粉葛根腐病菌的生物学特性及防治研究

1、粉葛根腐病菌的生物学特性及防治研究林兰稳1，李兆雄2，何熊威21. 广东省生态环境与土壤研究所，广东 广州 510650；2. 广东省鹤山市科技局，广东 鹤山 529700摘要：粉葛根腐病是粉葛生产上新发现的一种毁灭性土传病害。作者对病原作了人工分离和接菌试验，观测了温度、pH对病原菌菌丝体生长的影响；对防治药剂进行了筛选和试验，探讨了该病的有效防治药物及对策。关键词：粉葛根腐病；生物学特性；防治药物；防治对策中图分类号： 文献标识码：A 文章编号：1672-2175（2004）03-0382-03粉葛根腐病是鹤山及高明粉葛生产上普遍发生的一种土传病害。该病主要危害粉葛块根及茎蔓基部，苗期及结

2、薯期均可染病。苗期染病，在吸收根的尖端或中部表皮出现水渍状褐色病斑，严重者根系褐腐坏死，致地上部植株矮小，生长缓慢，基部叶片过早变黄脱落。结薯期染病，初期在块根表皮形成红褐色近圆形至不规则形稍凹陷的斑点，后期病斑密集，互相融合，形成大片暗褐色斑块，表面具龟裂纹，皮下组织变褐色干腐；横切块根可见维管束变红褐色，块根后期呈糠心型黑褐色干腐。据田间调查，粉葛根腐病每年4月份开始零星发生，到翌年1月收获期内都有发生，但以58月发病最多。轻病田发病率在20%30%，重病田病株率达50%80%。国内尚无该病为害粉葛的记录。作者对其病原物进行了鉴定,确认粉葛根腐病为短体线虫（Pratylenchus sp.

3、）及腐皮镰刀菌（Fusarium solani，属半知菌亚门真菌）复合感染引起1。为防治该病，作者对腐皮镰刀菌的生物学特性、防治药剂的室内毒力测定筛选及该病的田间小区防治进行了初步研究，现将结果报道如下。1 材料与方法1.1 供试菌源从鹤山合成镇粉葛田采集新鲜粉葛病株组织进行病原菌分离，接种于马铃薯蔗糖琼脂培养基（PDA）上培养，经显微镜鉴定稀释纯化，供试验使用。1.2 病原菌生长与温度的关系将病原菌接种于PDA培养基上，分别置于5、10、15、20、25、28、30、35、40 恒温培养箱中培养5 d后，测量菌落直径。每处理设3个重复，取平均值。以下与此相同2。 pH对病原菌菌丝生长的影响将

4、病原菌分别接种于PH值为4.0、5.0、6.0、7.0、8.0的PDA培养基上，在28 恒温培养箱中培养6 d，然后观察测量菌落生长直径。 室内防治药剂筛选1.4.1 供试药剂（1）30%（质量分数）枯萎灵WP（深圳市瑞德丰农药有限公司）；（2）40%（质量分数）根腐灵WP（深圳市瑞德丰农药有限公司）；（3）50%（质量分数）复方多菌灵WP（深圳市大荣生物农化有限公司）；（4）50%（质量分数）根病灵WP（南通市叶宝化工有限公司）。1.4.2 试验方法 用上述供试药剂配成一定质量浓度的母液（ mg/ml mg/ml mg/ml mg/ml）， cm），然后置于28 的恒温培养箱中培养6 d后，

5、测量菌落生长直径，算出抑制率，每个处理设3次重复，以无菌水作为对照。 粉葛根腐病田间小区防治试验1.5.1 试验时间地点 试验于2003年210月进行，地点设在鹤山市合成镇棠密村粉葛田，面积0.1 hm2。1.5.2 试验方法（1）试验地粉葛收获后，清除粉葛病残体集中烧毁，每公顷撒施生石灰7501125 kg翻土进行土壤消毒，然后灌水浸田2030 d后排水沥干，起高畦种植。 （2）秧苗选取无病健壮葛藤或种薯作为种苗繁殖使用，育苗前用5055 热水浸泡1520 min进行消毒处理，育苗地选取前作未种过粉葛的田地，淋施20%甲基异柳磷乳油8001000倍液杀灭地下害虫。（3）试验设30%（质量分数

