《清洁验证培训》

1、精选ppt清洁验证清洁验证编译自编译自AventisAventis培训资料及施雄杰培训资料培训资料及施雄杰培训资料扫地机 http:/ wenku1精选ppt内容n 简介简介n 范围范围n 验证过程概述验证过程概述n 监控物质监控物质n 取样方法取样方法n 可接受标准可接受标准n 分析方法学分析方法学 n 文件文件n 监控、变更和再验证监控、变更和再验证精选ppt简介 - 清洁验证目的n避免污染： Avoid contamination；n避免交叉污染： Avoid cross-contamination；n消除细菌污染： Eliminate bacteria contamination；精选

2、ppt简介 -清洁的定义n目测清洁目测清洁 设备表面无异物设备表面无异物 首要条件首要条件！n分析清洁分析清洁 分析数据支持设备是分析数据支持设备是清洁的清洁的n微生物清洁微生物清洁 微生物数据支持设备是微生物数据支持设备是清洁的清洁的精选ppt简介 清洁验证要素n指南：指南：ICH Q7ICH Q7nFDAFDA清洁验证检查指南清洁验证检查指南 1993 1993n批准批准/ /受控的清洗程序受控的清洗程序n验证方案验证方案n经过验证的化学经过验证的化学/ /微生物检测方法微生物检测方法n批准的验证报告批准的验证报告( (结论：清洁程序有效，达到可结论：清洁程序有效，达到可接受标准）接受标准

3、）n有效的培训有效的培训/ /变更控制变更控制精选ppt清洁验证范围n生产和包装原料药和制剂的相关区域和设备生产和包装原料药和制剂的相关区域和设备必须做清洁验证。必须做清洁验证。n对于生产临床试验批的多功能车间对于生产临床试验批的多功能车间 n不完全适用不完全适用n允许通过每次检验来确认设备清洁。允许通过每次检验来确认设备清洁。精选ppt清洁验证程序概述-1 n检查设备的确认状态检查设备的确认状态 （IQ/OQ/PQ)IQ/OQ/PQ)n列出该设备生产的全部产品清单（多功能）列出该设备生产的全部产品清单（多功能）n验证主计划验证主计划 - -明确需做清洁验证的产品或中间体明确需做清洁验证的产品

4、或中间体 - -矩阵法判断（多功能设备）矩阵法判断（多功能设备）n列出可能的清洁剂列出可能的清洁剂n选择清洁剂选择清洁剂n找出设备难清洗部位找出设备难清洗部位n设计和发展清洁方法设计和发展清洁方法精选ppt清洁验证程序概述-2n建立可接受标准，选取两种认可的方式之一：建立可接受标准，选取两种认可的方式之一：定量限度或定量限度或 目测清洁目测清洁- -分析清洁（分析清洁（VCAC)VCAC)n检测方法的建立和验证检测方法的建立和验证n撰写清洁验证方案撰写清洁验证方案n方案实施方案实施n撰写撰写/ /批准验证报告批准验证报告n确立清洗方法确立清洗方法n培训计划培训计划精选ppt清洁方法重要信息-1

5、n设备拆卸要求设备拆卸要求n所用清洁剂的浓度和体积；或者仅用热水所用清洁剂的浓度和体积；或者仅用热水n浸泡浸泡/ /搅拌时间搅拌时间n冲洗时间和体积冲洗时间和体积n清洗剂或者水与产品的兼容性清洗剂或者水与产品的兼容性精选ppt清洁方法重要信息-2n清洗剂清洗剂/ /水的温度或设备的清洗温度水的温度或设备的清洗温度 n是否加压或者使用机械手段是否加压或者使用机械手段n建立并控制时间节点：建立并控制时间节点：n 在设备使用后到开始清洗的时间间隔在设备使用后到开始清洗的时间间隔n 在各个清洗步骤之间的时间间隔在各个清洗步骤之间的时间间隔n设备干燥的方法设备干燥的方法n洗液处置洗液处置精选ppt监控物

