第11章 动物细胞培养所需要的基本条件 (1)_第1页
第11章 动物细胞培养所需要的基本条件 (1)_第2页
第11章 动物细胞培养所需要的基本条件 (1)_第3页
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文档简介

1、动物细胞工程动物细胞工程(animal cell engineering)对动物的细胞、组织或器官进行培养、细胞融合、细胞重组、遗传物质转移和生殖工程等，从细胞水平改变动物细胞的遗传特性，用于生产特定生物制品、培育动物新品种。动物细胞培养和反应器、细胞融合和单克隆抗体、干细胞和组织工程动物细胞工程发展历史：Ø 1907：组织培养的鼻祖蛙胚神经培养（R. Harrison）Ø 1940：首次进行了单个细胞的克隆培养（W. Earle）Ø 1965：首次用灭活的仙台病毒实现种间杂交（Okada）&#

2、216; 1972：脐带血干细胞治疗白血病Ø 1976：建立杂交瘤培养（Kohler和Milstein）Ø 1986：Demo Biotech用杂交瘤细胞生产单抗Ø 1997：克隆羊Dolly诞生（Roslin研究所）Ø 1998：建立人胚胎干细胞系（Thomson）第十一章 动物细胞培养所需要的基本条件动物细胞培养基的组成和制备影响动物细胞培养的环境条件动物细胞 特点；无细胞壁倍增时间长，生长缓慢需氧量少，对搅拌敏感聚集体形成原代细胞培养50代即开始退化动物细胞培养定义动物

3、细胞与组织培养是从动物体内取出细胞或者组织，模拟体内的生理环境，在无菌、适温和丰富的营养条件下，使离体细胞或者组织生存、生长并维持结构和功能的一门技术。是动物细胞工程的基础。动物细胞培养营养要求Ø 基础培养基：碳源、氮源、维生素、微量元素，等渗溶液、缓冲pHEagle、F10、RPMI1640、Fischers等Ø 血清：5-20%Ø 辅助因子：贴壁因子（纤黏素、明胶等）、抗生素、生长因子（EGF、NGF等）开发无血清培养基是动物细胞工程的重要内容11.1 动物细胞培养基的组成和制备水和平衡盐溶液天然培养基合成培养基无血清培

4、养基一、水和平衡盐溶液水：三蒸水或超纯水平衡盐溶液：在生理盐水基础上发展起来的，用来洗涤组织细胞以及配制溶液。如：Hanks液，PBS缓冲液二、天然培养基1、血清（serum）：血浆去处纤维蛋白原所得，使用最多。包括胎牛血清、小牛血清、新生犊牛血清、马血清、兔血清、羊血清、人血清等。使用前灭活。2、胚胎提取液：如鸡胚和牛胚提取液3、水解乳白蛋白：含丰富的氨基酸4、鼠尾胶原：促进组织和细胞的附着。三、合成培养基组成：氨基酸、维生素、无机离子、碳源、其他。配制方法：如RPMI-1640(2g Hepes, 2g NaHCO3)四、无血清培养基血清：1.激素和生长因子2.结合蛋白3.贴壁因子和铺展因子4.微量元素和低分子量营

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