临床检验基础

1、第1章 血液标本采集和血涂片制备1、临床检验的意义：为疾病诊断和鉴别诊断提供筛检或确诊断依据、为疾病疗效监测和预后判断提供动态依据、为预防疾病提供依据、为疾病治疗提供依据和材料、健康咨询、 为医学科学研究提供检验基本方法和数据2、血清与血浆相比，缺少纤维蛋白原。3、采血方法： 毛细血管采血法、静脉采血法、动脉采血法4、常用添加剂的用途和应用范围：5、 抗凝剂：应用物理或者化学方法除去或者抑制血液中某些凝血因子（Ca2+）的活性，以阻止血液凝固的物质。乙二胺四乙酸盐(EDTA)：螯合钙离子；枸橼酸盐：螯合钙离子；肝素：与抗凝血酶集合，加强抗凝血酶III灭活丝氨酸蛋白酶，从而阻止凝血酶形成，并有阻

2、止血小板聚集等作用。草酸盐：草酸钙沉淀6、 溶血原因：注射器和容器不干净未取下针头直接用力将血液注入容器抗凝血混合时用力过猛采血时注射器和针头不紧，混入空气，产生泡沫消毒后未待乙醇挥发干后再穿刺采血时，定位不准，在静脉中反复探针7、 瑞氏染色：碱性染料：为阳离子染料，染细胞核、淋巴细胞胞质和嗜碱性颗粒的染料。染成紫色或者兰色，如亚甲蓝、天青。酸性染料：为阴离子染料，主要有伊红，能结合细胞的碱性成分并染成粉红色，如血红蛋白、 嗜酸性颗粒成分等。复合染料：同时具有阴、阳离子型的染料如瑞氏染料中性颗粒呈等电状态与酸碱染料均可结合，染淡紫红色，称为中性物质。第2章 外周血液血细胞形态学检查1、 异常形

3、态红细胞大小异常 ：小红细胞<6 µm缺铁性贫血/珠蛋白生成障碍性贫血/铁粒幼细胞性贫血/遗传性球性红细胞增多症大红细胞>10 µm溶血性贫血/巨幼细胞性贫血巨红细胞>15 µm肝病大小不均重度增生性贫血形状异常球形红细胞遗传性球性红细胞增多症, HS椭圆性红细胞遗传性椭圆形细胞增多症>25%口形红细胞遗传性口形红细胞增多症棘形红细胞遗传性脂蛋白缺乏症靶形红细胞珠蛋白生成障碍性贫血镰形红细胞珠蛋白合成异常裂片性红细胞DIC泪滴形红细胞骨髓纤维化缗钱状红细胞多发性骨髓瘤Hb含量、结构和排列异常：珠蛋白、亚铁血红素结构异常：红细胞内出现多余的异

4、常结构嗜碱性点彩红细胞嗜碱蓝黑色颗粒豪-焦小体脾切除、脾功能低下、巨幼细胞性贫血卡玻环嗜多色性，点彩红细胞质中出现紫红色细线圈状结构，环型，8字型有核红细胞溶血性贫血、一周内婴幼儿可见少量2、 缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血和珠蛋白生成障碍性贫血红细胞特点缺铁性贫血小细胞低色素、大小不均巨幼细胞性贫血大红细胞高色素、大小不均溶血性贫血红细胞碎片，卡波环、嗜多色性红细胞、球形红细胞有核红细胞珠蛋白生成障碍性贫血小细胞低色素、靶形红细胞3、 在我国流行的主要是间日疟原虫和恶性疟原虫，三日疟少见，卵形疟仅发现几例。 4、 白细胞形态检查中性粒细胞分叶：核分25叶，叶之间细丝相连或者断开杆状：核弯曲呈杆状