6、质n3 3 个基本类型个基本类型: :n化学的化学的* *, , 微生物的微生物的* * 和和 颗粒物颗粒物(particulates)(particulates)化学的化学的 n对于制剂对于制剂: :活性物质活性物质* *, , 辅料辅料, , 清洁剂清洁剂* *n对于原料药对于原料药: :活性物质活性物质* *, , 原料原料, , 中间体中间体, ,副产物副产物和和清洁剂清洁剂* *. .* *为首要关注为首要关注精选pptn仅在目测清洁合格后才可进行取样仅在目测清洁合格后才可进行取样n直接取样直接取样 “首选的技术首选的技术”n擦拭取样擦拭取样n接触取样：为检测微生物负载（接触取样：为

7、检测微生物负载（Bioburden) Bioburden) 优选的方法优选的方法 n间接取样间接取样 终洗液取样终洗液取样 不易接触部位不易接触部位n拆卸易造成设备损坏的情况，拆卸易造成设备损坏的情况，常用于原料药常用于原料药n与与“脏锅脏锅”的类比的类比 清洗时效性清洗时效性n 终洗水的检测不能以常规的水的标准终洗水的检测不能以常规的水的标准 ( (如如USPUSP纯化水纯化水) )n 潜在误差潜在误差取样要点- 取样技术取样技术-1精选pptH终洗液（淋洗液）样品终洗液（淋洗液）样品 已知体积的溶剂淋洗一定已知体积的溶剂淋洗一定的区域，所得到的溶液用于进行分析的区域，所得到的溶液用于进行分

8、析H擦拭取样擦拭取样 用蘸了溶剂的介质擦拭一定的区域用蘸了溶剂的介质擦拭一定的区域, ,然后再将残余物质从介质中提取出来然后再将残余物质从介质中提取出来 n如可行，是如可行，是“首选的取样技术首选的取样技术” 取样要点- 取样技术取样技术-2精选pptn均一性均一性- -对验证计划成功很关键对验证计划成功很关键- -高效高效, , 可重现可重现, , 有文件记录有文件记录n定向擦拭法（定向擦拭法（SqueegeeSqueegee）与随机擦拭法）与随机擦拭法n明确的责任明确的责任- -擦拭人确认合格擦拭人确认合格-QA-QA部门部门擦拭技术擦拭技术精选ppt定向擦拭（Squeegee）技术或者或

9、者第一次第一次第二次第二次精选pptn仅对仅对清洁的清洁的并且并且干燥的干燥的设备取样设备取样n清洁后应及时进行取样清洁后应及时进行取样n清洁验证过程中应评估时间间隔效应清洁验证过程中应评估时间间隔效应n设备表面残留物经放置后可使清洁方设备表面残留物经放置后可使清洁方法有效性下降法有效性下降 “结块效应结块效应“ 取样时机取样时机精选pptn 取样记录内容取样记录内容J 取样时期和时间取样时期和时间J 取样人取样人J 取样方法号取样方法号J 取样点取样点 描述描述J 样品送到实验室样品送到实验室 签收签收/ /日期日期/ /时间时间J 特殊储存要求特殊储存要求J 备注备注 偏差偏差取样文件记录

10、精选pptH 设备制造商建议设备制造商建议/ /其他用户经验其他用户经验H 过去过去/ /现在的经验现在的经验H 图示和照片有效说明取样点选择图示和照片有效说明取样点选择 H GMP GMP 区域区域 潜在的污染机会减少潜在的污染机会减少取样点和环境精选pptn设备与产品接触部分设备与产品接触部分J 充分的代表性，以增强可信度充分的代表性，以增强可信度J 每个主要设备至少取每个主要设备至少取3 3点点( (最好最好5 5点点) )H额外考虑因素：额外考虑因素：J 难清洗部位难清洗部位J 设备材质设备材质J 接触表面的质地接触表面的质地 ( (光滑光滑/ /粗糙粗糙/ /等）等）J 资源限制资源

