古钩藤醇提液镇痛抗炎药理作用的实验研究

1、古钩藤醇提液镇痛抗炎药理作用的实验研究作者：张兴燊，文丽艳，秦红玲，陈红岚，雷宗焕，李丽，周芳【摘要】 目的研究古钩藤醇提液的镇痛抗炎药理作用。方法采用小鼠热板法和扭体法镇痛实验，观察古钩藤醇提液的镇痛作用，观察小鼠腹腔毛细血管通透性和二甲苯至小鼠耳廓肿胀的影响，观察其抗炎作用。结果古钩藤醇提液具明显的镇痛作用，大剂量能降低毛细血管通透性，抑制由二甲苯所致的炎症反应，可减轻小鼠耳廓肿胀的作用。结论古钩藤醇提液有明显的镇痛和一定的抗炎作用。 【关键词】 古钩藤； 镇痛抗炎； 药理作用古钩藤又名海上霸王、白叶藤、牛角藤、大暗消等等, 为萝藦科植物古钩藤Cryptolepis buchananii

2、Roem. et Schult 的地上部分。多生于阳坡，攀援于其他树上，分布于广东、广西、云南、贵州等地，具有舒筋活络、消肿止痛、解毒等功效，用于腰痛、腹痛、跌打损伤、骨折、痈疮、癣等疾病1 。目前，镇痛抗炎作用的药物多为西药，且副作用多，而中草药古钩藤民间使用也有这方面的作用，是值得研究、开发的镇痛抗炎药。前期我们已经做过古钩藤根、茎水煎液大、小剂量组镇痛抗炎药理作用的研究，证明水煎液具备一定的镇痛抗炎作用，或有这种作用的趋势，其镇痛抗炎作用不稳定2。本科研小组现在对古钩藤醇提液镇痛抗炎作用进行实验研究, 旨在对其进一步开发和临床应用提供一定的理论依据。1 材料1.1 动物小鼠，雌雄兼用，体

3、质量(202)g，均由广西中医学院实验动物中心提供，动物证号1104，根据实验性质和性别分笼喂养，自由采食饮水。1.2 仪器台式离心机XZB-2B型自控温度热板仪，山东省医学院设备供应维修站制造，设备号为：3-109-1-7-6；722型光栅分光光度计，上海第三分析仪器厂，设备号为：3-109-4-4-93。1.3 药品与试剂干燥古钩藤全草，采自广西中医学院药用植物园；硫酸罗通定注射液，广东省博罗先锋药业集团有限公司生产，批号020902；醋酸地塞米松，天津药业集团新郑股份有限公司生产，批号070823；醋酸, 上海试一化学试剂有限公司。伊文思蓝, 上海化学试剂公司进口分装, 批号F-9800

4、。二甲苯,齐鲁石化公司研究院试剂公司；生理盐水, 济南永宁制药厂。1.4 制备古钩藤水煎剂古钩藤全草300 g，加8倍水浸泡1 h，煎煮40 min, 煎煮2次，合并药液过滤浓缩至200 ml(1.00 g/m l)，后再加同等剂量的浓度为95%的酒精放置24 h后醇提，按所需要的剂量配成溶液大剂量为30 g/kg，小剂量为15 g/kg，以备用。2 方法和结果2.1 小鼠热板法镇痛实验3取雌性小鼠，放入(550.5)热板测痛仪中，以舔后足作为疼痛反应指标，预测小鼠药前痛阈值。以痛阈值小于30 s视为合格小鼠，将痛阈值合格的40只小鼠随机分为4组，每组10只。分别是古钩藤大剂量组，剂量为30

5、g/kg；古钩藤小剂量组，剂量为15 g/kg；阳性对照药罗通定组，剂量30 mg/kg；生理盐水对照组，剂量为20 ml/kg。灌胃给药两次，时间间隔为4 h。末次给药后30，60，90，120 min分别测定痛阈值。在测定中，如60 s内无痛反应，应立即取出，并以60 s。各给药组与对照组比较，统计数据以s表示，统计方法用t检验法。结果见表1。表1 古钩藤醇提液对热板法致痛小鼠的镇痛作用（略）痛阈值提高百分率（%）=（药后痛阈值-药前痛阈值）/药前痛阈值100%。 表1结果表明，古钩藤醇提液大剂量组在药后60，90，120 min能明显提高小鼠痛阈值，而古钩藤醇提液小剂量组在药后30，60

