasiticus）、赭曲霉（）、赭曲霉（a. ochraceusa. o

5、chraceus）、杂色曲霉（）、杂色曲霉（a. flavusa. flavus）、）、烟曲霉（烟曲霉（a. flumigatusa. flumigatus）、构巢曲霉（）、构巢曲霉（a. nidulansa. nidulans）和棒曲霉（）和棒曲霉（a. a. clavusclavus）等。）等。青霉属青霉属（penicillium link ex frpenicillium link ex fr）：岛青霉（）：岛青霉（p. islandicump. islandicum）、橘青）、橘青霉（霉（p. citrinump. citrinum）、红色青霉（）、红色青霉（p. rubrump. r

6、ubrum）、展青霉（）、展青霉（p. patulump. patulum）和黄绿青霉（和黄绿青霉（p. citreo-vinidep. citreo-vinide）等。）等。镰刀菌属镰刀菌属（fusarium link ex frfusarium link ex fr）：禾谷镰刀菌（）：禾谷镰刀菌（f. graminearunf. graminearun）、）、串珠镰刀菌（串珠镰刀菌（f. moniliformef. moniliforme）、木贼镰刀菌（）、木贼镰刀菌（f. equisetif. equiseti）、茄病镰）、茄病镰刀菌（刀菌（f. solanif. solani）、三线镰

7、刀菌（）、三线镰刀菌（f. tritinctumf. tritinctum）和镳草镰刀菌（）和镳草镰刀菌（f. f. sporotrichioidessporotrichioides）等。）等。2021-11-65真菌毒素的危害真菌毒素的危害 经济危害经济危害由于真菌的寄生和真菌毒素的产生，严重影响农作物的产量，降低由于真菌的寄生和真菌毒素的产生，严重影响农作物的产量，降低农产品和饲料品质，造成巨大经济损失。全世界每年由于霉变污染农产品和饲料品质，造成巨大经济损失。全世界每年由于霉变污染真菌毒素引起的农产品和工业原料的损失达数百亿美元。真菌毒素引起的农产品和工业原料的损失达数百亿美元。在我国北

8、纬在我国北纬3131线以南地区采集的玉米、花生、花生油样品的阳性线以南地区采集的玉米、花生、花生油样品的阳性检出率为检出率为22.922.968.1%68.1%，每年使粮食减产，每年使粮食减产3 37 7。19731973年，小麦赤年，小麦赤霉病大流行，穗发病率霉病大流行，穗发病率5050以上，产量损失以上，产量损失10104040。据调查，除。据调查，除粮食、饲料以外，在油料作物种子、水果、干果、蔬菜、调味品、粮食、饲料以外，在油料作物种子、水果、干果、蔬菜、调味品、烟草、麻类、乳和乳制品、鱼虾、肉类、发酵产品等都发现了不同烟草、麻类、乳和乳制品、鱼虾、肉类、发酵产品等都发现了不同程度的真菌

9、毒素污染。程度的真菌毒素污染。2021-11-66常见的真菌毒素常见的真菌毒素饲料、原料饲料、原料 可能产生的条件可能产生的条件 产生的真菌毒素产生的真菌毒素 小麦、大麦小麦、大麦水分水分15%15%以上以上 afaf、橘青霉毒素、橘青霉毒素 玉米玉米 水分水分13%13%以上以上 aflafl、zenzen、dondon、t-t-2 2 花生饼花生饼 水分水分14%14%以上以上 afaf、环匹阿尼酸、环匹阿尼酸 豆粕豆粕 /真菌毒素含量较少真菌毒素含量较少 稻谷稻谷 水分水分15%15%以上以上 zen2021-11-67真菌毒素的危害真菌毒素的危害 健康危害健康危害根据真菌毒素作用的靶器

10、官或者真菌毒素引起的病理现象，可将真菌毒根据真菌毒素作用的靶器官或者真菌毒素引起的病理现象，可将真菌毒素分为肝脏毒、肾脏毒、神经毒、震颤毒等。人或动物摄入被真菌毒素素分为肝脏毒、肾脏毒、神经毒、震颤毒等。人或动物摄入被真菌毒素污染的农、畜产品，或通过吸入及皮肤接触真菌毒素可引发多种中毒症污染的农、畜产品，或通过吸入及皮肤接触真菌毒素可引发多种中毒症状。如致幻，催吐，出血症，皮炎，中枢神经受损，甚至死亡。状。如致幻，催吐，出血症，皮炎，中枢神经受损，甚至死亡。动物试验和流行病学的调查结果还证实，许多真菌毒素还可在体内积累动物试验和流行病学的调查结果还证实，许多真菌毒素还可在体内积累后产生致癌、致

11、畸、致突变、类激素中毒，白细胞缺乏症等，对机体造后产生致癌、致畸、致突变、类激素中毒，白细胞缺乏症等，对机体造成永久性损害。成永久性损害。某些癌症以及克山病等都与真菌毒素中毒有关。某些癌症以及克山病等都与真菌毒素中毒有关。 2021-11-6819731973年，湖北省黄岗、天门等年，湖北省黄岗、天门等1010县发生赤霉病麦中毒县发生赤霉病麦中毒30003000余人，安徽余人，安徽省也有省也有200200余人中毒。余人中毒。 19911991年安徽、河南部分地区因特大洪涝灾害造成粮食霉变而在灾区农年安徽、河南部分地区因特大洪涝灾害造成粮食霉变而在灾区农民中引起较大范围的真菌毒素中毒，一些地区的

