HPLC法测定抗菌消炎片中黄芩苷的含量

1、HPLC法测定抗菌消炎片中黄芩苷的含量                        【摘要】  目的 建立HPLC法测定抗菌消炎片中黄芩苷的含量。方法 用Diamonsil C18 （4.6mm×200mm，5m）色谱柱，流动相：甲醇-水-磷酸溶液（47：53：0.2），流速：1.0ml/min，检测波长：280nm。结果 黄芩苷在0.

2、0280.448g范围内与峰面积线性关系好，=0.99994，平均回收率为99.4%，RSD为0.9%。结论 本法测定简便，结果准确，重现性和分离度好，可用于抗菌消炎片的质量控制。 【关键词】  HPLC;黄芩苷;抗菌消炎片;含量测定    抗菌消炎片为卫生部药品标准中药成方制剂第七册收载的品种1，由金银花、百部、黄芩等七味中药组成，具有清热、泻火、解毒的功能。用于风热感冒，咽喉肿痛，实火牙痛。标准中没有定性分析及含量测定方法，不能有效地控制药品质量。方中黄芩清热燥湿，泻火解毒，止血2,其有效成分为黄芩苷。我们试用HPLC法测定抗菌消炎片中的黄芩苷含量，

3、取得满意的效果。现报告如下。    1  仪器与试药    Shimadzu LC-20A Liquid Chromatograph, Shimadzu SIL-20A Auto Sampler, Shimadzu SPD-M20A Diode Array Detector, Shimadzu CTO-10AS VP Column OvenLC Solution 色谱工作站。水为I级纯化水，甲醇为色谱纯，其他为分析纯。抗菌消炎片购自山东中圣药业股份有限公司（批号：060201 M平=0.2847g，批号：060602 M平=

4、0.3018g，批号：051102 M平=0.2836g）。2  试验方法与结果    2.1  色谱条件  色谱柱：Diamonsil C18 柱（4.6mm×200mm，5m），柱温：30，流动相：甲醇-水-磷酸溶液（47：53：0.2），流速：1.0ml/min，检测波长：280nm。    2.2   溶液的制备    2.2.1  对照品溶液的制备  精密称取黄芩苷对照品14.42mg，加70%乙醇使溶解并稀释至25

5、.00ml，即得（C=0.5768mg/ml）。    2.2.2  供试品溶液的制备  精密称定相当于1片的重量，置 100ml量瓶中，加70%乙醇约80ml，超声处理30min，放冷，加70%乙醇稀释至刻度，滤过,即得。    2.2.3  阴性对照溶液的制备  取缺黄芩的处方，按样品溶液制备方法制备阴性对照溶液。    2.3  系统适用性试验  分别取对照品溶液、样品溶液、阴性对照溶液进样5l，色谱图见图1。黄芩苷峰保留时间为17.517

6、min，阴性对照色谱图在黄芩苷峰位置无干扰峰，与其他组分分离完全，分离度为6.3。理论板数以黄芩苷峰计算为4864。                                 2.4  线性关系考察  精密量取对照品溶液（C=0.5768mg/ml）0.5、1.0

7、、2.0、4.0、8.0ml，分别置50ml量瓶中，用70%乙醇稀释至刻度，各进样5l，以峰面积为纵坐标，以进样量为横坐标，进行线性回归，得方程：Y=1.71×103+1.78×107X，=0.99994，线性范围为0.0280.448g。    2.5  精密度试验  取同一对照品溶液（C=0.02307mg/ml）连续进样5次，每次5 l，峰面积积分值RSD=1.2%。    2.6  重复性试验  取同一批号（060201）样品5份，按供试品液制备方法制备，依法测定，结

8、果黄芩苷含量RSD=1.3%，表明本法重现性好。    2.7  稳定性试验  取同一样品溶液（060602）在0、3、6、12、24、48h分别进样5 l，依法测定，黄芩苷峰面积RSD=0.7%，表明样品溶液在48h内稳定。    2.8  加样回收试验  取已知含量的样品（060201），精密加入黄芩苷对照品液适量，按样品测定方法测定含量，计算回收率，结果见表1。    2.9  样品测定  取3批样品，按2.2.2项下方法制备样品溶液，依法

9、测定黄芩苷的含量，结果见表2。表1  回收率试验结果（略）表2  3批样品含量测定结果（略）    3  讨论    用HPLC法测定黄芩苷含量，文献中对黄芩苷的检测波长多在280nm3、276nm4、274nm2，本文对黄芩苷的紫外吸收光谱进行了扫描，结果显示黄芩苷在280nm处吸收峰灵敏度较高，色谱峰最为理想，故确定其最大吸收波长为280nm。【参考文献】  1 中华人民共和国卫生部药典委员会.卫生部药品标准中药成方制剂,第七册.北京：人民卫生出版社，1993，75.2 国家药典委员会.中国药典，一部.北京：化学工业出版社，2005，211；405-407.3 邓筱华，王建.HPLC