6、）枯萎灵800倍液、40%（质量分数）根腐灵600倍液、50%（质量分数）复方多菌灵800倍液各分别与3%（质量分数）米乐尔可湿性粉剂（每公顷用量22.5 kg、配制成毒土穴施）、20%（质量分数）甲基异柳磷乳油（800倍液）组合一次，加对照共9个处理，每处理设3次重复，随机区组排列。葛苗移植大田后，于2月25日第1次施药，每株淋施药液500 ml；3月26日进行第2次；施药后于8月1日调查粉葛根腐病田间发病株数，计算发病率和统计防治效果。 （4）粉葛苗期喷施34次农一清（中外合资陕西农一清高效液肥有限公司）200倍液，补充微量元素。2 结果与分析 病原菌生长与温度的关系表1 腐皮镰刀菌在不同

7、温度条件下的生长情况平均温度/51015202528303540菌落平均直径/cm1)001) 扣除了菌饼直径 表1和图1表明，病原菌的生长随着温度的调高明显加快，但当温度超过30 时，生长速度减慢。病菌生长适温为1035 ，最适温度为2530 ；当温度低于10 或温度高于35 时，病原菌的生长趋于停止。该结果与粉葛根腐病的田间发病规律基本相符，田间发病始于3月底4月初，此时气温开始逐渐升高，降雨增多，粉葛根腐病开始发生；58月发病达到发病高峰；9月份后由于降水减少，发病减少，仅有零星发病。 pH对病原菌菌丝体生长的影响表2 腐皮镰刀菌在不同pH值条件下的生长情况平均pH值菌落平均直径/cm1

8、)1) 扣除了菌饼直径 表2和图2表明，病原菌在pH值较高的培养基中生长受到抑制，且随着pH值的降低，繁殖生长速度有加快的趋势。在田间条件下，重病田一般发生于土壤酸性大，低洼排水不良，且土质偏沙的葛田，这与病菌在酸性土壤中繁殖快，病菌随着水流的传播有关。因此，在粉葛栽培前增施石灰、腐熟有机肥，调节土壤酸碱度和改良土壤，实行高畦种植，加强雨天排水，对于预防和减少粉葛根腐病的发生有明显的作用。2.3 室内药剂筛选表3 不同农药试剂对腐皮镰刀菌的抑制作用试验药剂有效质量浓度/(mg·ml-1)培养6 d菌落平均直径/cm抑菌效果/%w(枯萎灵WP) 30%100w(根腐灵WP) 40%w(

9、复方多菌灵WP) 50%w(根病灵WP) 50%对照(无菌水)0 参试农药选用针对土传病害具有较好防效的常用商品复配农药。室内农药毒力筛选测试结果（表3和图3）说明，使用药剂在一定的浓度条件下，参试农药中以30%（质量分数）枯萎灵的抑菌效果最好，抑菌率达到100%；其次为40%（质量分数）根腐灵和50%（质量分数）多菌灵，抑菌率均在96%以上；50%（质量分数）根病灵的抑菌效果最差，抑菌率仅为70.4%。但是，田间施药受土壤多种环境复杂因子的影响，农药的防病效果与室内测试效果往往不一致，在室内条件下抑菌效果好的药剂，在田间条件下表现未必好。因此，粉葛根腐病防治药剂的筛选，必须走室内毒力测试与盆

10、栽或田间防治试验相结合的路线，才能取得理想的效果。2.4 田间小区防治效果 病原鉴定结果表明，粉葛根腐病的发生不但与腐皮镰刀菌有关，而且与植物病原线虫的存在有联系。椐刘维志等3报道，线虫的侵染可引起植物病害，在许多情况下，植物的病害不仅由一种病原物造成，往往涉及两种或多种病原物。因此，线虫的存在可能引发了腐皮镰刀菌的侵入，加重了发病；腐皮镰刀菌的侵染也可能影响线虫的发生，两者存在何种关系，目前正在做进一步研究当中。为了排除植物线虫为害的影响，评价农药对腐皮镰刀菌的防治效果，本试验采用防治植物线虫和腐皮镰刀菌相结合的综合防治措施。从试验结果（表4）可知，30%（质量分数）枯萎灵、40%（质量分数

11、）根腐灵和50%（质量分数）复方多菌灵与3%（质量分数）米乐尔及20%（质量分数）甲基异柳磷配合使用，皆可作为粉葛根腐病的防治用药；但以3%（质量分数）米乐尔+30%（质量分数）枯萎灵的处理效果最好，防治效果达到%；其次为3%（质量分数）米乐尔+50%（质量分数）多菌灵和20%（质量分数）甲基异柳磷+30%（质量分数）枯萎灵，防效都在80%以上。此外，单施3%（质量分数）米乐尔和20%（质量分数）甲基异柳磷防治病原线虫也能减轻发病，这说明了粉葛根腐病的发生不但与腐皮镰刀菌有关，而且与土壤中的病原线虫有关系，土壤中病原线虫的存在加重了粉葛根腐病的发生。3 讨论粉葛根腐病为土传病害，土壤消毒处理量