12、发病率超过民中引起较大范围的真菌毒素中毒，一些地区的发病率超过70% 70% 自自19721972年至年至19871987年，我国北方地区年，我国北方地区1313个省发生食用变质甘蔗中毒病案个省发生食用变质甘蔗中毒病案825825例，死亡例，死亡7878人，其中河北乐亭一次中毒死亡人，其中河北乐亭一次中毒死亡8 8人，而且相当比例的人，而且相当比例的重病人遗留终生残疾重病人遗留终生残疾 19891989年年5 5月在内蒙古哲里木盟扎鲁特旗，由于居民食用玉米赤霉烯酮污月在内蒙古哲里木盟扎鲁特旗，由于居民食用玉米赤霉烯酮污染的荞麦造成乳腺病暴发，累计发病染的荞麦造成乳腺病暴发，累计发病103103

13、例，患病率例，患病率14.4914.49。 在消化道癌高发区的河南林县，经流行病学调查发现，人们摄食中的在消化道癌高发区的河南林县，经流行病学调查发现，人们摄食中的dondon、t-2t-2毒素等含量与食管癌，贲门癌的发病率呈正相关毒素等含量与食管癌，贲门癌的发病率呈正相关 2021-11-69已知的与人体有关的主要真菌毒素中毒症已知的与人体有关的主要真菌毒素中毒症菌种菌种易感染食品易感染食品毒素毒素主要症状及病变主要症状及病变黄曲霉黄曲霉花生、大豆、菜豆、谷物及副产品花生、大豆、菜豆、谷物及副产品黄曲霉毒素黄曲霉毒素肝癌肝癌赭曲霉赭曲霉谷物、玉米、咖啡、火腿谷物、玉米、咖啡、火腿赭曲霉毒素赭

14、曲霉毒素人：巴尔干肾炎人：巴尔干肾炎猪：肾中毒症、肾癌猪：肾中毒症、肾癌麦角菌麦角菌谷物及副产品谷物及副产品麦角碱、麦角毒碱、麦角胺、麦角克碱等麦角碱、麦角毒碱、麦角胺、麦角克碱等麦角中毒（手足麻木、痉挛、坏疽等）麦角中毒（手足麻木、痉挛、坏疽等） 三线镰刀菌三线镰刀菌谷物及副产品谷物及副产品含有玉米赤霉烯酮的复合性毒素类含有玉米赤霉烯酮的复合性毒素类恶心、猪的发情作用恶心、猪的发情作用禾谷镰刀菌禾谷镰刀菌麦类、玉米麦类、玉米赤霉病变毒素赤霉病变毒素急性胃肠炎急性胃肠炎瓜哇镰刀菌素瓜哇镰刀菌素马铃薯马铃薯牛的肺浮肿牛的肺浮肿拟分枝孢镰孢变种、三拟分枝孢镰孢变种、三线镰刀菌线镰刀菌谷物及副产品、

15、谷核谷物及副产品、谷核镰刀霉素镰刀霉素食物中毒性白血球缺失症食物中毒性白血球缺失症黄绿青霉以及橘青霉黄绿青霉以及橘青霉米米一种抗菌素、橘霉素一种抗菌素、橘霉素对皮肤及粘膜的刺激、对肝脏、肾脏对皮肤及粘膜的刺激、对肝脏、肾脏的毒性的毒性圆瓜青霉、烟曲霉圆瓜青霉、烟曲霉玉米、饲料玉米、饲料青霉震颤素青霉震颤素a a、烟曲霉震颤素、烟曲霉震颤素牛、马、羊：痉挛、牛、马、羊：痉挛、扩展青霉扩展青霉苹果、苹果酒和苹果汁苹果、苹果酒和苹果汁棒曲霉素棒曲霉素致癌性、变异原性致癌性、变异原性岛青霉岛青霉米米霉米上的樱红色、岛青霉毒素、瑰天精、霉米上的樱红色、岛青霉毒素、瑰天精、赤醌茜素赤醌茜素肝的毒性、肝脏的

16、变易及肝癌肝的毒性、肝脏的变易及肝癌黑葡萄穗霉黑葡萄穗霉蔬菜残屑、秸杆、牧草蔬菜残屑、秸杆、牧草黑葡萄穗霉毒素黑葡萄穗霉毒素皮炎、卡他性咽狭炎、白血球缺失症、皮炎、卡他性咽狭炎、白血球缺失症、经过气管的作用经过气管的作用黑根霉黑根霉椰子、霉大豆椰子、霉大豆眩晕、痉挛、发绀（在瓜哇，起因于眩晕、痉挛、发绀（在瓜哇，起因于对霉大豆的消费）对霉大豆的消费）禾谷镰刀菌、黄色镰刀禾谷镰刀菌、黄色镰刀菌、三线镰刀菌、菌、三线镰刀菌、串珠镰刀菌串珠镰刀菌玉米、麦类玉米、麦类玉米赤霉烯酮玉米赤霉烯酮猪：外阴肥大、流产、不妊、畸形猪：外阴肥大、流产、不妊、畸形2021-11-610真菌毒素的限量规定真菌毒素的限

17、量规定非洲：非洲：15 15 个国家制订了限量规定个国家制订了限量规定 ( (占占59 % )59 % )亚洲和大洋洲：亚洲和大洋洲：26 26 个国家制订了限量规定个国家制订了限量规定 ( (占占89 % )89 % )拉丁美洲：拉丁美洲：19 19 个国家制订了限量规定个国家制订了限量规定 ( (占占92 % )92 % )北美：北美：2 2个国家个国家 (100 % ) (100 % ) 加拿大加拿大: : 伏马毒素、麦角碱伏马毒素、麦角碱 美国美国: fumonisins (b1+b2+b3): fumonisins (b1+b2+b3)欧盟：已执行欧盟：已执行 : : 食品和饲料中的

