恶性肿瘤病人血清细胞角蛋白19片段等四联检结果分析

1、恶性肿瘤病人血清细胞角蛋白 19片段等四联检结果分析杭州师范学院医学院生化教研室 (310012 顾怡生浙江省肿瘤医院 (310022 肖必文 蔡菊芬 内容提要 目的 :探讨恶性肿瘤病人血清细胞角蛋白 19片段 (CY FRA21-1 、 恶性肿瘤特异性生长因子(TSG F 、 糖链抗原 (C A50 、 癌胚抗原 (CE A 的含量改变在恶性肿瘤诊断中的意义 。 方法 :连续收集一年中各类恶性肿瘤病人共 689例 , 同时设立非恶性肿瘤组和健康体检组作为对照 ; 采用放免或生化等方法检测血清CY FRA21-1、 TSG F 、 C A50、 CE A 的含量 , 然后分析比较 。 结果 :

2、恶性肿瘤组的血清 CY FRA21-1、 TSG F 、 C A50、 CE A含量分别为 6164±14125(ng/ml 、 79173±15194(U/ml 、 12137±30158(U/ml 、 14120±38176(ng/ml , 均明显高于非恶性肿瘤组和健康体检组 , 差异有高度显著性 (p <0101 。 CY FRA21-1、 TSG F 、 C A50、 CE A 测定的敏感度分别为 3513%、 6911%、 810%、 1210%, 测定的特异度分别为 9117%、 8313%、 9816%、 9311%; 四项联检的阳性

3、率明显提高 。 对于各类恶性肿瘤 ,TSG F 含量均高于对照组 , 差异有高度显著性 (p <0101 , 检测的阳性率一般 >60%;大部分恶性肿瘤的血清 CY FRA21-1水平亦升高 , 与对照组相比差异有显著性 (p <0105 。 结论 :通过恶性肿瘤 689例分析 , 联合检测血清 CY FRA21-1、 TSG F 、 C A50、 CE A 含量能提高恶性肿瘤诊断的阳性率 ;CY FRA21-1和 TSG F 测定在肿瘤临床诊断和肿瘤普查中都有较重要的应用价值 。关键词 恶性肿瘤 细胞角蛋白 恶性肿瘤特异性生长因子 糖链抗原 癌胚抗原 诊断Combined

4、Determination of Serum CYFRA21-1,TS GF ,CA50,CEA for Malignant TumorG u Y ishengDepartment o f Biochemistry , Hangzhou Medical College , Hangzhou , (310012X iao Biwen , Cai Ju fenC AI Jufen , Zhejiang Cancer Hospital , Hangzhou (310022 Abstract Objective T o explore the diagnostic significance of th

5、e levels of serum cytokeratin 19fragments (CY FRA21-1 、 tum or specific growth factor (TSG F 、 carbohydrate antigen (C A50 、 carinoembry onic antigen (CE A in patients with malignant tum or. Methods The levels of serum CY FRA21-1、 TSG F 、 C A50、 CE A were measred by immunoradiomentric assay or bioch

6、emical determination in 689patients with malignant tum or , the controls com prise 40 patients without malignant tum or and 32pers ons for health examination. Re sults The levels of serum CY FRA21-1、 TSG F 、 C A50、 CE A were 6164±14125(ng/ml 、 79173±15194(U/ml 、 12137±30158(U/ml 、 141

7、20±38176(ng/ ml respectively in the group of malignant tum ors , and were significantly higher than those in the controls (p <0101 . The sensitivity of measurement of CY FRA21-1、 TSG F 、 C A50、 CE A were 3513%、 6911%、 810%、 1210%and the specificity were 9117%、 8313%、 9816%、 9311%respectively

8、. The positive rate were significantly increased when combined determinations of serum CY FRA21-1、 TSG F 、 C A50、 CE A. The levels of serum TSG F were higher signifi 2 cantly in all kinds of malignant tum or then those in the controls (p <0101 , and the positive rates was m ore than 60% generally

9、. And for CY FRA21-1, the serum levels of patients with many different kind of malignant tum ors were als o significantly higher then those in the controls (p <0101 . Conclusion C ombined determination of CY FRA21-1、 TS 2 G F 、 C A50、 CE A can increase the positive rate of diagnosis for malignant

10、 tum or , m oreover , the measurement of TG SF and CY FRA21-1is valuable in both clinic diagnosis and mass screening.K ey Words Malignant tum or , Cytokeratin , Tum or specific growth factor , Carbohydrate antigen , Carcinoembry on 2 ic antigen , Diagnosis 肿瘤标志物的检测是恶性肿瘤诊断的常用手段之一 。 本文通 过 689例 恶 性 肿 瘤

