甾体激素类药物分析

1、沧州医学高等专科学校沧州医学高等专科学校药学系药学系吴爽吴爽甾体激素类药物分析基本母核基本母核环戊烷骈多氢菲环戊烷骈多氢菲甾体激素类药物分析23451016789121114131716151918ABCDC20C21依据总碳原子数、依据总碳原子数、A环及环及17位取代基的特点，将甾位取代基的特点，将甾体激素类药物分为：体激素类药物分为： 肾上腺皮质激素肾上腺皮质激素 雄性激素雄性激素 蛋白同化激素蛋白同化激素 性激素性激素 孕激素孕激素 雌激素雌激素各种甾体激素结构上的差异主要在于其取代基的各种甾体激素结构上的差异主要在于其取代基的种类种类、位置位置和和数目数目，双键双键的位置和数目的位置和

2、数目以及以及C C1010上上有无角甲基等。有无角甲基等。 甾体激素类药物分析一、肾上腺皮质激素类药物分析一、肾上腺皮质激素类药物分析 （1 1）具有）具有2121个碳原子个碳原子（2 2）A A环具有环具有4 4-3-3-酮基的酮基的，-不饱和羰基结构不饱和羰基结构（3 3）C C1717具有具有-醇酮基并多数有醇酮基并多数有-羟基羟基（4 4）C C1010、C C1313具有角甲基；具有角甲基；C C1111具有羟基或酮基具有羟基或酮基 环上双键的表示方法：环上双键的表示方法： 用用“ ”表示表示 ,双键的位置写在双键的位置写在 的右上的右上角。角。 双键位置双键位置454 14251,

3、4 565105 5(10) （一）性（一）性 质质1与强酸呈色与强酸呈色2酮基的呈色反应酮基的呈色反应：含有：含有C3和和C20位酮基的甾体激素，位酮基的甾体激素，能与羰基试剂肼发生呈色反应，产生有色物质腙。能与羰基试剂肼发生呈色反应，产生有色物质腙。 常用常用的试剂：的试剂：2,4二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼。肼。 3C17-醇酮基的反应醇酮基的反应 C17位上具有位上具有-醇酮基（醇酮基（-CO-CH2OH）的甾体激）的甾体激素，具还原性，可与多种氧化剂反应。素，具还原性，可与多种氧化剂反应。 （一）性（一）性 质质3 C17-醇酮基的反应醇酮基的反应 （1）与

4、四氮唑盐发生呈色）与四氮唑盐发生呈色反应，产物的颜色随所用试剂条件反应，产物的颜色随所用试剂条件不同而定，多为红色或蓝色。不同而定，多为红色或蓝色。 原理：醇羟基可以被氧化为醛、或醇酮基发生断裂。而氧化原理：醇羟基可以被氧化为醛、或醇酮基发生断裂。而氧化剂四氮唑盐被还原而显色。剂四氮唑盐被还原而显色。 （2）碱性酒石酸铜碱性酒石酸铜（菲林试液）（菲林试液）反应反应 ：Cu2O橙红色）橙红色） （3）与氨制硝酸银与氨制硝酸银（多伦试液）（多伦试液）反应反应 ：Ag（黑色）（黑色）4UV特性特性- 4-3-酮基为共轭体系酮基为共轭体系。（二）实例分析（二）实例分析醋酸地塞米松的质量分析醋酸地塞米松

5、的质量分析 【性状性状】熔点：熔点：223223233233，熔融同时分解；，熔融同时分解；比旋度：比旋度：+82+82+88+88；240nm240nm处吸收系数处吸收系数343343371371。 （二）实例分析（二）实例分析醋酸地塞米松的质量分析醋酸地塞米松的质量分析 解析：有机氟的呈色反应解析：有机氟的呈色反应 ：含氟的甾体含氟的甾体激素药物激素药物 氧瓶燃烧氧瓶燃烧茜素氟蓝茜素氟蓝显蓝紫色显蓝紫色F硝酸亚铈硝酸亚铈（二）实例分析（二）实例分析醋酸地塞米松醋酸地塞米松的质量分析的质量分析 【检查检查】1、有关物质：、有关物质：HPLC法法2、干燥失重、干燥失重3、硒：取本品、硒：取本品