18、食品和饲料中的aflatoxinaflatoxin、ochratoxin aochratoxin a； 苹果中的苹果中的 patulinpatulin 提议提议 : :小麦和谷物中的小麦和谷物中的dondon 2021-11-611真菌毒素常用检测技术真菌毒素常用检测技术2021-11-612 由于真菌毒素对人体的危害，因此其快速检测方法迅速得到发展，特别由于真菌毒素对人体的危害，因此其快速检测方法迅速得到发展，特别是生物化学方法，如亲和色谱法和酶联免疫吸附测定法。是生物化学方法，如亲和色谱法和酶联免疫吸附测定法。 在进行真菌毒素的检测时，大部分的毒素标准不仅很毒，而且非常难以在进行真菌毒素的

19、检测时，大部分的毒素标准不仅很毒，而且非常难以得到，所以无毒素标准的方法适应了这种需求，如黄曲霉毒素荧光仪的得到，所以无毒素标准的方法适应了这种需求，如黄曲霉毒素荧光仪的使用。使用。 由于毒素的分析属于痕量分析，因此在仲裁中最终必须通过气相或液相由于毒素的分析属于痕量分析，因此在仲裁中最终必须通过气相或液相色谱方法进行准确定量色谱方法进行准确定量 各国就此设置了一系列的技术壁垒，需要快速，准确，高效的方法各国就此设置了一系列的技术壁垒，需要快速，准确，高效的方法, ,目前目前国际通用的方法为免疫亲和柱后衍生高效液相色谱法国际通用的方法为免疫亲和柱后衍生高效液相色谱法2021-11-613afl

20、atoxinaflatoxin黄曲霉毒素黄曲霉毒素由黄曲霉和寄生曲霉产生由黄曲霉和寄生曲霉产生五种主要的黄曲霉毒素五种主要的黄曲霉毒素: b1, b2, g1, g2 b1, b2, g1, g2 和和m1 m1 ；其中；其中b1b1被认为是主要的被认为是主要的有毒物质，有毒物质， m1m1为代谢产物为代谢产物黄曲霉毒素黄曲霉毒素b1b1主要存在于农产品，动物饲料，中药等产品中；黄曲霉毒素主要存在于农产品，动物饲料，中药等产品中；黄曲霉毒素m1m1是动物摄入黄曲霉毒素是动物摄入黄曲霉毒素b1b1后在体内经羟基化代谢的产物，一部分从尿和乳汁后在体内经羟基化代谢的产物，一部分从尿和乳汁排出，一部分

21、存在于动物的可食部分，如乳、肝、蛋类、肾、血和肌肉中，排出，一部分存在于动物的可食部分，如乳、肝、蛋类、肾、血和肌肉中，其中以乳最为常见。其中以乳最为常见。黄曲霉毒素黄曲霉毒素m1m1的毒性和致癌性与黄曲霉毒素的毒性和致癌性与黄曲霉毒素b1b1的基本相似。由于牛乳及其制的基本相似。由于牛乳及其制品是人类、特别是婴儿的主要食品，所以其危害性更大。品是人类、特别是婴儿的主要食品，所以其危害性更大。 国际肿瘤研究机构定为一级致癌物国际肿瘤研究机构定为一级致癌物2021-11-614黄曲霉毒素的化学性质黄曲霉毒素的化学性质黄曲霉毒素的基本结构为二呋喃环和香豆素，在紫外线下，黄曲霉毒黄曲霉毒素的基本结构

22、为二呋喃环和香豆素，在紫外线下，黄曲霉毒素素b1b1、b2b2发兰色荧光，黄曲霉毒素发兰色荧光，黄曲霉毒素g1g1、g2g2发绿色荧光。黄曲霉毒素发绿色荧光。黄曲霉毒素m1m1是黄曲霉毒素是黄曲霉毒素b1b1在体内经过羟化而衍生成的代谢产物。在体内经过羟化而衍生成的代谢产物。黄曲霉毒素的分子量为黄曲霉毒素的分子量为312-346312-346。难溶于水，易溶于油、甲醇、丙酮和。难溶于水，易溶于油、甲醇、丙酮和氯仿等有机溶剂，但不溶于石油醚、己烷和乙醚中。一般在中性及酸氯仿等有机溶剂，但不溶于石油醚、己烷和乙醚中。一般在中性及酸性溶液中较稳定，在强酸性溶液中稍有分解，在性溶液中较稳定，在强酸性溶

23、液中稍有分解，在ph 9-10ph 9-10的强碱溶液中的强碱溶液中分解迅速。其纯品为无色结晶，耐高温，黄曲霉毒素分解迅速。其纯品为无色结晶，耐高温，黄曲霉毒素b1b1的分解温度为的分解温度为268 268 ，因此，一般的加热煎煮无法除去，紫外线对低浓度黄曲霉毒，因此，一般的加热煎煮无法除去，紫外线对低浓度黄曲霉毒素有一定的破坏性。素有一定的破坏性。 2021-11-615黄曲霉毒素对人体的危害黄曲霉毒素对人体的危害引起急、慢性中毒：引起急、慢性中毒：黄曲霉毒素是剧毒物质，其毒性相当于氰化钾黄曲霉毒素是剧毒物质，其毒性相当于氰化钾的的1010倍，砒霜的倍，砒霜的6868倍。黄曲霉毒素属肝脏毒，