11、 患 者 血 清 细 胞 角 蛋 白 19片 段 (CY FRA21-1 、 恶性肿瘤特异性生长因子 (TSG F 、 糖链抗原 (C A50 、 癌胚抗原 (CE A 含量的联合检测 , 分析探讨它们在 2 7 2恶性肿瘤诊断中的意义 。材 料 和 方 法一 、 对象 :(一 恶性肿瘤组 :自 2000年 5月起一年中在浙江省肿瘤 医院核医学科作肿瘤标志物 CY FRA21-1、 TSG F 、 C A50、 CE A 等测定的病人 , 选取经临床和影像学 、 实验室或病理学诊断 证实为恶性肿瘤患者 , 其中常见的恶性肿瘤有肺癌 206例 、 鼻咽癌 183例 、 食管癌 62例 、 胃癌

12、25例 、 大肠癌 18例 、 肝癌 19例 、 乳腺癌 72例 , 淋巴瘤 81例 、 颅内恶性肿瘤 23例 , 合计 共 689例 (男 507, 女 182 , 年龄 1381岁 , 年龄中位数 54岁 (另有其他几十种恶性肿瘤 , 因病例数太少 , 本文不作统计 。 设立两种对照 。 非恶性肿瘤对照组 (简称对照组 :共 40例 (男 29, 女 11 , 年龄 2473岁 , 年龄中位数 56岁 , 为就 诊的非恶性肿瘤病人 。 健康体检组 (简称体检组 :共 32例 (男 13, 女 19 , 年龄 2573岁 , 年龄中位数 48岁 , 为参加 体检的普通人群 。二 、 方法 :

13、静脉采血 , 分离血清 , -20 保存 ; 每份标本一 周内同时作以上四项检测 。 CY FRA21-1放免分析试剂盒由 美国 Centocor 公司提供 ,TSG F 检测试剂盒由福建新大陆生物 技术有限公司提供 ,C A50免疫放射分析试剂盒由协和医药 科技有限公司提供 ,CE A RI A kit 由法国 CIS 公司提供 。 操作 按说明书 , 试剂盒内配有质控血清或质控标准品 。测量仪器 中 XH6010全自动 计数仪由西安 262厂生产 ,721型分光光 度计由上海第三分析仪器厂生产 。血清参考正常值为 :CY FRA21-1:<313ng/ml ; TSG F :阴性 &

14、lt;64U/ml , 可疑 64 71U/ml , 阳性 >71U/ml ;C A50:<25U/ml ;CE A :<15ng/ml 。 三 、 统计学处理 :各组测定值以 x ±s 表示 , 组间数据比 较用 t 检验 , 计数资料比较用 x 2检验 。全部数据运用 Mi 2 cros oft Excel 97软件和 SPSS 1010for Windows 软件处理 。结 果恶性肿瘤病人与非恶性肿瘤者的血清 CY FRA21-1、 TS 2 G F 、 C A50、 CE A 水平比较 , 各项测定的差异均有高度显著性 (p <0101 ; 而对照组与

15、体检组之间各项指标的差异均无显 著性 (p >0105 (表 1 。表 1 恶性肿瘤组 、 对照组及体检组血清 CY FRA21-1、 TSG F 、 C A50、 CE A 含量 ( x ±s 及比较分组 例数 CY FRA21-1(ng/ml TSG F (U/ml CA50(U/ml CE A (ng/ml 恶性肿瘤组 对照组 体检组 t 值 (1 t 值 (2 t 值 (3 68940326164±141252108±01862104±11078110371993011679173±1519460177±12127581

16、05±161039133371483017913137±301587133±61736180±4174310731883013714120±38176 7185±6132 7113±4179 31463 41153 0152 注 1:t 值 (1 为恶性肿瘤组与非恶性肿瘤对照组比较 ; t 值 (2 为恶性肿瘤组与体检组比较 ; t 值 (3 为非恶性肿瘤组与体检组比较 注 :2:3:p <01001; :p <0101 对恶性肿瘤检测的敏感度 , 四项测定中以 TSG F 最高 , CY FRA21-1次之 ,

17、C A50和 CE A 较低 , 差异有高度显著性 (p <0101 ; 而另一方面 , 各项检测的特异度都在 80%以上 , 且 对照组和体检组的差别不大 , 差异均无显著性 (p >0105 , 故 本文中合并计算 (表 2 。各类恶性肿瘤时 , TSG F 都明显升高 , 与对照组相比较 , 差异 均 有 高 度 显 著 性 (p <01001 ; 对 于 多 数 恶 性 肿 瘤 , CY FRA21-1含量也明显升高 , 与对照组相比较差异有显著 性 (p <0105 (表 3 。表 2 血清 CY FR A21-1、 T SG F 、 C A50、 CE A