5、、带状、腊肠样凹陷超过核假设直径一半，但最窄处大于最宽处1/3。嗜酸性粒细胞核多分2叶，眼镜状，橘红色嗜酸性颗粒嗜碱性粒细胞紫黑色嗜碱颗粒，覆盖核上，核可分3-4叶，但形态看不清淋巴细胞大淋巴细胞、小淋巴细胞单核细胞体积最大，胞质淡蓝色，毛玻璃半透明，核有肾型、马蹄形等，折叠感5、 异常白细胞形态：中性粒细胞核象变化、棒状小体、中性粒细胞毒性变化、淋巴细胞形态异常。6、 核左移：概念：外周血液的中性杆状粒细胞增多或（和）出现晚幼粒细胞、中幼粒细胞。甚至早幼粒细胞的现象称为核左移。临床意义：1） 再生性核左移：核左移伴白细胞总数增高称为再生性核左移，提示骨髓造血功能和释放能力旺盛，机体抵抗力强，

6、多见于急性化脓性感染、急性中毒、急性溶血和急性失血等。2） 退行性核左移：核左移伴白细胞总数正常或减少称为退行性核左移，提示骨髓释放功能受到抑制，机体抵抗力差，见于再生障碍性贫血、粒细胞缺乏症、伤寒等。类型： 白细胞、中性粒细胞 中性杆状核 幼稚细胞 毒性变化轻度左移略升高>5%无中度左移增高>10% 晚幼粒、中幼粒重度左移明显增高>25% >中幼粒 中毒颗粒,空泡变性,核变性7、核右移概念：外周血液的中性分叶核粒细胞增多，并且5叶核以上的中性粒细胞3%时称为核右移。临床意义：造血功能衰退，造血物质缺乏的表现，常伴WBC减少。8、 Pelger-Huët an

7、omaly（佩-许异常）：表现为成熟中性粒细胞核分叶能力减退。常为杆状和分两叶，呈肾形或哑铃形。染色质聚集成小块或条索网状，其间有空折间隙。9、 中性粒细胞毒性变化的分类和形态学特点：在严重传染病，化脓性感染，中毒，恶性肿瘤，大面积烧伤等情况下，可一起出现也可单独出现。空泡变性脂肪变性、胞核与胞质均可以出现、严重感染、中毒中毒颗粒比中性颗粒大，大小不一，染色深，黑色或者紫色，与空泡同时出现杜勒小体蓝斑，呈云雾状、圆形、梨形天蓝色或者蓝黑色棒状小体一条或者几条红色细杆状、白血病鉴别Chediak-Higashi异常溶酶体，巨大颗粒，大小不一，直径可达25 µm，容易感染，伴白化病10、

8、 异型淋巴细胞概念：在病毒（如腺病毒、人类疱疹病毒等）、原虫（如弓形虫）感染，药物反应、结缔组织疾病、应激状态或过敏原等因素刺激下，淋巴细胞增生并发生形态上的变化，表现为胞体增大、胞质增多、嗜碱性增强、细胞核母细胞化，称为异型淋巴细胞。形态特点I型：空泡型或者浆细胞型类似淋巴细胞大小，胞质丰富，嗜碱性深蓝色，有大小不等空泡，无颗粒，核偏位，略固缩。II型：不规则型，单核细胞型胞体较大，外形不规则，呈花边状，似单核细胞，胞质量多，呈浅蓝或者蓝色，无空泡，可有少量天青颗粒，胞核圆形或者不规则，染色质疏松。III型：幼稚型，未成熟型胞体较大，胞质量多，呈蓝或者深蓝色，偶有空泡，无颗粒，胞核大较规则，

9、染色质细致均匀。第3章 血液一般检验1、 红细胞计数显微镜计数法：用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入血细胞计数池中（改良牛鲍氏计数板），于显微镜下计数一定体积内的细胞数，经过换算求得每升血液内的红细胞数。计算：红细胞数/L=5个中方格内RBC数×5×10×200×106参考范围：成人：男性×1012 /L 女性3.5-5.0 ×1012 /L 新生儿×1012 /L2、 血红蛋白测定合成：健康人的血红蛋白合成于有核红细胞期，特殊情况下网织红细胞也可以合成。受红细胞生成素和雄激素的调节。测定：血红蛋白的测定通常是指测定血液中