6、，90，120 min也能明显提高小鼠痛阈值，从本实验结果中可以看出古钩藤醇提液有镇痛作用。1 2.2 小鼠扭体法镇痛实验3取体质量1822 g健康小鼠40只，雌雄各半，随机分为4组，分组及给药方法同“2.1”项。末次给药后30 min腹腔注射0. 6%冰醋酸0. 2 ml /只,同时用秒表计时，记录小鼠15 min内出现的扭体次数。各给药组与对照组比较，统计数据以 s表示，统计方法用t检验法。结果见表2。表2 古钩藤醇提液对冰醋酸致痛小鼠的镇痛作用（略） 药物镇痛百分率（%）= (对照组扭体次数- 给药组扭体次数) /对照组扭体次数100%。表2结果表明, 古钩藤醇提液大、小剂量组对冰醋酸致

7、痛小鼠能显著减少小鼠的扭体次数，具有明显的镇痛作用。但从各剂量组的镇痛百分率来看，镇痛百分率提高不明显。2.3 小鼠二甲苯耳肿胀实验3取体质量1822 g健康雄性小鼠48只，阳性对照组药物改地塞米松，剂量为4.5 mg/kg，其他分组与给药均同“2.1”项。第8天每只小鼠右耳廓前后均匀涂擦当日配制的二甲苯0. 1 ml/只，致炎15 min后将小鼠脱颈椎处死，剪下小鼠左右耳，用打孔器（直径6 mm）分别在左、右耳同一部位打下等大的圆形耳片，分别在天平上称重后，耳肿胀度。各给药组与对照组比较，统计数据以s表示，统计方法用t检验法。 耳肿胀度= 右耳重量-左耳重量；肿胀抑制率（%）=（对照组肿胀度

8、-给药组肿胀度）/对照组肿胀度100%。 结果见表3。表3 古钩藤醇提液对小鼠耳廓肿胀的影响（略）表3结果表明, 古钩藤醇提液大剂量组能明显抑制由二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀，而小剂量组对此作用则无明显抑制作用。从抑制率看，大剂量组具有一定抑制耳廓肿胀的趋势，而古钩藤根小剂量组的抑制率为最差。2.4 对小鼠毛细血管通透性影响的实验3取体质量1822 g健康小鼠48只，雌雄各半，分组及给药方法同“2.3”项。第8天，每只小鼠尾静脉注射2.5%伊文思蓝0. 1 ml /10g(体重)，并同时腹腔注射0. 6%冰醋酸0. 2ml /只, 15 min后用6 ml生理盐水腹腔注射，轻柔小鼠腹部，然后断头处

9、死小鼠，剪开腹腔，用吸管吸取腹腔洗出液约56 ml，3 000 r /min离心5 min，取上清液3 ml在722分光光度计590 nm处测定吸收度(OD值) 。各给药组与对照组比较，统计数据以s表示，统计方法用t检验法。结果见表4。表4 古钩藤醇提液对小鼠毛细血管通透性的影响（略）表4结果表明，古钩藤醇提液大剂量组能降低小鼠毛细血管通透性，减少腹腔液体的渗出，具有明显的抗炎作用。而古钩藤小剂量组效果不明显。3 讨论 上述实验结果显示，古钩藤醇提液大、小剂量组都具有一定的镇痛作用，并从中也看到其镇痛作用较好；而抗炎作用只在大剂量组存在，小剂量组抗炎作用不明显，但至少可以看出古钩藤醇提液或有这种作用的趋势，这点以后再做进一步的深入研究，其镇痛和抗炎作用机制有待进一步研究，以后在研究中应该对其进行药物提纯再做研究。 古钩藤是瑶族人民民间长期使用的药材, 有舒筋活络、消肿止痛等功效，主要用于腰腿痛、风湿痛、痛经、软组织扭伤等, 疗效显著，本实验结果与民间临床使用基本一致。本实验为古钩藤的进一步开发及临床应用提供了一定的理论