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文档简介

1、饲料中酵母的微生物学检验www.饲料检测网.中国www. 饲料检测网.cn1 范围本方法规定了微生物饲料中酿酒酵母和产朊假丝酵母的检测方法及鉴定程序。本方法适用于微生物饲料中酿酒酵母和产朊假丝酵母的检测。2 设备和材料2.1恒温培养箱：23。2.2冰箱：04。2.3吸管：容量为1、10、25 mL。2.4三角瓶：容量为500 mL。2.5平皿：直径为9 cm。2.6试管：18×180 mm。2.7显微镜。2.8高压灭菌锅。2.9烘箱。3 培养基和试剂3.1 麦芽粉的制法取新鲜大麦（或小麦）若干，去杂，用水洗净，浸渍612 h，使其发芽，但芽不能过长。然后将发芽之麦粒晒干或烘干，磨成粉

2、末即得麦芽粉。3.2 麦芽汁的制法称取一定量的干麦芽粉，加适当体积的水，在5865下糖化34 h，每隔一定时间用碘液测定蓝色反应，如显蓝色，说明还没糖化彻底，直到加碘液无蓝色反应为止。使得到的麦芽汁糖度为12（勃力克氏）。煮沸后用纱布过滤。3.3 麦芽汁培养基 成分120Be麦芽汁 1000mL 葡萄糖 20g 琼脂20g 青霉素：5万单位3.3.2 制法将上述成分（青霉素除外）溶解至水中，调节pH值至6.87.2，121灭菌25min。冷至4550时，加入青霉素，混匀后倒平板。4 酵母菌数的测定4.1 检验程序如下：试料作成几个适当倍数的稀释液选择23个适当稀释度，各以1 mL之量加入灭菌平

3、皿内每皿内加入适量麦芽汁培养基72 h28菌落计数报告4.2 操作步骤4.2.1 以无菌操作将经过充分摇匀的试料25 mL（或25 g）放入含有225 mL无菌盐水的灭菌三角瓶内作成1:10的均匀稀释液。4.2.2 用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1 mL，沿管壁徐徐注入含有9 mL无菌水的试管内（注意吸管尖端不要触及管内稀释液）。4.2.3 另取1 mL灭菌吸管，按上述操作顺序，作10倍递增稀释液，如此每递增一次，即换用1支1 mL灭菌吸管。如此反复进行系列稀释，直至所需浓度。4.2.4取适宜稀释度的溶液滴加至灭菌平皿上，每个稀释度二个平皿。 取100mL液化的麦芽汁培养基（加温至4550

4、）。每个培养皿中倾注1012 mL，先向一个方向摇动，然后再向另一个方向摇动，使之充分混合均匀。注意避免培养基溅至平皿外或盖子内侧。静置，待固化。翻转培养皿28培养72 h。计数对有效平皿进行菌落计数（取菌落30300的平板）。鉴定必要时要进行鉴定。酵母菌的生物学特性：啤酒酵母菌在麦芽汁琼脂培养基培养，菌落形态与细菌相似，但比细菌大而厚，不透明，表面光滑，湿润粘稠，呈乳白色，形成假菌丝。菌体为单细胞，形状有圆形、椭圆形等，大小不一，2.210.5×3.5-21 m。产朊假丝酵母的生物学特性：个体形态：细胞卵圆形到长形，3.08.0×4.011.5m，成假丝状排列。群体形态：在

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