11、限制取样点数目精选pptn容器类型：保护样品的完整性容器类型：保护样品的完整性n容器的标识容器的标识J 方案编号方案编号J 设备编号设备编号J 产品名称产品名称J 批号批号J 样品编号样品编号J 取样点取样点 J 样品描述样品描述J 取样日期和时间取样日期和时间J 取样人签字取样人签字J 样品有效日期样品有效日期/ /时间时间样品的储存和标识精选pptH微生物检测取样结束，去除残余的取样琼脂微生物检测取样结束，去除残余的取样琼脂（agar)agar)H保证设备安全，并按照保证设备安全，并按照SOPSOP适当关闭好适当关闭好H设备待检设备待检J 保持对设备的保持对设备的”控制控制“J 若已清洗的

12、设备在使用前不经过检验，若已清洗的设备在使用前不经过检验，须进行风险分析。须进行风险分析。J 设备在使用前一定要保证进行了合适的清洗设备在使用前一定要保证进行了合适的清洗取样完成精选pptH培训及记录，对于微生物：包括消毒方法培训及记录，对于微生物：包括消毒方法 H成功应用擦拭法及微生物（如适用）接触法取样成功应用擦拭法及微生物（如适用）接触法取样的文件记录的文件记录n取样人和清洗人不应为同一人，避免利益冲突取样人和清洗人不应为同一人，避免利益冲突 取样人资格确认精选pptn微小偏差微小偏差n 样品洒掉但可以重新得到样品洒掉但可以重新得到n 报告中记录报告中记录 n重大偏差重大偏差n 用不合适

13、的清洁剂对已清洁表面取样用不合适的清洁剂对已清洁表面取样n 报告中记录或加附录报告中记录或加附录n取样失败取样失败n要求全面调查要求全面调查 可能直至或包括重新验证可能直至或包括重新验证n与相应的现场负责人讨论与相应的现场负责人讨论取样偏差与失败精选pptn H 目测清洁目测清洁H “分析分析”清洁清洁 两种认可的方式两种认可的方式 - - 可定量限度可定量限度 - - 目测清洁目测清洁 分析清洁分析清洁 (VCAC)(VCAC)清洁的可接受标准-1连续三次实施清洁方案均达到以上要求，方可认连续三次实施清洁方案均达到以上要求，方可认为清洁方法验证完成为清洁方法验证完成精选pptH 适用于所有已

14、清洁且干燥的设备适用于所有已清洁且干燥的设备H 设备表面需要尽可能程度地检查设备表面需要尽可能程度地检查, , 确认是清洁的确认是清洁的目测清洁精选pptn经典方式经典方式H 需要考虑需要考虑: :J 设备总表面积设备总表面积J 产品批次大小产品批次大小J 剂量：单一剂量剂量：单一剂量/ /日剂量日剂量J 安全因子安全因子 100-100,000100-100,000J 毒性考虑毒性考虑 - LDs- LDsJ 基质效应（基质效应（Matrix effectsMatrix effects） 最差情况最差情况分析清洁分析清洁- - 可定量限度方式可定量限度方式-1-1精选ppt可定量限度方式可定

15、量限度方式-2-2H 典型的可接受标准典型的可接受标准: :J 最小日剂量的最小日剂量的1/10001/1000J LD LD5050 基于毒性基于毒性J 最小治疗剂量的百分比最小治疗剂量的百分比n 对信息的保存和变更控制监控要求高对信息的保存和变更控制监控要求高精选pptH保证在下一个产品最大日剂量中含有的待检目标保证在下一个产品最大日剂量中含有的待检目标物质最高不超过其自身最小日剂量的物质最高不超过其自身最小日剂量的0.1%0.1%；H同时限定该目标物质在下一个产品中的最高含量同时限定该目标物质在下一个产品中的最高含量水平（比如水平（比如10ppm)10ppm)。可定量限度方式可定量限度方