6、0.1g，依法检查（附录，依法检查（附录 D，硒检查法）应符合，硒检查法）应符合规定（规定（0.005%）。）。解析：本品在生产过程中使用二氧化硒脱氢，硒对人体有害，解析：本品在生产过程中使用二氧化硒脱氢，硒对人体有害，需对其残留进行限量检查。需对其残留进行限量检查。醋酸地塞米松醋酸地塞米松氧瓶燃烧氧瓶燃烧Se6+盐酸羟胺盐酸羟胺Se4+pH2.02 2，3-二氨基二氨基萘试液萘试液 4，5-苯并苯硒二唑苯并苯硒二唑 环己烷环己烷 max378nm（二）实例分析（二）实例分析醋酸地塞米松醋酸地塞米松的质量分析的质量分析 【含量测定含量测定】1、HPLC法（外标法）法（外标法）原料原料2、UV法

7、法泼尼松龙片、氢化可的松片等泼尼松龙片、氢化可的松片等例如，泼尼松龙片含量测定方法：取本品例如，泼尼松龙片含量测定方法：取本品20片，精密称定，研细，片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于泼尼松龙精密称取适量（约相当于泼尼松龙20mg），置），置100ml量瓶中，量瓶中，加乙醇约加乙醇约75ml，振摇，振摇30分钟使溶解，用乙醇稀释至刻度，摇匀，分钟使溶解，用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液滤过，精密量取续滤液5ml，置另一，置另一100ml量瓶中，用乙醇稀释量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，照紫外至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法，在可见分光光度法，在243nm的波长处测的波长

8、处测定吸光度，按定吸光度，按C21H28O5的吸收系数（的吸收系数（E）为）为415计算，即得。计算，即得。贮液器贮液器输液泵输液泵梯度装置梯度装置进样装置进样装置分离柱分离柱控温装置控温装置检测器检测器（二）实例分析（二）实例分析醋酸地塞米松的质量分析醋酸地塞米松的质量分析 （四）含量测定（四）含量测定3、四氮唑比色法原理：、四氮唑比色法原理：4、异烟肼比色法原理：、异烟肼比色法原理：四氮唑盐四氮唑盐 OH-有 色 的 甲有 色 的 甲臢臢比色比色17-醇酮基（具还原醇酮基（具还原性）性）H+异烟肼异烟肼缩合缩合黄色异烟腙，比色黄色异烟腙，比色 酮基酮基二、雄性激素及蛋白同化激素二、雄性激素

9、及蛋白同化激素 （一）典型药物的结构、性质（一）典型药物的结构、性质二、雄性激素及蛋白同化激素二、雄性激素及蛋白同化激素 性性 质质1、与强酸呈色：与浓硫酸呈色。、与强酸呈色：与浓硫酸呈色。2、酮基的呈色反应：、酮基的呈色反应：3位羰基，与羰基试剂显位羰基，与羰基试剂显色。色。3、活泼次甲基反应：与亚硝基铁氰化钠、间、活泼次甲基反应：与亚硝基铁氰化钠、间二硝基苯、芳醛反应呈色。二硝基苯、芳醛反应呈色。4、UV特性：特性：4-3-酮结构酮结构二、雄性激素及蛋白同化激素二、雄性激素及蛋白同化激素 （二）实例分析（二）实例分析甲睾酮的质量分析甲睾酮的质量分析【性状性状】熔点：熔点：163167；比旋

