新生儿溶血的检测zhy

1、病理生理病理生理 rh溶血溶血 abo溶血溶血胎儿红细胞溶血重胎儿红细胞溶血重心力衰竭心力衰竭髓外造血髓外造血肝脾肿大肝脾肿大胎儿全身水肿胎儿全身水肿低蛋白血症低蛋白血症胎儿重度贫血胎儿重度贫血胎儿血中胆红素胎儿血中胆红素新生儿黄疸新生儿黄疸母亲肝脏母亲肝脏 胎盘胎盘娩出时黄疸不明显娩出时黄疸不明显 新生儿处理胆红素新生儿处理胆红素血清血清ucb过过高高胆红素脑病胆红素脑病 血脑屏障血脑屏障 胎儿红细胞溶血轻胎儿红细胞溶血轻抗体*：有临床意义的不规则抗体数据来自transfusion 1984 nov-dec;24(6):482-5.妻子血型妻子血型丈夫配合血型丈夫配合血型丈夫不配合血型丈夫不

2、配合血型o oo oa a、 b b、 ababa ao o、 a ab b、 ababb bo o、 b ba a、ababababo o、 a a、 b b、 abab/ /rhdrhd+ +rhdrhd- rhd- rhd- -/ /rhdrhdrhdrhd- -rhdrhd+ +效价测定方法：效价测定方法： 应用应用2-2-巯基乙醇（巯基乙醇（2-me2-me）或二硫苏糖）或二硫苏糖醇（醇（dttdtt）破坏或中和）破坏或中和igmigm抗体使之不能再抗体使之不能再与盐水介质中相对应的红细胞凝集。经处与盐水介质中相对应的红细胞凝集。经处理后的血清加盐水进行倍比稀释理后的血清加盐水进行倍

3、比稀释 加入相对加入相对应的红细胞用间接抗球蛋白法检测。应的红细胞用间接抗球蛋白法检测。如何检测igg类血型抗体？实验室检查实验室检查 试验名称目的方法结果判定 意义直接抗人球蛋白试验测定患儿红细胞上结合的血型抗体“最适稀释度”的抗人球蛋白血清与充分洗涤后的受检红细胞盐水悬液混合红细胞凝聚为阳性红细胞已致敏，为确诊实验rh溶血病阳性率高而abo溶血病低抗体释放试验测定患儿红细胞上结合的血型抗体使患儿致敏红细胞结合的母体血型抗体释放于释放液中，该释放液与同型成人红细胞混合，再加入抗人球蛋白血清红细胞凝聚为阳性检测致敏红细胞的敏感试验，为确诊实验rh和abo溶血病一般均为阳性游离抗体试验测定患儿血

4、清中来自母体的血型抗体在患儿血清中加入与其相同血型的成人红细胞，再加入抗人球蛋白血清红细胞凝聚为阳性估计是否继续溶血和换血效果，不是确诊试验abo-hdn患儿rh-hdn患儿 热放散法提取致敏红细胞表面的抗体，将抗体放散于盐水溶液中，然后加入经酶处理的a、b、o红细胞，做间接抗球蛋白试验。注意事项：洗出尽可能多的红细胞进行放散；放散液的温度不能超过56，以防溶血；天冷时放散液离心注意保温；将尽可能多的放散液吸出；注意除去放散液中残留的红细胞。注意 在放散试验的结果观察中，会遇到一种交叉反应性抗-ab抗体，它针对的特异性是a和b抗原所共有的，因而它能凝集a型和b型红细胞，抗-ab同样可引起abo

5、溶血病。产前检测父母血型检测、抗体筛查、igg类抗体效价的监测产后检测 新生儿血型，rh-hdn新生儿rh血型的检测 直抗试验 游离试验 放散试验：abo-hdn热放散，rh-hdn乙醚放散 rh-hdn排除合并abo：新生儿血清、放散液n血型检查:孕妇为o、ccdee、nn 型; 丈夫为a、ccdee、mm型;患儿为o、ccdee、mn型n孕妇血清抗体初筛与鉴定检测：孕妇血清抗体初筛与鉴定检测：孕妇血清与谱细胞反应格局见下表n孕妇血清孕妇血清igg抗体效价检测抗体效价检测根据结果分析，可能由哪种抗体引起的hdn?n根据检查结果，孕妇血清在盐水介质中与谱细胞均不凝集,在抗人球介质中仅与e抗原阳