24、除抑制倍。黄曲霉毒素属肝脏毒，除抑制dnadna、rnarna的合的合成外，也抑制肝脏蛋白质的合成，黄曲霉毒索引起人类的急性中毒成外，也抑制肝脏蛋白质的合成，黄曲霉毒索引起人类的急性中毒事件，国内外均有许多报导，最典型的是印度的霉变玉米事件，该事件，国内外均有许多报导，最典型的是印度的霉变玉米事件，该事件直接导致了数十人丧生，数百人患上不同类型的肝脏疾病。事件直接导致了数十人丧生，数百人患上不同类型的肝脏疾病。致癌性：致癌性：黄曲霉毒素有极强的致癌性，长期摄入黄曲霉毒素会诱发黄曲霉毒素有极强的致癌性，长期摄入黄曲霉毒素会诱发肝癌。它诱发肝癌的能力比二甲基亚硝胺大肝癌。它诱发肝癌的能力比二甲基亚

25、硝胺大7575倍，倍，19931993年黄曲霉毒年黄曲霉毒素被世界卫生组织（素被世界卫生组织（whowho）的癌症研究机构划定为）的癌症研究机构划定为i i类致癌物，是目类致癌物，是目前公认的致癌性最强的物质之一。另据世界卫生组织报导，黄曲霉前公认的致癌性最强的物质之一。另据世界卫生组织报导，黄曲霉毒素含量在毒素含量在303050ug/kg50ug/kg时为低毒，时为低毒，5050100ug/kg100ug/kg时为中毒，时为中毒，1001001000ug/kg1000ug/kg时为高毒，时为高毒，1000ug/kg1000ug/kg以上为极毒。以上为极毒。 2021-11-616商商 品品

26、国国 家家 文献发文献发表年份表年份 被分析的被分析的样品数样品数 出现率出现率（% %） 含量范围含量范围(g/kg)(g/kg)玉米玉米印度印度199719972074207447475-6665-666玉米玉米阿根廷阿根廷199619962271227120205-5605-560花生花生印度印度199619962062206245455-8335-833花生粉花生粉印度印度1995199538038097978-62808-6280棉籽粉棉籽粉英国英国19971997212171715-255-25干椰子粉干椰子粉菲律宾菲律宾199519959 910010023-18623-186巴

27、西果巴西果美国美国1993199317617617170-6190-619pistachiopistachio果果芬兰芬兰19961996292959592-1652-165黄曲霉毒素在各国商品中的存在情况黄曲霉毒素在各国商品中的存在情况 (1)(1)2021-11-617黄曲霉毒素在各国商品中的存在情况黄曲霉毒素在各国商品中的存在情况 (2)(2)商商 品品 国国 家家 文献发文献发表年份表年份 被分析的样被分析的样品数品数 出现率出现率（% %） 含量范围含量范围（g/kgg/kg）杏仁杏仁美国美国1993199344441 10-3720-372大豆大豆阿根廷阿根廷19911991949

28、410101-361-36大米大米厄瓜多尔厄瓜多尔1997199799999 97-407-40小麦小麦乌拉圭乌拉圭1996199612312320202-202-20干无花果干无花果奥地利奥地利1993199313613613131-3501-350肉豆蔻肉豆蔻日本日本19931993676743430-170-17chillieschillies果果巴基斯坦巴基斯坦1995199517617666661-801-802021-11-618中国及国际上对黄曲霉毒素的检测标准中国及国际上对黄曲霉毒素的检测标准品名品名中国标准中国标准美国标准美国标准欧盟欧盟玉米、花生、花生油，坚果和玉米、花生、

29、花生油，坚果和干果（核桃、杏仁）干果（核桃、杏仁）2020g/kg g/kg (ppb)(ppb)2020g/kg g/kg (ppb)(ppb)22、4 4、5 5、8 8、1010、1515g/kg (ppb)g/kg (ppb)玉米及花生仁制品（按原料折玉米及花生仁制品（按原料折算）算）20 20 g/kg g/kg (ppb)(ppb)2020g/kg g/kg (ppb)(ppb)22、4 4、5 5、8 8、1010、1515g/kg (ppb)g/kg (ppb)大米、其它食用油（香油、菜大米、其它食用油（香油、菜子油、大豆油、葵花油、胡麻子油、大豆油、葵花油、胡麻油、茶油、麻油

30、、玉米胚芽油、油、茶油、麻油、玉米胚芽油、米糠油、棉籽油）米糠油、棉籽油）10 10 g/kg g/kg (ppb)(ppb)1010g/kg g/kg (ppb)(ppb)2 2、4 4g/kg (ppb)g/kg (ppb)其它粮食（麦类、面粉、薯其它粮食（麦类、面粉、薯干）、发酵食品（酱油、食用干）、发酵食品（酱油、食用醋、豆豉、腐乳制品）、淀粉醋、豆豉、腐乳制品）、淀粉类制品（糕点、饼干、面包、类制品（糕点、饼干、面包、裱花蛋糕）裱花蛋糕）5 5g/kg g/kg (ppb)(ppb)5 5g/kg g/kg (ppb)(ppb)不得检出不得检出牛乳及其制品（消毒牛乳、新牛乳及其制品（

31、消毒牛乳、新鲜生牛乳、全脂牛奶粉、淡炼鲜生牛乳、全脂牛奶粉、淡炼乳、甜炼乳、奶油）、黄油、乳、甜炼乳、奶油）、黄油、新鲜猪组织（肝、肾、血、瘦新鲜猪组织（肝、肾、血、瘦肉）肉）0.5g/kg 0.5g/kg (ppb)(ppb)0.5g/kg 0.5g/kg (ppb)(ppb)0.05g/kg (ppb)0.05g/kg (ppb)2021-11-619黄曲霉毒素检测方法（黄曲霉毒素检测方法（1 1） 传统检测方法传统检测方法黄曲霉毒素分析一般采用黄曲霉毒素分析一般采用薄层色谱法薄层色谱法(tlc(tlc）、高效液相色谱法（）、高效液相色谱法（hplchplc）和）和酶联吸附免疫法（酶联吸附