10、度：；比旋度：+79+85【鉴别鉴别】二、雄性激素及蛋白同化激素二、雄性激素及蛋白同化激素 甲睾酮甲睾酮的质量分析的质量分析【检查检查】1、有关物质：、有关物质：HPLC法法P142：问题：问题杂质（单个杂质、总杂质）限量？杂质（单个杂质、总杂质）限量？2、干燥失重、干燥失重【含量测定含量测定】 HPLC法法-外标法外标法三、孕激素三、孕激素（一）结构与性质（一）结构与性质 三、孕激素三、孕激素性性 质质1、旋光性。、旋光性。2、酮基的呈色反应：、酮基的呈色反应：4-3-酮基、酮基、C20酮基，与羰基试剂显酮基，与羰基试剂显色。色。3、17位甲酮基的呈色反应位甲酮基的呈色反应黄体酮的专属鉴别黄

11、体酮的专属鉴别4、UV特性特性黄体酮的黄体酮的17位甲酮基位甲酮基亚硝基铁氰化钠亚硝基铁氰化钠蓝紫色蓝紫色（二）实例分析（二）实例分析黄体酮的质量分析黄体酮的质量分析 【性状性状】熔点：熔点：128131；比旋度：；比旋度：+186+198【鉴别鉴别】 三、孕激素三、孕激素 三、孕激素三、孕激素黄体酮的质量分析黄体酮的质量分析 【检查检查】 有关物质有关物质HPLC法法【含量测定含量测定】 HPLC法法外标法外标法 四、雌激素四、雌激素（一一）结构与性质结构与性质性性 质质1、旋光性。、旋光性。2、与强酸呈色、与强酸呈色3、酚羟基的反应：与重氮苯磺酸偶合生成红色偶氮化合物。、酚羟基的反应：与重

12、氮苯磺酸偶合生成红色偶氮化合物。4、乙炔基的反应：末端炔基与硝酸银反应生成白色乙炔银盐沉、乙炔基的反应：末端炔基与硝酸银反应生成白色乙炔银盐沉淀淀5、三硝基苯酚的显色反应：炔诺酮在碱性条件下与三硝基苯酚、三硝基苯酚的显色反应：炔诺酮在碱性条件下与三硝基苯酚生成红色化合物。生成红色化合物。6、UV特性：母核含有苯环特性：母核含有苯环 四、雌激素四、雌激素 四、雌激素四、雌激素（二）实例分析（二）实例分析雌二醇的质量分析雌二醇的质量分析 【性状性状】熔点：熔点：175180；比旋度：；比旋度：+76+83【鉴别鉴别】 四、四、 雌激素雌激素二、实例分析二、实例分析雌二醇的质量分析雌二醇的质量分析

13、【检查检查】 有关物质有关物质HPLC法法 水分：不得超过水分：不得超过3.5%。【含量测定含量测定】 HPLC法法外标法外标法甾体激素甾体激素碳原子碳原子数数A环环17位取代基位取代基肾上腺皮质肾上腺皮质激素激素21 4-3-酮酮 -醇酮基醇酮基雄性激素雄性激素19 4-3-酮酮 -OH -CH3孕激素孕激素21 4-3-酮酮甲酮基甲酮基雌激素雌激素18苯环苯环C3-酚酚OH -OH -CCH小结：甾体激素结构特征小结：甾体激素结构特征课后练习课后练习黄体酮的灵敏、专属的鉴别的鉴别为黄体酮的灵敏、专属的鉴别的鉴别为 甲酮基的呈色反应甲酮基的呈色反应 B B有机氟的呈色反应有机氟的呈色反应 C CC17-C17-醇酮基的还原性醇酮基的还原性 D D酮基的呈色反应酮基的呈色反应2 2中国药典（中国药典（20102010年版）收载的甾体激素类原料药物大多采用年版）收载的甾体激素类原料药物大多采用的鉴别方法为的鉴别方法为 HPLC BHPLC BTLC CTLC CIR DIR DUVUV3 3取某一甾体约取某一甾体约2mg2mg，置洁净的试管中，加乙醇，置洁净的试管中，加乙醇2ml2ml，加氨