12、大，防治成本高；农药施入土壤中受土壤环境复杂因子影响，药效有时不稳定。粉葛产品作为一种具有很高药用价值的新兴绿色长寿保健食品，产品多数出口销往日本、欧美等国外市场，如长期使用化学农药进行防治，势必造成土壤中的农药残留累积，污染农田和粉葛产品，从而影响出口创汇。因此，粉葛根腐病的防治应遵循“预防为主，综合防治”的植保方针，采取以农业防治为基础，增强植株抗病性为重点，合理运用化学防治的综合对策。3.1 农业防治应紧密围绕粉葛栽培技术进行，防治工作贯穿于育苗、整地、施肥等整个生产过程。（1）轮作。实行粉葛与水稻轮作或与其它作物轮作，避免连作，这是土传病害防治的重要措施。轮作周期的长短也是影响防治效果

13、的因素之一，通常2年以上的长周期轮作对土传病害的控制效果要比12年的短周期轮作效果好得多。（2）清除葛株病残体。在粉葛收获后彻底清除植株病残体，能有效降低土壤中的病原菌和线虫数量，减少来年初侵染源，控制病害发生程度。（3）增施石灰，耕翻晒土。采收结束时在彻底清除病残体的基础上，粉葛移栽前及时耕翻晒土，每公顷撒施生石灰7501125 kg调节土壤酸碱性，可再次降低土壤中的病原菌数量。表4 田间小区综合防治效果统计处理稀释倍数平均发病率/%防治效果/%w(米乐尔)3% + w(枯萎灵)30%800w(米乐尔)3% + w(根腐灵)40% 600w(米乐尔)3% + w(复方多菌灵)50%800w(

14、米乐尔)3% (22.5 kg·hm-2)w(甲基异柳磷)20% + w(枯萎灵)30%800w(甲基异柳磷)20% + w(根腐灵)40%600w(甲基异柳磷)20% + w(复方多菌灵)50%800w(甲基异柳磷)20%800对照(不施药)34.60（4）培育无病壮苗。培育无病壮苗减少苗期感染在减轻大田期为害上意义重大。粉葛育苗时选取无病健壮葛藤或种薯作为种苗繁殖使用，育苗前用5055 热水浸泡1520 min进行消毒处理，育苗地选取前作未种过粉葛的田地，淋施20%（质量分数）甲基异柳磷乳油8001000倍液杀灭地下害虫，避免粉葛根腐病病原体带到大田继续危害。（5）合理施肥。增施

15、有机肥，氮磷钾肥合理配施，适量补充微肥，可促进粉葛植株生长健壮，增强抗病能力。施用腐熟有机肥，一方面可培肥土壤，改良土壤理化性质和促进土壤养分平衡供应，改善作物产品品质；另一方面有利于病原线虫天敌生物的繁殖，提高对线虫的控制作用，因为有机肥的降解产物会影响线虫的正常生长和活动。3.2 化学防治重病区可在农业防治的基础上实施化学防治。防治药剂可选用质量分数为30%的枯萎灵、40%的根腐灵和50%的复方多菌灵可湿性粉剂，与质量分数为3%的米乐尔颗粒剂及20%的甲基异柳磷乳油配合使用。施药方法多采用穴施，药剂加适量细土混合均匀施入种植穴内，要注意尽量避免药剂与粉葛根系接触，尤其是米乐尔，以免发生药害

16、。参考文献：1 林兰稳, 李兆雄, 何熊威, 等. 粉葛根腐病的病原鉴定J. 生态环境J. 2003, 12(4): 516-517.2 方中达. 植病研究方法M. 北京: 中国农业出版社, 1992.3 刘维志. 植物病原线虫学M. 北京: 中国农业出版社, 2000: 228.Biological characteristics and the control of pathogenic bacteriaof root rot disease of Pueraria thomsoniiLIN Lan-wen1, LI Zhao-xiong2, HE Xiong-wei21. Guangdo

17、ng Institute of Ecology, Environmental and Soil Sciences, Guangzhou 510650, China;2. Heshan Bureau of Science and Technology, Heshan, Guangdong 529700, ChinaAbstract: Root rot disease of Pueraria thomsonii is a newly discovered soil-borne disease that ruins the plant. The pathogens were isolated and a transplant test was conducted, and the effects of temperature and pH on the growth of pathogenic bacteria were observed. Moreover, the selection an