10、各种血红蛋白的总浓度,用g/L表示。氰化高铁血红蛋白法（HiCN）参考范围：成年男性120160g/L；女性110150g/L；新生儿170200g/L；老年（>70Y）男性94122g/L；女性87112g/L3、 RBC和Hb的临床意义：转运氧气和二氧化碳4、 红细胞压积：是指红细胞容量在全血容量中所占体积的比值。5、 红细胞平均指数：红细胞平均容积（MCV）：即每个红细胞的平均体积，以飞升（fl）为单位。80100 红细胞平均血红蛋白含量（MCH）：即每个红细胞内平均所含血红蛋白的量以皮克（pg）为单位，2634。红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）：即平均每升红细胞中所含血红蛋白浓

11、度，以克/升（g/l）为单位，320360。6、 冷凝集素：RBC显著降低，Hb正常，MCV、MCH假性增高。7、 网织红细胞计数：是晚幼红细胞脱核后到完全成熟的红细胞之间的过度型细胞，因其胞质内残存核糖体，核糖核酸等嗜碱性物质，经新亚甲蓝，煌焦油蓝活体染色后，胞质中出现蓝绿或深兰色网点状结构（两个或者两个以上）而得名。 方法：活体染色：指细胞未经固定，在保持细胞生物活性的情况下加染料进行染色的方法。8、 网织红细胞生成指数（RPI）临床意义：判断骨髓红细胞造血情况（有效无效造血）：增多：表示骨髓生成旺盛。常见于溶贫，放疗和化疗后造血恢复时。减少：见于再障，溶贫危象时，典型再障网织红常低于0.

12、05%，绝对值低于15×109/L观察贫血疗效：缺铁贫，巨幼贫治疗过程中，如果Ret上升，表明治疗有效，骨髓增生功能良好，如果Ret不增高，表明治疗无效，提示骨髓造血功能障碍。骨髓移植后监测骨髓造血恢复：骨髓移植后第21天,若Ret大于15×109/L，表明无移植并发症；若小于15×109/L伴中性粒和血小板增高，提示骨髓移植失败。9、 红细胞沉降率(ESR)血沉：红细胞在特制的血沉管中于一定单位时间内下沉的距离称为红细胞沉降率。反映红细胞聚集性；魏氏法（Westergren法，WHO推荐）、血沉仪法。参考范围：男性 0-15 mm/h；女性0-20 mm/h临床

13、意义：病理性升高：炎症。组织损伤坏死、贫血、高胆固醇血症、肾炎和肝硬化等。 良、恶性肿瘤鉴别：炎性高于肿瘤，恶性高于良性。 动态观察病情：风湿免疫疾病。10、 白细胞计数：用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数并破坏红细胞后，在显微镜下计数一定容积中的白细胞数，经换算求得每升血液中的白细胞总数。参考值：成人（410）×109 /L；新生儿（1520）×109 /L；6月2岁（1112）×109 /L11、 白细胞分类计数：将血液制成涂片，经染色后在油镜下进行分类，求得各种类型白细胞的比值（百分率）。12、 嗜酸性粒细胞直接计数：每升血液中嗜酸性粒细胞的浓度。13、白细胞

14、计数和白细胞分类计数的临床意义 见书P4514、类白血病反应（LKR）：外周白细胞增多同时，伴一种或者多种幼稚细胞出现为主要特征的类似白血病的反应。15、血小板变化临床意义生理变化：新生儿较低，出生3个月后达成人水平；妇女月经前减低，经后增加；妊娠中晚期升高，分娩后12天降低；正常人每天血小板有610的波动，午后略高于早晨；运动、餐后增高，休息后恢复；静脉血与毛细血管血计数高约10血小板增多：一过性增多：见于急性大出血、脾切除后、急性溶血之后； 持续性增多：真性红细胞增多症、慢粒、原发行血小板增多症、多发性骨髓 瘤、某些恶性肿瘤早期。血小板减少：血小板生成减少：见于造血功能受到损害，如再障、急

15、白、某些药物影响、 急性放射病； 血小板破坏亢进：见于ITP（血小板减少性紫癜）、脾亢； 血小板消耗增多：见于DIC、血栓性血小板较少性紫癜第4章 血栓与止血一般检查1、 血液凝固：是由凝血因子按一定顺序相继激活而生成凝血酶，最终使纤维蛋白原变为纤维蛋白的过程。2、 正常止血过程依赖完整的血管系统，血小板功能，血浆凝血因子和纤维蛋白溶解活性之间的相互协调。3、 血管壁止血作用：收缩功能、激活血小板、激活凝血系统、局部粘度增高4、 GPb-复合物：vWF受体、参与粘附5、 GPb-a复合物：纤维蛋白原受体、参与聚集6、 血小板止血功能：粘附功能、聚集功能、释放及促凝反应、收缩功能7、 凝血机制：

