血液学检验珠蛋白异常

1、第十二章第十二章 珠蛋白异常珠蛋白异常第一节第一节 概概 述述v一、血红蛋白的构造与功能一、血红蛋白的构造与功能v血红蛋白是红细胞内的运输蛋白，约血红蛋白是红细胞内的运输蛋白，约65%的血红蛋白合成于有核红细胞期，另有的血红蛋白合成于有核红细胞期，另有35%合成于网织红细胞阶段。合成于网织红细胞阶段。v其分子量为其分子量为64458。v它的主要功能是吸收肺部大量的氧，并将其输送到身体的各组织。它的主要功能是吸收肺部大量的氧，并将其输送到身体的各组织。1、血红蛋白的组成、血红蛋白的组成 血红蛋白血红蛋白亚铁血红素亚铁血红素 铁卟啉铁卟啉4分子分子甘氨酸甘氨酸Fe2+珠蛋白珠蛋白1分子分子 由氨基

2、酸组成由氨基酸组成6种肽链：种肽链：每每1个珠蛋白分子有个珠蛋白分子有4个多肽链，而每一个肽键又和三个铁卟啉结合。个多肽链，而每一个肽键又和三个铁卟啉结合。 2、血红蛋白的种类、血红蛋白的种类 正常成人红细胞中有正常成人红细胞中有3种血红蛋白：种血红蛋白： 成人血红蛋白：成人血红蛋白：HbA22) 96%-98% 成人次要血红蛋白成人次要血红蛋白:HbA222)1%-3.1% 胎儿血红蛋白胎儿血红蛋白:HbF 22) 2%以下以下 胚胎血红蛋白胚胎血红蛋白: HbG1( 22) HbG2 (22) HbP( 22) 3周周-12周周3、血红蛋白的功能、血红蛋白的功能血红蛋白的主要功能是输送氧气

3、和二氧化碳。血红蛋白的主要功能是输送氧气和二氧化碳。当空气被吸入肺部时，空气中的氧气与肺泡膜壁血液中的血红蛋白进展疏松的结合，形成氧合血当空气被吸入肺部时，空气中的氧气与肺泡膜壁血液中的血红蛋白进展疏松的结合，形成氧合血红蛋白红蛋白HbO2，随血液流到全身各组织内，随血液流到全身各组织内，因组织内氧分压较低，所以氧合血红蛋白即被解离而放出一部分氧，以供给细胞的代谢需要。因组织内氧分压较低，所以氧合血红蛋白即被解离而放出一部分氧，以供给细胞的代谢需要。v在此同时，血红蛋白即与组织中某些物质氧化后所产生的二氧化碳结合成为氨基甲酸血红蛋在此同时，血红蛋白即与组织中某些物质氧化后所产生的二氧化碳结合成

4、为氨基甲酸血红蛋白白HbNHCOOHHbNHCOOH，又称碳酸血红蛋白运输到肺部，放出，又称碳酸血红蛋白运输到肺部，放出CO2CO2。v血红蛋白如此不断地运输血红蛋白如此不断地运输O2O2和和CO2CO2。v此外，血红蛋白也有调节机体酸碱平衡的缓冲作用。此外，血红蛋白也有调节机体酸碱平衡的缓冲作用。4、影响血红蛋白构造和功能的因素、影响血红蛋白构造和功能的因素 1珠蛋白基因缺失或缺陷珠蛋白基因缺失或缺陷 珠蛋白肽链合成缺乏或不能合成珠蛋白肽链合成缺乏或不能合成 氨基酸交换或丧失氨基酸交换或丧失 红细胞形态异常：红细胞形态异常： 靶形、镰状红细胞靶形、镰状红细胞 2酶缺陷酶缺陷 高铁血红蛋白复原