32、免疫法（elisaelisa）。）。tlctlc虽然简便，但灵敏度差；虽然简便，但灵敏度差；hplchplc虽然灵敏度高，但样品处理烦琐，操作复虽然灵敏度高，但样品处理烦琐，操作复杂，仪器昂贵。杂，仪器昂贵。elisaelisa重复性差、试剂寿命短需要低温保存。此外，这些方重复性差、试剂寿命短需要低温保存。此外，这些方法都具有如下共同的不足之处：（法都具有如下共同的不足之处：（1 1）在操作过程中，需要使用剧毒的真菌）在操作过程中，需要使用剧毒的真菌毒素作为标定标准物，对操作人员造成巨大的沾污危险。（毒素作为标定标准物，对操作人员造成巨大的沾污危险。（2 2）在对样品进）在对样品进行预处理过程

33、中，需要使用多种有毒、异味的有机溶剂，不仅毒害操作人行预处理过程中，需要使用多种有毒、异味的有机溶剂，不仅毒害操作人员，而且污染环境。（员，而且污染环境。（3 3）操作过程烦琐、时间长，劳动强度大。（）操作过程烦琐、时间长，劳动强度大。（4 4）仪）仪器设备复杂、笨重，难以实现现场快速分析。（器设备复杂、笨重，难以实现现场快速分析。（5 5）灵敏度较差，无法满足）灵敏度较差，无法满足欧盟等国的标准要求。欧盟等国的标准要求。2021-11-620黄曲霉毒素检测方法（黄曲霉毒素检测方法（2 2） 免疫亲和高效液相色谱法免疫亲和高效液相色谱法分析速度快分析速度快灵敏度高，测定范围宽（灵敏度高，测定范

34、围宽（0.1-300ppb0.1-300ppb），用荧光计法检测可以测定），用荧光计法检测可以测定0.1ppb0.1ppb的的黄曲霉毒素黄曲霉毒素m1,m1,用用hplchplc检测可以测定检测可以测定10ppt10ppt的黄曲霉毒素的黄曲霉毒素m1m1。采用单克隆抗体免疫技术，可以特效性地将黄曲霉毒素或其它真菌毒素分离采用单克隆抗体免疫技术，可以特效性地将黄曲霉毒素或其它真菌毒素分离出来，分离效率和回收率高，正确性和可靠性强。出来，分离效率和回收率高，正确性和可靠性强。利用同一台仪器和相似的分析方法，还可以检测赭曲毒素、伏马毒素、玉米利用同一台仪器和相似的分析方法，还可以检测赭曲毒素、伏马毒

35、素、玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（dondon或称呕吐毒素）和或称呕吐毒素）和t-2t-2毒素。毒素。 2021-11-621我室黄曲霉素检测方法我室黄曲霉素检测方法 采用甲醇采用甲醇- -水系统提取水系统提取, ,提取液经过滤、稀释提取液经过滤、稀释 滤液经过含有黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和层析净化滤液经过含有黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和层析净化 用水将免疫亲和层析柱上的杂质除去，以甲醇将黄曲霉毒用水将免疫亲和层析柱上的杂质除去，以甲醇将黄曲霉毒素洗脱下来素洗脱下来 洗脱液定容后通过带荧光检测器的高效液相色谱仪柱后碘洗脱液定容后通过带荧光检测器的高效液相色谱

36、仪柱后碘溶液衍生测定含量。溶液衍生测定含量。2021-11-622黄曲霉素黄曲霉素g2g2、g1g1、b2b2和和b1b1的高效液相色谱图的高效液相色谱图2021-11-623 黄曲霉素黄曲霉素g2g2、g1g1、b2b2、 b1b1定性检测限为定性检测限为0.90.9、1.51.5、0.90.9和和1.5pg1.5pg，定，定量检测限为量检测限为2.252.25、7.57.5、2.252.25和和7.5pg7.5pg。2021-11-624赭曲霉毒素的化学性质赭曲霉毒素的化学性质赭曲霉毒素包括赭曲霉毒素包括a a、b b、c c等等7 7种结构类似的化合物，其中以赭曲霉毒素种结构类似的化合物

37、，其中以赭曲霉毒素a a毒毒性最大，也称之为棕曲霉毒素。性最大，也称之为棕曲霉毒素。赭曲霉毒素赭曲霉毒素a a是稳定的无色结晶化合物，溶于极性溶剂和稀碳酸氢钠溶液，是稳定的无色结晶化合物，溶于极性溶剂和稀碳酸氢钠溶液，微溶于水。将赭曲霉毒素微溶于水。将赭曲霉毒素a a的乙醇溶液贮于冰箱中一年以上也无损失，但的乙醇溶液贮于冰箱中一年以上也无损失，但应避光保存，如接触紫外线，几天就会分解。应避光保存，如接触紫外线，几天就会分解。2021-11-625赭曲霉毒素的产生赭曲霉毒素的产生产生赭曲霉毒素产生赭曲霉毒素a a 的曲霉属主要是淡褐色曲霉属的曲霉属主要是淡褐色曲霉属 （a.alutaceusa.