6、性的红细胞反应,提示孕妇血清中含有抗- e,效价为1: 128。n新生儿血型血清学三项实验检测结果：患儿红细胞直接抗人球蛋白实验 2 + ;游离抗体试验患儿血清中检出抗- e;新生儿红细胞采用乙醚放散试验,放散液中检出抗- e,证实新生儿溶血病是由来自母体的rh血型系统抗- e免疫所致。 患儿,女,生后1 h,因生后皮肤黄染、吐沫1 h转入本科。患儿系母孕40+ 1周第2胎剖宫产分娩(第1胎女孩, 7岁,血型rh阳性o型),因母亲血型疑为rh阴性a型,由产科转入本科。查体:体温36. 8 ,呼吸60次/min,心率130次/min,体质量3 750 g, 反应可, 皮肤轻度黄染,以颜面及躯干部

7、为主,未见出血点,双肺呼吸音粗,心音有力,律齐,无杂音。腹软,肝右肋下可及,脾不大,四肢无水肿,新生儿反射可引出,经皮胆红素126mol/l,即刻送血检测。 coombs试验报告:新生儿血型abo系统a型, rh系统du 型。 新生儿血清学检验: 1. 直接抗人球蛋白试验阳性; 2. 抗体释放试验阳性; 3. 游离抗体检测阳性。疑难血型鉴定报告: abo血型a型, rh (d) ccdu ee。血清中免疫性抗d效价64, 故考虑溶血病发生为rh血型系统抗d引起 母亲血型a型rh(d) ccduee血清中免疫性抗-d效价256, 明确诊断新生儿rhdu 血型不合溶血病。n一般资料：产妇，女，36

8、岁，汉族，14年前因产后大出血而输全血1 u4年前因做淋巴结切除术而输全血2 u。曾怀孕4次存活一子女此次再次分娩产下一男婴。患儿，男，4 d，因胆红素高(3omddl)，贫血严重怀疑为血型不合引起的新生儿溶血病n血型鉴定：母亲a型，rh红细胞表型为ccdee。新生儿abo血型正定型为o，rh红细胞表型为ccdee。n新生儿直抗试验强阳性(+)n游离及释放试验：取患儿血清用谱细胞做游离试验同时取三洗后的患儿压积红细胞用乙醚做释放试验。结果见下表n根据谱细胞格局，患儿血清中可能存在抗一d，抗一c和抗一e，放散液中可能存在抗一d，抗一c。n4号谱细胞只有d抗原而无c和e抗原但它与患儿血清和释放液在

9、抗人球介质中均为阳性反应，说明血清和释放液中均存在抗一d。同样，5号谱细胞只有c抗原，而无d和e抗原但它与患儿血清和释放液在抗人球介质中均为阳性反应，说明血清和释放液中均存在抗一c。6号谱细胞只有e抗原而无d和c抗原，但它与患儿血清在抗人球介质中均为阳性反应，说明血清存在抗一e。n吸收放散试验：为了进一步确认血清和放散液中抗体的种类， 做了吸收放散试验。患儿放散液与o ccdee型红细胞在37吸收1 h吸收后的放散液与ccdee细胞在抗球蛋白介质中无反应说明放散液中无抗一c。n患儿血清与o ccdee型红细胞在37c吸收1 h吸收后的血清与ccdee细胞在抗球蛋白介质中有反应，而与ccdee无

10、反应，说明血清中有抗一d。n患儿母亲有多次妊娠史并多次输注全血这两种途径均有可能产生免疫性抗体。rh抗体往往具有联合作用，具有c和(或)d抗原的红细胞几乎无例外地都有g抗原。虽然抗一g表现是抗一cd，但是它不能被分离为抗一c和抗一d。抗一g显然是与d和c的一个共同部位特异性反应。d阴性人被c(一)d(+)血免疫后，产生的抗体不仅与d阳性红细胞反应也与c阳性红细胞反应：而d阴性人被c(+)d(一)血免疫后，得到的抗体也包含抗d成分ng抗原的概念能够解决血清学存在的一些迷惑，如此例中该患儿母亲rh血型为ccdee新生儿rh血型为ccdee。患儿红细胞表面缺乏d抗原，而释放液中却存在抗一d说明患儿红