5、酶系统缺陷高铁血红蛋白复原酶系统缺陷 MHb形成形成 3化学药物中毒化学药物中毒 MHb SHb HbCO 二、珠蛋白异常二、珠蛋白异常v珠蛋白合成是在各自珠蛋白基因控制下完成的。珠蛋白合成是在各自珠蛋白基因控制下完成的。v珠蛋白肽链合成异常珠蛋白肽链合成异常,必然造成必然造成Hb合成障碍。合成障碍。v珠蛋白分子构造异常时，称为珠蛋白分子构造异常时，称为Hb分子病。分子病。v当一种或几种珠蛋白肽链合成量的异常时当一种或几种珠蛋白肽链合成量的异常时, 称为珠蛋白生成障碍性贫血，以往称地中海贫血，现亦称海洋性贫称为珠蛋白生成障碍性贫血，以往称地中海贫血，现亦称海洋性贫血。血。珠蛋白异常珠蛋白异常

6、包括：包括：珠蛋白肽链构造异常珠蛋白肽链构造异常(异常血红蛋白病异常血红蛋白病)肽链合成异常肽链合成异常(珠蛋白生成障碍性贫血珠蛋白生成障碍性贫血)珠蛋白生成障碍性 贫 血thalassemia珠蛋白生成障碍性贫血珠蛋白生成障碍性贫血地中海贫血又称海洋性贫血地中海贫血又称海洋性贫血是一组遗传性溶血性贫血。是一组遗传性溶血性贫血。其共同特点是由于珠蛋白基因的缺陷使血红蛋白中的珠蛋白肽链有一种或几种合成减少或不能合成。其共同特点是由于珠蛋白基因的缺陷使血红蛋白中的珠蛋白肽链有一种或几种合成减少或不能合成。导致血红蛋白的组成成分改变，本组疾病的临床病症轻重不一，大多表现为慢性进展性溶血性贫血。导致血

7、红蛋白的组成成分改变，本组疾病的临床病症轻重不一，大多表现为慢性进展性溶血性贫血。 病因和发病机制病因和发病机制 本病是由于珠蛋白基因的缺失或点突变所致。本病是由于珠蛋白基因的缺失或点突变所致。 组成珠蛋白的肽链有组成珠蛋白的肽链有4 4种种 ，即，即、链，分别由其相应的基因编码，这些基因的缺失链，分别由其相应的基因编码，这些基因的缺失或点突变可造成各种肽链的合成障碍或点突变可造成各种肽链的合成障碍 , ,致使血红蛋白的组分改变。致使血红蛋白的组分改变。 通常将地中海贫血分为通常将地中海贫血分为、和和等等 4 4种类型，其中以种类型，其中以和和地中海贫血较为常见地中海贫血较为常见。 珠蛋白生成

8、障碍性贫血珠蛋白生成障碍性贫血 人类人类珠蛋白基因簇位于珠蛋白基因簇位于 11p15.5 11p15.5。 地中海贫血简称地中海贫血简称地贫的发生主要是由于基因的点突变，少数为基因缺失。地贫的发生主要是由于基因的点突变，少数为基因缺失。 基因缺失和有些点突变可致基因缺失和有些点突变可致链的生成完全受抑制，称为链的生成完全受抑制，称为0 0 地贫；有些点突变使地贫；有些点突变使链的生成部分链的生成部分受抑制，那么称为受抑制，那么称为地贫。地贫。 地中海贫血分型地中海贫血分型、重型又称、重型又称 Cooley Cooley 贫血。贫血。 患儿出生时无病症，至个月开场出现病症，呈慢性进展性贫血，面色