18、检测敏感度与特异度 检测项目恶性肿瘤例数 阳性数 敏感度 (%非恶性肿瘤例数 阳性数 特异度 (% CY RFA21-1TSGFCA50CEA689689689689476243558335136911810121072727272612159117 8313 9816 9311表 3 各类恶性肿瘤血清 CY FRA21-1、 TSG F 、 C A50、 CE A 含量 ( x 及比较分组 例数 CY FRA21-1(ng/ml TSG F (U/ml CA50(U/ml CE A (ng/ml 肺癌 鼻咽癌 食管癌 胃癌 大肠癌 肝癌 乳腺癌 淋巴瘤 颅内恶性肿瘤 对照组 20618362

19、2518197281234010145±1912735135±1011137108±151448101±1313215131±261087189±121101186±21372140±31191119±016632108±018684148±#177#177#177#177;12177382167±16180373160±10188379130±15184

20、374127±11118360177±1212712176±251769173±91928144±515150142±#177;919720105±12172310176±816910185±81536100±31727133±617324113±511903 7186±22193 8134±7186 20143±70128 34178±79176 23139±69153 8165±16189

21、 6122±3155 6167±8173 7185±6132 与对照组比较 3:p <01001; :p <0101; :p <0105 3 7 2 对于大多数恶性肿瘤 ,TSG F 检测阳性率较高 (>60% , CY FRA21-1检测阳性率次之 (30%50% ,C A50和 CE A 的 检测阳性率较低 ; 四项联检的阳性率明显增高 (70%90% (表 4、 图 1表 4 各类恶性肿瘤患者血清 CY FRA21-1、 TSG F 、 C A50、 CE A 及四项联检阳性率分别 例数TSG F阳性例数 阳性率 (%CY FRA21

22、-1阳性例数 阳性率 (%C A50阳性例数 阳性率 (%CE A阳性例数 阳性率 (%四项联检 阳性例数 阳性率 (%肺癌 鼻咽癌 食管癌 胃癌 大肠癌 肝癌 乳腺癌 淋巴瘤 颅内恶性肿瘤 合计 206183622518197281236891571174718131543531347676121631937518172100721227819559172651435615269109105642312796172435019734197371104810038189471378133201990100351271812251647558178615631232018351563115851

23、568164010071981057252721832512421371112981332717810153917221474135121041801375521141746581354187138 74186 88171 84100 77178 89147 63189 71160 56152 781 52图 1 恶性肿瘤病人血清 TSG F 、 CY FRA 、 CA50、 CE A 检测阳性率 (%讨 论细胞角蛋白 (cytokeratin , CK 主要存在上皮细胞胞浆中 , 是构成细胞骨架的一类中间丝状物 , 有多种类型 , 其中以细 胞角蛋白 19(CK 19 片段 CY FRA21

24、-1(cytokeratin 19fragments 在恶性肿瘤诊断中最为重要 ; 细胞癌变时 CK 19释放增加 , 这 与 CK 19的 DNA 基因组改变有关 ,CK 19经蛋白酶降解或细胞 凋亡后其碎片释放入血 1,2。 TSG F (tum or specific growth fac 2 tor 是由恶性肿瘤细胞产生的与肿瘤的生长和周边毛细血管 的增生有关的一类特殊物质 , 随着恶性肿瘤的形成增长而逐 步释放到外周血液中 , 在恶性肿瘤形成的早期即可达到检出 浓度 3。 C A50(carbohydrate antigen 50 属于鞘糖脂类肿瘤标 志物 , 为去岩藻糖基的 C A

25、19-9, 其抗原表位含有唾液酸化 的 型乳糖系四糖 。 C A50存在于许多器官的上皮组织的细 胞膜内 , 许多恶性肿瘤 , 尤其是胰腺癌 、 胃肠道癌等病人的血 清 C A50含量升高 , 故多年来用于多种恶性肿瘤的检测 4。 CE A (carcinoembry onic antigen 为分子量 20万左右的糖蛋白 , 属于 IgG 超基因家庭的成员 ; 人类 CE A 家庭包含 29个基因 , 其中 18个基因表达 5。 上述四种属于不同种类的肿瘤标志 物 , 对于各种恶性肿瘤的检测敏感度有较大的差别 (图 1 , 而 联检能明显提高阳性率 , 这在恶性肿瘤的诊断中有重要意 义 。C