16、1.内源凝血途径：从F激活至Fa-a-Ca2+-PF3的形成（内源性因子转化复合物） F的激活：固相激活：由胶原、玻璃、白陶土激活; 液相激活：由激 肽释放酶( KK)水解激活2.外源凝血途径：从F释放至TF-a- Ca2+的形成 （外源性因子转化复合物） 3.共同凝血途径：从F激活至纤维蛋白形成。 Fa-a-Ca2+-PF3凝血酶原酶激活凝血酶原（F）, F a使纤维蛋白原转化为纤维蛋白8、 抗凝系统：光滑的血管壁、有效的抗凝血系统（一般的生理或生化抗凝血系统、纤维蛋白溶解系统）9、 纤溶系统：使生理止血过程中所产生的局部或一过性的纤维蛋白凝块能随时溶解，防止血栓形成，保证血流通畅；纤溶系统

17、还参与组织修复、血管再生等多种功能。过程：1.纤溶酶原的激活2.纤维蛋白（原）降解10、 检验方法一期止血缺陷筛查试验：血管壁、血小板异常（出血时间、血小板计数、束臂实验等）二期止血缺陷筛查试验：凝血和纤溶异常（全血凝固时间、活化部分凝血活酶时间、血浆凝血酶原时间、凝血酶时间、纤维蛋白原等）出血时间（BT）：皮肤毛细血管经人为刺破后血液自行流出到自然停止需经历一系列止血凝血过程。BT异常与血小板数量和功能、血管壁完整性、某些凝血因子缺乏等有关。凝血酶原时间( PT)：是在体外测定血浆凝固所需的时间，用以反映外源性凝血因子是否正常，是筛检止凝血功能的一种方法，也是监测口服抗凝剂用量有效的检测指标

18、。国际敏感度指数（ISI）：是用多份不同凝血因子水平的血浆与国际参考制品（IRP）作严格的校准，通过回归分析求得回归斜率而得到的，代表凝血活酶试剂对凝血因子缺乏的敏感性，ISI值越低则敏感性越高，进口凝血活酶试剂均标有ISI值。国际标准化比率（INR）：用凝血活酶所测得的参比血浆与正常血浆的PT比值和所用试剂标出的ISI值计算出INR，使不同的凝血活酶试剂测得的结果具有可比性。活化部分凝血活酶时间（APTT）：是在体外测定血浆凝固所需的时间，用以反映内源性凝血因子是否正常，是筛检止凝血功能最基本、最常用的方法之一。血浆纤维蛋白原（FIB)：凝血酶时间(TT)：是测定凝血共同途径纤维蛋白原转变为

19、纤维蛋白过程中是否存在异常抗凝现象的试验。纤维蛋白降解产物（FDP）：主要反映是否存在血栓形成或纤溶亢进的试验。血浆D二聚体DD：是检测继发性纤溶的特异性试验第5章 血液分析仪检验1、 电阻抗法：根据血细胞非传导的性质，以电解质溶液悬浮颗粒在通过计数小孔时引起的电阻变化进行放大，阈值调节，甄别、整形，最后送入计数系统计数和体积测定。脉冲的大小 细胞体积的大小 脉冲的数量 细胞的数量2、 三分群：WBC数：>35fL第一群：3590fL 小细胞区：淋巴细胞第二群：90160fL 中间细胞：单核细胞、嗜酸、嗜碱原始细胞、幼稚细胞第三群：>160fL 大细胞区：中性粒细胞3、 射频电导法：区分电阻抗法所不能区分的体积一样的细胞。如：淋巴细胞和嗜碱性粒细胞。大小一样；核质比不同；颗粒不同4、 流式细胞术（五分类主要检测原理）：细胞悬液（稀释、染色、