9、苍白，肝脾肿大，发育不患儿出生时无病症，至个月开场出现病症，呈慢性进展性贫血，面色苍白，肝脾肿大，发育不良，常有轻度黄疸，上述病症随年龄增长而日益明显。良，常有轻度黄疸，上述病症随年龄增长而日益明显。 由于骨髓代偿性增生导致骨骼变大，首先发生于掌骨，以后为长骨和肋骨，由于骨髓代偿性增生导致骨骼变大，首先发生于掌骨，以后为长骨和肋骨，1 1岁后颅骨改岁后颅骨改变明显，表现为头颅变大、额部隆起、颧高、鼻梁塌陷，两眼间隔变明显，表现为头颅变大、额部隆起、颧高、鼻梁塌陷，两眼间隔 增宽，形成海洋性贫血增宽，形成海洋性贫血的特殊面容。的特殊面容。 患儿常并发支气管炎或肺炎。患儿常并发支气管炎或肺炎。 当

10、并发有含铁血黄素沉着时，因过多的铁沉着于心肌和其它脏器如肝、胰腺、脑垂体等，而引起相应脏器当并发有含铁血黄素沉着时，因过多的铁沉着于心肌和其它脏器如肝、胰腺、脑垂体等，而引起相应脏器损害的表现，其中最严重的是心力衰竭，它是贫血和铁沉着造成心肌损害的结果，是导致患儿死亡的重要原损害的表现，其中最严重的是心力衰竭，它是贫血和铁沉着造成心肌损害的结果，是导致患儿死亡的重要原因之一。因之一。 本病如不治疗，多于本病如不治疗，多于5 5岁前死亡。岁前死亡。实实 验验 室室 检检 查查 血象呈小细胞低色素性贫血，网织红细胞正常或增高血象呈小细胞低色素性贫血，网织红细胞正常或增高 ； 骨髓象呈红细胞系统增生

11、明显活泼，以中、晚幼红细胞占多数；骨髓象呈红细胞系统增生明显活泼，以中、晚幼红细胞占多数； 红细胞浸透脆性明显减低；红细胞浸透脆性明显减低； HbF HbF含量明显增高，大多含量明显增高，大多 0.40 0.40，这是诊断重型，这是诊断重型地中海贫血的重要根据地中海贫血的重要根据 ； 颅骨线照片可见颅骨内外板变薄颅骨线照片可见颅骨内外板变薄 ，板障增宽，在骨皮质间出现垂直短发样骨刺。，板障增宽，在骨皮质间出现垂直短发样骨刺。、轻型、轻型患者无病症或或轻度贫血，脾不大或轻度肿大。患者无病症或或轻度贫血，脾不大或轻度肿大。病程经过良好，能存活至老年。病程经过良好，能存活至老年。本型多于重型患者家族

12、调查时被发现。本型多于重型患者家族调查时被发现。实验室检查实验室检查 成熟红细胞有轻度形态改变；成熟红细胞有轻度形态改变；红细胞浸透脆性正常或减低；红细胞浸透脆性正常或减低；血红蛋白电泳显示血红蛋白电泳显示HbA2HbA2含量增高，这是本型的特点；含量增高，这是本型的特点；HbFHbF含量正常。含量正常。、中间型、中间型多于幼童期出现病症，其临床表现介于轻型和重型之间，中度贫血，脾脏轻或中度肿大，黄疸可有可无，骨骼多于幼童期出现病症，其临床表现介于轻型和重型之间，中度贫血，脾脏轻或中度肿大，黄疸可有可无，骨骼改变较轻。改变较轻。实验室检查实验室检查 血象和骨髓象的改变如重型；血象和骨髓象的改变

13、如重型；红细胞浸透脆性减低；红细胞浸透脆性减低；HbF HbF 含量约为含量约为 0.40 0.400.800.80，HbA2HbA2含量正常或增高。含量正常或增高。地中海贫血地中海贫血地中海贫血地中海贫血地中海贫血地中海贫血 a珠蛋白生成障碍性贫血珠蛋白生成障碍性贫血 人类人类a 珠蛋白基因簇位于珠蛋白基因簇位于16 Pter -p13.3。 每条染色体各有每条染色体各有2个个a珠蛋基因，一对染色体共有珠蛋基因，一对染色体共有4个个a珠蛋白基因。珠蛋白基因。 大多数大多数a珠蛋白生成障碍性贫血是由于珠蛋白生成障碍性贫血是由于a珠蛋白基因的缺失所致，少数由基因点突变造成。珠蛋白基因的缺失所致，

