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1、 基于表面等离子体共振的基于表面等离子体共振的H6亚型禽流感病毒快速检测的亚型禽流感病毒快速检测的光纤传感器的初步研究光纤传感器的初步研究物联网1303 刘 伟20137700背背 景景 01目录目录内内 容容02 03结 果表面等离子体共振(SPR)是一种物理光学现象,当一束平面单色偏振光在一定的角度范围内照射到两种不同折射率的介质界面(如玻璃表面的金属银或金镀层)发生全反射时,当入射光的波向量与金属薄膜内表面电子的振荡频率相匹配时,光线即被耦合进入金属膜,引起电子发生共振,即表面等离子体共振。有许多缺点,如成本高、体积大、移动机械部件。标线也避开棱镜的机械复杂性。以避免这些缺点,光纤已被许
2、多研究人员作为一个更紧凑的和负担得起的激发光耦合到表面等离子体能够替代。SPR生物传感器禽流感的暴发和流行是一种新兴的威胁到世界各地的公共卫生,因为这种疾病通常会导致高发病率和潜在的死亡率。快速诊断和及时监测潜在的禽流感疫情,使控制禽流感继续构成挑战。传统的检测方法,使用,病毒等化、免疫和分子测试。然而,分离和鉴定的病毒需要复杂的程序,是耗时的。原理简介 侧光光纤表面等离子体共振(SPR)制作的以暴露芯表面再敷用波长为40 nm的金薄膜的表面附近的有效感知传感器折射率的变化与表面浓度或捕获的禽流感病毒亚型H6厚度。通过等离子改性制备光纤SPR传感器检测表面分类方法结合自组装单层异丙醇化学在光纤
3、的金表面。随后,N-(3-二甲氨基丙基)/ N-羟基琥珀酰亚胺进行活化,使eb2-b3单克隆抗体捕获/鸡/ 2838v / 00(H6N1)通过流动注射系统。02具体内容具体内容LOREM包括一个薄金膜和侧磨的结构,类似于SPR棱镜耦合激发的电磁波的传播,VES在光纤是局限于满足全反射条件,芯包结构。当入射角大于材料的临界角时,就消失了接口可以与金属和辩证层进行交互。SPR传感的核心区域的曝光可以通过剥离的熔覆层的各向同性化学埃特切,这是很难的均匀金膜的圆形沉积。从熔覆层到核心区域的定向机械抛光,将允许更好的薄膜质量和因此,尽量减少由于制造工艺的变化。光纤SPR传感器具有侧磨结构示意图包括一个
4、850纳米的LED光源,侧流式细胞抛光SPR光纤一六口,介质压力喷射阀的舱壁,注射器泵、光电探测器和一个omm-6810b ILX功率计。光学系统采用850 nm LED光源是用来监测aiv-h6交互响应的实时使用的流通过程。PBS是由注射器泵通过推侧抛光光纤进入流电池,并记录在每个步骤中的时间的函数的变化的透射光强度。光纤SPR传感器表面改性与羧基山姆层和用EDC和NHS活化后,如图所示。单克隆抗体eb2-b3稀释在碳酸钠缓冲液(15 mM Na2CO3 35 M碳酸氢钠,pH 9.6)然后涂上的微孔板;随后,微孔板孵育4 C过夜。用PBS洗涤后,板块被一堵洗涤三次后30 min,共37处
5、C.缓冲液150 m l /培养,板孵育with150毫升/禽流感或气管样本从鸡30微型37 后盘子都洗了五次,一eb2-e5-mab-hrp 1:800稀释100毫升/(检测Tor的抗体)被添加到板上,并保持在37 C 30分钟。光密度(OD)在450 nm与ELISA阅读器读取(生物- Tek的仪器、威努斯基,VT)。用Trizol提取RNA从气管匀浆。采用RT-PCR方法检测流感aiv-h6 RNA。一套h6ha基因特异性引物(进行al.,2001)。这个RT-PCR扩增:反转录在42 C 30分钟,变性95 C 3分钟,其次是35个周期的95 C 30 S,50 C 40,C 72 4
6、0美国随后的mplification产物进行1.5%琼脂糖凝胶电泳,和目标带是由safeview核酸染色染色可视化。光纤SPR传感器的比较,对甲型流感/鸡2838v / 00临床样本的检测方法及检测03结结 果果描述了SPR信号从制作的光纤传感器的各种aiv-h6浓度。透射光强归一化计算每从生物分子的结合产生的光强度的百分比变化。无特定病原(SPF)抗原为阴性对照我们为了确定光纤SPR传感器检测的特异性图1(a)。当SPF抗原的浓度 CFU / M L 100的注入流动单元,发送如发生相应的变化。在60 升/分钟的流速,100 l样品流经传感器,100秒后用PBS漂洗后,SPF抗原的SPR信号仍接近巴塞尔在透射光的强度,这意味着 CFU/mL SPF抗原阴性对照样品没有eb2-b3对aiv-h6单克隆抗体反应。相比之下,发射的光强度对aiv-h6was洗掉多余的量明显增加。图1(b)显示传感信号从通常制作SPR传感器。在aiv-h6注定与稀释1至1000,透射光强变化从100% to106.5 %,表明检测限是aiv-h6 1000稀释。对光纤SPR传感器验证、干扰和重代实验确认。如图2(a),强度从11.7兆瓦to11.9 MW,然后对初始强度水平。图2(b)显示该协会和地通过使用问候语cfu/mL大肠杆菌单克隆抗体eb2-b3
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