11、细胞吸附的是抗一g而不是抗一d。而患儿血清中也相应存在抗一g。：减轻病情，治疗贫血减轻病情，治疗贫血。n给予持续蓝光照射,静脉滴注丙种球蛋白0.9g/kg,白蛋白1.0g/kg,0.595mol/l碳酸氢钠3.0ml/kg;n出生后3h检测结果:红细胞1.601012/l,血红蛋白66g/l,总胆红素18511mol/l。立即进行换血治疗,换血持续3h。n换血后检测结果:红细胞5.631012/l,血红蛋白183g/l,总胆红素146.8mol/l,dat弱阳性(镜下呈混合凝集),血浆igg抗-d效价4,红细胞放散液抗-d效价16。 n继续给予蓝光照射及静脉滴注丙种球蛋白、白蛋白等治疗,换血后

12、3d内患儿总胆红素仍有所升高,至出生后72h最高达213.5mol/l,此后逐渐下降。n患儿换血后无嗜睡、发热尖叫、抽搐等症状,于生后36h开始正常经口喂养,生后10d测总胆红素101.8mol/l,查体各项指标无异常,新生儿行为神经测定(nbna)39分,经过临床综合治疗,痊愈出院。 患女，39岁，孕4产1停经23周，自觉胎动减弱为主诉 入院，a型rh d抗原阴性。此次入院前曾应用中药(茵陈，大黄甘草等)治疗，并于孕20周开始十日疗法(葡萄糖，vitc静注，每日吸氧)，抗d效价256。患者曾于17岁时困贫血输a型血200ml。并于1983年第一次顺产一足月女婴，15d后婴儿死亡。产后患者输a

13、型血200ml，有意识不清，寒战，发热血红蛋白尿等严重输血反应，患者血型为a型，ccdee，当时结台病史和化验确诊为rh血型不合新生儿溶血病；1985年第二次妊娠，于24周出现胎儿腹水，行血浆置换(pe)两次，每次换出血浆500ml，置换液为新鲜冰冻血浆，胎儿于32周死亡；1989年有短暂孕史。 21 血浆置换 入院后于孕23周，孕23周+4，孕24周行3次膜式血浆置换，每次换出血浆2000ml，置换血浆为a型新鲜冰冻血浆在第三次置换末应用了600mia型rh阴性血浆。为减少rh阳性血浆内残余的红细胞抗原对机体的刺激。所有血浆均经二次离心并冰冻保存。患者于第一次置换过程中出现全身荨麻疹和皮肤痒

14、。并有自觉呼吸困难经静脉侧臂输人10mg地塞米松后缓解。 第二次置换时，置换前输入20mg地塞米松，无过敏现象出现。第三次pe后1天患者抗体效价降为32，鉴于抗体效价已有效控制，故决定于25周开始每周置换一次，但在25周准备置换前2天测抗体效价反跳为2048，继续以前方法不能控制抗体上升，且自25周开始b超发现发生胎儿腹水。结合患者在血浆置换过程中出现较严重的过敏反应。再进行异体血浆置换已不能保证母儿平安，故决定实行自体血浆体外吸收后回输和静脉注射免疫球蛋白方法以控制抗体效价。分析其抗体效价反跳可能与以下因素有关胎儿rh阳性红细胞持续入血可能是开始治疗后抗体效价仍然上升的原因之一。置换液中残留

15、红细胞污染。抗体合成反跳：一些自身免疫性疾病，如sle、重症肌无力的病人进行pe时也存在抗体反跳的现象。22 自体血浆体外吸收将孕妇经膜式血浆置换机换出液收集在2000ml装无菌袋中，每袋收集血浆l000ml，每次换出血浆量见表1。血浆内加入等量abo同型rh阳性压积红细胞，热合后放入外包袋内。 将血袋放于37水浴箱内孵育，每15min轻摇混匀。2h后取出血袋，在超净台内分入400ml装无菌血袋内，3600rmin，离心10min。 将血浆分入2000ml无菌袋中留样品测游离血红蛋白、ph值、细菌培养、并测抗体效价。符合输注条件，放入一80冰箱内冰冻贮存下次置换时回输，置换程序见表1。每次置换