14、少数由基因点突变造成。 假设仅是一条染色体上的一个假设仅是一条染色体上的一个a 基因缺失或缺陷，那么基因缺失或缺陷，那么链的合成部分受抑制，称为链的合成部分受抑制，称为a+地贫；地贫； 假设每一条染色体上的假设每一条染色体上的2个个a基因均缺失或缺陷，称为基因均缺失或缺陷，称为a0地贫。地贫。 、静止型、静止型患者无病症。患者无病症。红细胞形态正常，出生时脐带血中红细胞形态正常，出生时脐带血中Hb BartHb Bart含量含量0.010.010.020.02，但，但3 3个月后即消失。个月后即消失。 a a 地中海贫血分型地中海贫血分型、轻型、轻型 患者无病症。患者无病症。 实验室检查有如下

15、特点；实验室检查有如下特点； 红细胞形态有轻度改变如大小不等，异形等；红细胞形态有轻度改变如大小不等，异形等； 红细胞浸透脆性降低；红细胞浸透脆性降低； 变性珠蛋白小体阳性；变性珠蛋白小体阳性； HbA2 HbA2和和HbFHbF含量正常或稍低。含量正常或稍低。患儿脐血患儿脐血Hb BartsHb Barts含量含量0.0340.0340.1400.140，于生后个月时完全消失。，于生后个月时完全消失。、中间型、中间型 又称血红蛋白病。又称血红蛋白病。 患儿出生时无明显病症，婴儿期以后逐渐出现贫血，疲惫无力、肝脾肿大、轻度黄疸，年龄较大的患儿可患儿出生时无明显病症，婴儿期以后逐渐出现贫血，疲惫

16、无力、肝脾肿大、轻度黄疸，年龄较大的患儿可出现类似重型出现类似重型珠蛋白生成障碍性贫血的特殊面容。珠蛋白生成障碍性贫血的特殊面容。 合并呼吸道感染或服用氧化性药物等可诱发急性溶血而加重贫血，甚至发生溶血危象。合并呼吸道感染或服用氧化性药物等可诱发急性溶血而加重贫血，甚至发生溶血危象。、重型、重型 又称又称 Hb Bart Hb Barts s胎儿水肿综合征。胎儿水肿综合征。 胎儿常于胎儿常于30304040周时流产、死胎或娩出后半小时内死亡，胎儿呈重度贫血、黄疸、水肿周时流产、死胎或娩出后半小时内死亡，胎儿呈重度贫血、黄疸、水肿、肝脾肿大，胎盘宏大且质脆。、肝脾肿大，胎盘宏大且质脆。实实 验验

17、 室室 检检 查查v血象中成熟红细胞形态改变如重型血象中成熟红细胞形态改变如重型珠蛋白生成障碍性贫血，有核红细胞和网织红细胞明显增加。珠蛋白生成障碍性贫血，有核红细胞和网织红细胞明显增加。v血红蛋白中几乎全是血红蛋白中几乎全是Hb BartsHb Barts或同时有少量或同时有少量HBHHBH，无无HbAHbA、HbA2HbA2和和HbFHbF。二、珠蛋白生成障碍性贫血 常用的检验方法 血红蛋白电泳 抗碱血红蛋白检验 HbF酸洗脱法检验一血红蛋白电泳检测一血红蛋白电泳检测hemoglobin electrophoresishemoglobin electrophoresis 原理原理 目的是检