38、alutaceus）、硫磺色）、硫磺色曲霉属曲霉属 （a.sulphureusa.sulphureus），菌核），菌核 (a.sclerotium)(a.sclerotium)、蜂蜜味曲霉属、蜂蜜味曲霉属 (a.melleus)(a.melleus)、洋葱曲霉（、洋葱曲霉（a. alliaceusa. alliaceus）、孔曲霉（）、孔曲霉（a. ostianusa. ostianus）、纯绿）、纯绿青霉青霉(p. viridicatum)(p. viridicatum)和圆弧青霉（和圆弧青霉（p. cyclopiump. cyclopium）也能产生赭曲霉毒素）也能产生赭曲霉毒素a a。

39、曲霉属产生赭曲霉毒素曲霉属产生赭曲霉毒素a a的条件是中温的条件是中温, ,寒冷气候。青霉属产生赭曲霉毒素寒冷气候。青霉属产生赭曲霉毒素a a的的地区主要是亚热带地区主要是亚热带2021-11-626赭曲霉毒素赭曲霉毒素a a（ochratoxin aochratoxin a）中毒）中毒研究资料表明，该毒素可损害动物的肾脏及肝脏损害，有致畸和致癌作用，并研究资料表明，该毒素可损害动物的肾脏及肝脏损害，有致畸和致癌作用，并被认为与人类的巴尔干肾病有关。被认为与人类的巴尔干肾病有关。由于其也有致癌后果，国际癌症研究机构由于其也有致癌后果，国际癌症研究机构iarciarc将其定为将其定为2b2b类致

40、癌物。类致癌物。赭曲毒素浓度为赭曲毒素浓度为1mg/kg1mg/kg左右时，使家禽的产蛋率下降；超过左右时，使家禽的产蛋率下降；超过5mg/kg5mg/kg时，会对肝时，会对肝脏组织和肠产生损坏。脏组织和肠产生损坏。 2021-11-627容易受到赭曲霉毒素污染的农副产品容易受到赭曲霉毒素污染的农副产品绿咖啡豆、咖啡制品、绿咖啡豆、咖啡制品、葡萄干、葡萄干、大豆、玉米、大米、花生、棉籽、麦类、绿豆、大豆、玉米、大米、花生、棉籽、麦类、绿豆、啤酒、葡萄汁、调味品、啤酒、葡萄汁、调味品、草本植物、猪肾。草本植物、猪肾。2021-11-628赭曲毒素赭曲毒素a a在各种商品中的存在情况（在各种商品中

41、的存在情况（1 1）商商 品品 国国 家家 文献发表年文献发表年份份 被分析的样被分析的样品数品数 出现率出现率（% %） 含量范围含量范围(g/kg)(g/kg)大麦大麦德国德国199819986767979725-2700025-27000小麦小麦丹麦丹麦199719975050808050-455050-4550黑麦黑麦丹麦丹麦19971997266266292910-212410-2124燕麦燕麦丹麦丹麦19971997121121202042-35042-350小麦小麦瑞士瑞士19971997153153343473-239573-2395大麦大麦/ /小小麦麦英国英国1997199

42、7240240565650-3486850-34868绿咖啡绿咖啡日本日本1997199735357474100-1740100-17402021-11-629赭曲毒素赭曲毒素a a在各种商品中的存在情况（在各种商品中的存在情况（2 2）商商 品品 国国 家家 文献发表文献发表年份年份 被分析的样被分析的样品数品数 出现率出现率（% %） 含量范围含量范围(g/kg)(g/kg)绿咖啡绿咖啡英国英国199719972222505050-578750-5787可可粉可可粉英国英国199619965050100100225-37000225-37000干果干果英国英国199619964848989

43、8600-37650600-37650酒酒德国德国1996199664648989550-6320550-6320调味品调味品/ /本本草植物草植物德国德国1996199631731727276-71326-71322021-11-630赭曲霉毒素在饲料中的污染情况赭曲霉毒素在饲料中的污染情况饲料饲料国家国家样品数量样品数量污染率污染率（% %）污染浓度范围污染浓度范围（ppbppb）麦类麦类波兰波兰1501505.35.350-20050-200混合混合波兰波兰2032034.94.910-5010-50大麦大麦南斯拉夫南斯拉夫1911912.02.045-512545-5125大麦、燕大麦

44、、燕麦麦瑞典瑞典84848.08.016-40916-409麦类麦类加拿大加拿大292962.06227000麦类麦类丹麦丹麦333357.657.628-2750028-275002021-11-631中国部分地区谷物中赭曲霉毒素中国部分地区谷物中赭曲霉毒素a a的污染情况的污染情况谷物谷物样品数样品数阳性阳性阳性阳性数数阳性率阳性率（% %）含量范围含量范围（ug/kg)ug/kg)平均含量平均含量（ug/kg)ug/kg)小麦小麦61061012122 28-328-32玉米玉米79679610101.251.258-308-30大米大米36360 0总计总计1

45、442144222221.51.58-308-3017172021-11-632赭曲霉毒素赭曲霉毒素a a的限量标准的限量标准国际食品法典委员会提议：赭曲霉毒素国际食品法典委员会提议：赭曲霉毒素a a在小麦、大麦、黑麦及其它们的在小麦、大麦、黑麦及其它们的制品中不得超过制品中不得超过5ug/kg5ug/kg。 瑞士：猪混合料瑞士：猪混合料200ug/kg, 200ug/kg, 家禽混合料家禽混合料1000ug/kg1000ug/kg。 欧盟欧盟: : 速溶咖啡速溶咖啡-6, -6, 烤制咖啡烤制咖啡-3,-3,干果干果-2,-2,干无花果干无花果-8 -8 g/kgg/kg。德国德国20032