26、E A 和 C A50是应用较早的肿瘤标志物 , 尤其是 CE A 在 三十多年中一直是世界范围内应用最广泛的肿瘤标志物之 一 , 它在消化道癌 , 特别是大肠癌诊断中的作用也一直是教 科书和教学中的经典内容 。 但我们的检测中值得注意的是 , 尽管一部分大肠癌患者血清 CE A 水平升高十分明显 , 尽管整 体上看恶性肿瘤病人血清 CE A 含量亦升高 , 但对于各类恶性 肿瘤 (包括大肠癌等 ,CE A 在检测阳性率并不高 (<30% ; 部分学者亦认为 CE A 检测在大肠癌早期诊断中意义并不 大 6, 而人们更为重视血清 CE A 水平升高与大肠癌发生转 4 7 2移 、 肿瘤术

27、后复发 、 病人的预后等之间的联系 7,8,CE A 的其 它生物学功能如细胞粘附及其诊断作用等亦开始引起关 注 9。近些年来 ,CY FRA21-1和 TSG F 检测的应用日趋广泛 , 尽管国外医学文献中有关 TSG F 的报道并不多见 , 但国内已 有不少文献论述了 TSG F 检测在恶性肿瘤诊断中的作用 10, 具有相当高的检测阳性率 , 某些地区已将 TSG F 检测应用于 肿瘤普查 。 在我们的四个项目测定中 , 对于本文涉及的各种 恶性肿瘤 ,TSG F 检测阳性率都最高 , 其血清含量与对照组相 比差异均有高度显著性 。 我们也认为 TSG F 检测在肿瘤普查 中具有较大的应用

28、价值 ; 但是 ,TSG F 检测的特异度低于其他 三项测定 , 尽管仍大于 80%, 但实际检测中除 15%左右的假 阳性外 , 还有部分非肿瘤患者以及健康人群的 TSG F 含量处 于可疑范围 , 这是肿瘤普查 、 筛选和临床诊断中不能忽视的 问题 。 对 于 CY FRA21-1检 测 , 尽 管 主 要 用 于 肺 癌 的 诊 断 11, 我们的检测中亦注意到肺癌 、 鼻咽癌 、 食管癌 、 胃癌 、 大肠癌 、 肝癌等多种恶性肿瘤患者血清 CY FRA21-1含量也 明显升高 , 有较高的检测阳性率 , 且特异度较高 , 国外文献亦 有相关的报道 ; 同时 , 人们开始探索 CY F

29、RA21-1水平与疾病 预后之间的关系 12。 我们认为 , 血清 CY FRA21-1测定不仅 是医院中用于肿瘤诊断的重要检测项目 , 并且和 TSG F 检测 一样 , 也是肿瘤普查中具有一定实用价值的指标 。另外 , 我 们还注意到 , 颅内肿瘤病人血清 CY FRA21-1含量明显降低 , 与对照组比差异有高度显著性 (p <01001 , 值得研究探讨 。参 考 文 献1D ohm oto K, H ojo S , Fujita J , et al. M echanisms of the release ofCY FRA21-1in human lung cancer cell

30、 lines. Lung Cancer 2000;30(1 :552SheardM A , V ojtesek B , S imickova M , et al. Release of cytokeratin -18and 19fragments (TPS and CY FRA21-1 into the extracellular space during apoptosis. J Cell Biochem 2002;85(4 :6703高文斌、 戚晓军、 尹淑珍 , 等。 血清恶性肿瘤生长因子检测在肝癌介入治疗中的意义。 上海免疫学杂志 1998;18(2 :1264Bunworasate

31、U , V oravud N. CA50:a tum or marker for gastrointestinal malignancies. J M ed Ass oc Thai 1995;78(5 :2555HammarstromS. The carcinoembry onic antigen (CE A family :structures suggested functions and expression in normal and malignant tissues. Semin Cancer Biol 1999;9(2 :676Duffy M J. Carcinoembry on

32、ic antigen as a marker for colorectal cancer :is it clinically useful ? Clin Chem 2001;47(4 :6247MulcahyMF , Bens on AB 3rd. The role of carcinoembry onic antigen m on 2itoring in management of colorectal cancer. Curr Oncol Rep 1999;1(2 :1688Ebeling FG, S tieber P , Untch , et al. Serum CE A and CA

33、15-3as prognostic factors in primary breast cancer. Br J Cancer 2002:86(8 :12179Maxwell P. Carcinoembry onic antigen :cell adhesion m olecule and useful diagnostic marker. Br J Biomed Sci 1999;56(3 :20910黄介花、 王秀钦、 蔡桦。肿瘤特异性生长因子 (TSG F 检测分析。肿瘤防治研究 2000;27(3 :2511BuccheriG, Ferrigno D. Lung tum or markers of cytokeratin origin :an overview. Lung Cancer 2001;34Suppl 2:6512ReinmuthN , Brandt B , Semik M , et al. Prognostic im pact of Cy fra21-1and other serum markers in com plet