18、出和确认各种正常和异常的血红蛋白。目的是检出和确认各种正常和异常的血红蛋白。 根据不同的血红蛋白带有不同的电荷，等电点不同，在一定的根据不同的血红蛋白带有不同的电荷，等电点不同，在一定的pHpH缓冲液中，血红蛋白的等电缓冲液中，血红蛋白的等电点小于缓冲液的点小于缓冲液的pHpH时带负电荷，电泳时在电场中向阳极泳动，反之，时带负电荷，电泳时在电场中向阳极泳动，反之，HbHb带正电荷向阴极泳动带正电荷向阴极泳动。 在一定电压下，经过一定时间的电泳，不同的血红蛋白所带电荷不同，分子量不同，其泳动方向在一定电压下，经过一定时间的电泳，不同的血红蛋白所带电荷不同，分子量不同，其泳动方向和速度不同，可别离

19、出各自的区带，同时对电泳出的各区带进展比色或电泳扫描，可进展各种血红蛋和速度不同，可别离出各自的区带，同时对电泳出的各区带进展比色或电泳扫描，可进展各种血红蛋白的定量分析。白的定量分析。一般最常用的是醋酸纤维薄膜电泳。一般最常用的是醋酸纤维薄膜电泳。 参考值参考值 醋酸纤维薄膜电泳见书图醋酸纤维薄膜电泳见书图 有有4 4条区带：条区带： HbA95% HbA95%，HbF2% HbF10%v红细胞镰变试验阳性，红细胞浸透脆性明显下降红细胞镰变试验阳性，红细胞浸透脆性明显下降vHb电泳可见电泳可见HbS带位于带位于HbA和和 HbA2间，间， HbS占占80以上，以上，HbF增加增加215 ，H

20、bA2正常，正常， HbA缺乏。缺乏。血血 红红 蛋蛋 白白 E 病病vHbE是的是的链上第链上第26位谷氨酸被赖氨酸替代的异常血红蛋白。位谷氨酸被赖氨酸替代的异常血红蛋白。v多见于东南亚，及我国南方多见于东南亚，及我国南方v纯合子可有轻至中度溶贫，可见靶形红细胞，多成小细胞低色素贫血；纯合子可有轻至中度溶贫，可见靶形红细胞，多成小细胞低色素贫血；v杂合子无临床病症杂合子无临床病症v也可见与珠蛋白生成障碍性贫血的基因并存的双重杂合子，称为血红蛋白也可见与珠蛋白生成障碍性贫血的基因并存的双重杂合子，称为血红蛋白E-珠蛋白生成障碍性贫血。珠蛋白生成障碍性贫血。v出现临床及血液学改变出现临床及血液学

21、改变实实 验验 室室 检检 查查v1.血红蛋白下降，血红蛋白下降， 多成小细胞低色素轻度贫血。多成小细胞低色素轻度贫血。不稳定血红蛋白病不稳定血红蛋白病v由于由于或或珠蛋白链氨基酸组成改变，使血红蛋白分子构造不稳定而发生变性和沉淀，在红细胞内形成变性珠蛋白小体珠蛋白链氨基酸组成改变，使血红蛋白分子构造不稳定而发生变性和沉淀，在红细胞内形成变性珠蛋白小体(Heinz小体小体)引起的溶血性贫血。引起的溶血性贫血。v病史病史 v 1幼年发病，贫血轻重不一。幼年发病，贫血轻重不一。v 约约14患者无明显病症。患者无明显病症。 v 2药物药物(氧化剂氧化剂)史。史。 v 3溶血严重时可出现深色的尿。溶血严重时可出现深色的尿。 v体格检查体格检查 可有脾脏肿大。可有脾脏肿大。 实实 验验 室室 检检 查查v 1小细胞低色素性贫血，网织红细胞增多。小细胞低色素性贫血，网织红细胞增多。 2骨髓增生活泼、红系细胞增生为主。骨髓增生活泼、红系细胞增生为主。 3间接胆红素增高。间接胆红素增高。 4红细胞变性珠蛋白小体试验阳性。红细胞变性珠蛋白小体试验阳性。 5. 热不稳定热不稳定(变性变性)试验及异丙醇试