46、003年制定了最新的标准年制定了最新的标准: :咖啡及其制品中的赭曲霉毒素咖啡及其制品中的赭曲霉毒素a5a5g/kg g/kg 。2021-11-633赭曲霉毒素的检测方法赭曲霉毒素的检测方法 aoac 2000.03 aoac 2000.03 免疫亲和柱免疫亲和柱+hplc+hplc法测定大麦中的赭曲霉毒素法测定大麦中的赭曲霉毒素aoac 2000.09 aoac 2000.09 免疫亲和柱免疫亲和柱+hplc+hplc法测定烤制咖啡中的赭曲霉毒素法测定烤制咖啡中的赭曲霉毒素aoac 2001.01 aoac 2001.01 免疫亲和柱免疫亲和柱+hplc+hplc法测定酒和啤酒中的赭曲霉毒

47、素法测定酒和啤酒中的赭曲霉毒素2021-11-634伏马菌素特性伏马菌素特性伏马菌素（伏马菌素（fumonisinsfumonisins）19881988年被发现，其主要是由真菌年被发现，其主要是由真菌f. moniliformef. moniliforme和和f. f. proliferatumproliferatum产生的次级代谢产物。产生的次级代谢产物。粮食在加工、贮存、运输过程中易受上述两种真菌污染，特别是当温度适宜，粮食在加工、贮存、运输过程中易受上述两种真菌污染，特别是当温度适宜，温度较高时，更利于其生长繁殖，产生一类结构性质相似的毒素，其中以伏马温度较高时，更利于其生长繁殖，产生

48、一类结构性质相似的毒素，其中以伏马菌素菌素b1b1、b2b2和和b3b3为主。为主。 为一类相关的极性、水溶性代谢产物，为多氢醇和丙三羧酸的双酯化合物为一类相关的极性、水溶性代谢产物，为多氢醇和丙三羧酸的双酯化合物对热很稳定，不易被蒸煮破坏对热很稳定，不易被蒸煮破坏2021-11-635fbfb1 1对饲料污染的情况在世界范围内普遍存在，且对粮食作物的污染情况较严重，其污染的对饲料污染的情况在世界范围内普遍存在，且对粮食作物的污染情况较严重，其污染的饲料主要为以玉米为原料的饲料。饲料主要为以玉米为原料的饲料。表现出促癌活性，不仅是促癌剂，而且是一个完全的致癌物表现出促癌活性，不仅是促癌剂，而且

49、是一个完全的致癌物对猪产生肺水肿综合症（对猪产生肺水肿综合症（ppeppe），并被怀疑可诱发人类的食道癌等疾病，从而对畜牧业及人），并被怀疑可诱发人类的食道癌等疾病，从而对畜牧业及人类的健康构成威胁类的健康构成威胁 ）羊的肝病样改变和肾病羊的肝病样改变和肾病大鼠的肝坏死和心室内形成血栓大鼠的肝坏死和心室内形成血栓抑制鸡的免疫系统，增强二乙基亚硝胺的致肿瘤作用抑制鸡的免疫系统，增强二乙基亚硝胺的致肿瘤作用可导致马产生白脑软化症（可导致马产生白脑软化症（elemelem），神经性中毒而呈现意识障碍、失明和运动失调，甚至），神经性中毒而呈现意识障碍、失明和运动失调，甚至造成死亡造成死亡 ）对我国海门

50、地区进行的对我国海门地区进行的3 3年的跟踪研究结果表明：伏马毒素还可使人导致肝癌年的跟踪研究结果表明：伏马毒素还可使人导致肝癌 伏马菌素危害性伏马菌素危害性2021-11-636伏马毒素在玉米及饲料中的发生情况伏马毒素在玉米及饲料中的发生情况商商 品品国国 家家文献年份文献年份 样品数样品数出现率出现率% %含量范围含量范围g/kgg/kg玉米饲料玉米饲料英国英国199819986767979725-2700025-27000玉米饲料玉米饲料英国英国199719975050808050-455050-4550玉米饲料玉米饲料英国英国19971997266266292910-212410-21

51、24玉米饲料玉米饲料美国美国19971997121121202042-35042-350玉米饲料玉米饲料台湾台湾19971997153153343473-239573-2395玉玉 米米中国中国19971997240240565650-3486850-34868玉玉 米米印度印度1997199735357474100-1740100-1740玉玉 米米乌拉圭乌拉圭199719972222505050-578750-5787玉玉 米米阿根廷阿根廷199619965050100100225-37000225-370002021-11-637伏马菌素在饲料中的推荐限量伏马菌素在饲料中的推荐限量 饲料

52、（玉米及其产品） 限量标准(fb1+fb2+fb3) mg/kg马和兔5（不超过日食量的20%）猪和鲶鱼20（不超过日食量的20%）产子发反刍动物、家禽、貂30（不超过日食量的20%）大于3个月饲养用于屠宰的反刍动物、饲养用于制作裘皮的貂60（不超过日食量的20%）用于屠宰的家禽100（不超过日食量的20%）2021-11-638其它国家和地区对玉米中伏马菌素含量的限量标准(mg/kg)：韩国、南非、中国台湾7.9德国、意大利12021-11-639美国美国fdafda对伏马毒素在人类食品中的推荐限量标准对伏马毒素在人类食品中的推荐限量标准 人类食品人类食品推荐限量标准推荐限量标准(fb1+f

53、b2+fb3) (fb1+fb2+fb3) (mg/kg)(mg/kg)玉米面及其制品（脂肪含量小于玉米面及其制品（脂肪含量小于2.25%2.25%） 2 2玉米面及其制品（脂肪含量大于玉米面及其制品（脂肪含量大于2.25%2.25%） 4 4干玉米麸干玉米麸 4 4用于做润湿粉糊生产的净化玉米用于做润湿粉糊生产的净化玉米4 4用于做爆玉米花的干净玉米用于做爆玉米花的干净玉米 3 32021-11-640伏马菌素的检测方法伏马菌素的检测方法薄层色谱法薄层色谱法气相色谱法（气相色谱法（gcgc）elisaelisa法法hplchplc法法免疫亲和柱净化免疫亲和柱净化- -荧光法荧光法免疫亲和柱净