16、末静脉注白蛋白50g、球蛋白10g。换出的血浆体外吸收后各成分变化见表2。应用自体血浆有以下益处：回输的是自体血浆，避免了过敏反应的发生；大大降低了输血传播疾病的发病率。由于抗d抗体只占体内免疫球蛋白极少部分吸收后抗体基本清除而血浆中的免疫球蛋白量几乎无变化 避免血液中免疫球蛋白的过分下降避免了阳性红细胞的刺激。 23 用此方法共对患者进行血浆置换4次，每周2次。并于孕27w和28w在b超引导下行经脐静脉宫内输血，2次分别输入35ml、15ml rh(一)o 型rbc。患者于孕28w自觉胎动停止，胎心监护显示胎心停跳，胎儿死亡。病例报告 患者33岁，孕5产l，宫内妊娠l8周；平时月经规则，末次

17、月经1998年8月3日，预产期1999年5月10日。停经4周有早孕反应，尿妊娠免疫试验(+)，孕l6周始自觉胎动。孕8周检查 igg抗a抗体效价为1：512，给予茵陈汤治疗。孕l3周igg 抗a抗体效价为1：256，孕l6周及l7周均为1：512。在我院行b超下羊膜腔穿刺术，术中发现羊水金黄色，羊水胆红素升高，拟诊为母儿血型不台，abo溶血待查。婚育史：结婚8年，分别于1990年、1992年、1994年，因孕8个月、5个月、5个月b超发现胎儿水肿而引产，1996年人工流产1次。身体检查：一般情况好，全身皮肤及巩膜无黄染，无水肿、瘀癍、出血点等。全身浅表淋巴结无肿大，心肺无异常。腹部稍膨隆，肝脾

18、肋下未扪及，双肾区无扣击痛，移动性浊音(一)。产科检查：腹围81 m，宫高15 m ，胎方位不清，胎 音148次，骨盆外测量各径线在正常范围。n实验室检查：血及尿常规、生化及肝功髂检查、夫妇双方地中海贫血检查无异常。女方为o型血，男方为a型血，rhd均阳性，igg抗a抗体效价为1：2048。羊水检查胎儿血型为a型，羊水igg抗a抗体效价为1：256，羊水总胆红素为1026umol/l。n入院后给予吸氧，服茵陈汤、维生素、叶酸、强的松等治疗，行血浆置换共10次，并分别在孕27周 及30周行宫内输血具体操作：(1)b超估计胎儿体重。(2)洗涤红细胞的制备 (3)脐带穿刺：在b超下用22号穿刺针行脐

19、带穿刺，抽出脐血约lml，检测血常规及血型，同时停留穿刺针。(4)(4)宫内输血：宫内输血：在b超监测下经原停留的穿刺针，按002003 mekg注入肌松剂 万可松(il。m1|oii)，记录胎动捎失的时间 按i2 mlmin的速度输入备好的浓缩洗涤红细胞，输入总量20 mlkg。输血过程中b超密切橙测胎儿情况，并定期回抽脐血，以确定穿刺针是否停留在脐带中，同时记录术前、术中、术后的胎心率。术后记录自觉有胎动的时问，胎动恢复后行胎儿监护，并定期行b超、胎儿监护、胎儿心电图、胎儿脐血血流图等检查，均未发现异常。 1999年4月6日孕35周十1在连续硬膜外麻醉下行子宫下段剖宫产术，娩出一活女婴，a

20、评分为1o分，5rain为1o分，体重2 5o0g，身长46cm ，新生儿分娩后抽脐血检查血型、血常规、胆红紊及血清学3项试验，均支持abo溶血诊断。输血前和出生后脐血血红蛋白为85、121、131 g/l，红细胞压积分别为025、037、034，红细胞为256 x l012 、3961012 、449 x l0 12l。胎儿出生后与宫内输血前比较，血红蛋白及红细胞压积差异有显著性(p0o5)，胎儿贫血得到明显改善。新生儿转儿科行换血治疗1次，以后检测血胆红素无升高，未出现黄染，一般情况好，于生后11 d出院。患儿，男，出生后10 h，足月经阴道分娩。系第二胎(第一胎于2年前流产)。产后即发现全身皮肤黄染，呈进行性加重，伴呻吟、气促10 h从外院转入我院。体查：贫血貌、肝于右肋下3 cm，质软，边缘光滑。脾于左肋下45 cm，扪及，质中等，边缘光滑。颜面浮肿。实验室检查：hb 74 gl，总胆红素414umo