54、化免疫亲和柱净化-hplc-hplc法法2021-11-641玉米赤霉烯酮的性质玉米赤霉烯酮的性质白色结晶白色结晶对热稳定对热稳定, 120, 120下加热下加热4h4h未见分解未见分解 溶解性能溶解性能, ,溶于碱性水溶液、乙醚、苯、氯仿溶于碱性水溶液、乙醚、苯、氯仿 等溶剂等溶剂有有1515种以上的衍生物种以上的衍生物2021-11-642玉米赤霉烯酮的毒性玉米赤霉烯酮的毒性 玉米赤霉烯酮具有较强的生殖毒性玉米赤霉烯酮具有较强的生殖毒性 ，对动物具，对动物具有较强的危害作用，会给畜牧业带来一定危害有较强的危害作用，会给畜牧业带来一定危害 玉米赤霉烯酮至少能够对一种哺乳动物具有致玉米赤霉烯酮

55、至少能够对一种哺乳动物具有致畸效应畸效应 玉米赤霉烯酮对免疫系统的具有潜在毒害作用玉米赤霉烯酮对免疫系统的具有潜在毒害作用 2021-11-643玉米赤霉烯酮的发生情况玉米赤霉烯酮的发生情况 玉米赤霉烯酮首先从赤霉病玉米中分离，其玉米赤霉烯酮首先从赤霉病玉米中分离，其主要存在于玉米和玉米制品中，小麦、大麦、主要存在于玉米和玉米制品中，小麦、大麦、高粱、大米中也有一定程度的分布。高粱、大米中也有一定程度的分布。2021-11-644玉米玉米赤霉烯酮赤霉烯酮在各种商品中的发生情况在各种商品中的发生情况商商 品品国国 家家文献年文献年份份样品数样品数出现率出现率% %含量范围含量范围g/kgg/kg

56、玉米饲料玉米饲料英国英国199819986767525220-180020-1800谷物谷物埃及埃及1997199713513518185-455-45家禽饲料家禽饲料阿根廷阿根廷199719973003001 130-28030-280小麦小麦德国德国1997199744544531311-80361-8036大麦大麦德国德国1997199724024022222-3112-311玉米玉米加拿大加拿大1997199712612669695-6475-647大麦大麦加拿大加拿大199719972102101 14-214-21小麦小麦瑞士瑞士19961996154154161610-12110

57、-121小麦小麦瑞士瑞士199619961231234 410-1810-18霉烂的玉米霉烂的玉米 美国美国1996199698986767100-21400100-21400玉米玉米阿根廷阿根廷199619962271227130305-20005-20002021-11-645我国部分地区小麦中玉米赤霉烯酮的污染情况我国部分地区小麦中玉米赤霉烯酮的污染情况 地区地区样品数样品数阳性样品数阳性样品数阳性率阳性率（）（）平均值含量范围平均值含量范围（g/kgg/kg）江苏江苏5454353564.864.80.051(0-0.30)0.051(0-0.30)安徽安徽8383191922.922

58、.90.032(0-0.30)0.032(0-0.30)河南河南60607 711.711.70.008(0-0.05)0.008(0-0.05)甘肃甘肃101101414140.640.60.015(0-0.30)0.015(0-0.30)江西江西41415 512.212.20.006(0-0.06)0.006(0-0.06)上海上海100100333333.033.00.011(0-0.30)0.011(0-0.30)总计总计43943914014031.931.90.051(0-0.78)0.051(0-0.78)2021-11-646部分国家和地区对玉米赤霉烯酮的限量标准部分国家和地

59、区对玉米赤霉烯酮的限量标准国家国家食品品种食品品种允许限量允许限量( (g/kgg/kg） 奥地利奥地利小麦、裸麦小麦、裸麦6060硬麦硬麦6060巴西巴西玉米玉米200200中国中国小麦、玉米小麦、玉米6060法国法国谷物、菜油谷物、菜油200200罗马尼亚罗马尼亚所有食品所有食品3030俄罗斯俄罗斯硬质小麦、面粉硬质小麦、面粉 10001000小麦胚芽小麦胚芽 10001000乌拉圭乌拉圭玉米、大麦玉米、大麦2002002021-11-647玉米赤霉烯酮的检测方法玉米赤霉烯酮的检测方法薄层色谱法（薄层色谱法（tlctlc）：）：适用于小麦及其制品和玉米及其制品中适用于小麦及其制品和玉米及其

60、制品中zenzen的测定，方法的的测定，方法的灵敏度为灵敏度为5050g/kg g/kg 酶联免疫吸附法（酶联免疫吸附法（elisaelisa）：）：适用于谷物适用于谷物/ /饲料、啤酒、血清和尿中玉米赤霉烯酮饲料、啤酒、血清和尿中玉米赤霉烯酮含量的测定含量的测定 ，最低检出限分别为，最低检出限分别为1250 ng/kg1250 ng/kg，250 ng/kg250 ng/kg，50 ng/kg50 ng/kg免疫亲和柱净化高效液相色谱法（免疫亲和柱净化高效液相色谱法（ia-hplcia-hplc） ：适用于谷物（玉米、小麦、大麦、适用于谷物（玉米、小麦、大麦、大米）、油籽（大豆、油菜籽）和食