16、式-3-3精选ppt可定量限度方式可定量限度方式-4-4n例如例如, A, A代表上一种产品，代表上一种产品， B B代表待生产的品种，代表待生产的品种， 限度限度L1 L1 计算方法计算方法: : (0.001) (0.001) (产品产品A A中活性物质最小日剂量中活性物质最小日剂量) ) ( (产品产品B B最大日剂量最大日剂量) )nL1L1可以设定为以上计算值或者人为指定的更小值可以设定为以上计算值或者人为指定的更小值L1 =精选ppt可定量限度方式可定量限度方式-5-5n一旦确定了一旦确定了L1,L1,可通过计算确定单位表面允许的目标物质残留限可通过计算确定单位表面允许的目标物质残

17、留限度度L2:L2:(L1) (L1) (下一种产品的最小批量下一种产品的最小批量) ) ( (设备接触表面积设备接触表面积) )nL2 L2 的单位是重量的单位是重量/ /表面积表面积. . 不能够直接进行分析测量不能够直接进行分析测量L2 =精选ppt可定量限度方式可定量限度方式-6-6n对于一定的设备表面区域进行擦拭取样，然后将目标对于一定的设备表面区域进行擦拭取样，然后将目标物质从擦拭签上解吸附到已知体积的溶剂中。对得到物质从擦拭签上解吸附到已知体积的溶剂中。对得到的溶液进行分析，限定目标物质残留限度的溶液进行分析，限定目标物质残留限度L3.L3. (L2)(L2)(擦拭的表面积擦拭的

18、表面积) ) ( (提取用溶剂体积提取用溶剂体积) )n分析方法测量的是分析方法测量的是L3L3L3 =精选pptH 潜在局限性潜在局限性J 同一场地，多重标准同一场地，多重标准J 不同的标准要求再验证，占用资源多不同的标准要求再验证，占用资源多J 变更控制变更控制 不同产品线不同产品线 - - 设备变化设备变化 表面积不同表面积不同J 允许用计算出的代表设备目测不清洁的沾染量作为判允许用计算出的代表设备目测不清洁的沾染量作为判定标准。定标准。可定量限度方式可定量限度方式-7-7精选ppt VCAC方式（目测清洁-分析清洁）H 分析清洁：分析清洁： 分为两个类别分为两个类别1 低治疗剂量药物活

19、性物（高活性）低治疗剂量药物活性物（高活性）: :4 大鼠口服大鼠口服 LD50 LD50 小于小于 100 mg/Kg 100 mg/Kg 以及以及 剂量小于剂量小于 1 mg1 mg2 标准治疗剂量药物活性物标准治疗剂量药物活性物: :4 在以上在以上1 1类以外的都算类以外的都算 分析清洁要求适用于任何已清洁、干燥设备的所有表面分析清洁要求适用于任何已清洁、干燥设备的所有表面 每个主要设备至少需要每个主要设备至少需要3 3个取样点个取样点 ( (储罐储罐, , 压片机压片机, , 制粒制粒机机, , 自清洁系统自清洁系统) )精选pptn H每个主要设备的活性药物残留所有检测结果的每个主

20、要设备的活性药物残留所有检测结果的平均值平均值必须达到以下标准：必须达到以下标准：H且且每一个每一个药物活性物质残留检测结果均不得超过以下药物活性物质残留检测结果均不得超过以下标准：标准：分析清洁标准4 标准治疗剂量药物活性物质不超过标准治疗剂量药物活性物质不超过100100微克微克/100cm/100cm2 24 低治疗剂量药物活性物质不超过低治疗剂量药物活性物质不超过1010微克微克/100cm/100cm2 24 标准治疗剂量药物活性物质不超过标准治疗剂量药物活性物质不超过200200微克微克/100cm/100cm2 24 低治疗剂量药物活性物质不超过低治疗剂量药物活性物质不超过202

21、0微克微克/100cm/100cm2 2精选pptn H 目测清洁目测清洁 ( (通常是最难达到的标准通常是最难达到的标准) )H 分析清洁分析清洁连续三次实施清洁方案均达到以上要求，方可认为清洁方连续三次实施清洁方案均达到以上要求，方可认为清洁方法验证完成法验证完成H如果清洁剂不留残余可以不要求分析检测如果清洁剂不留残余可以不要求分析检测 ( (例如水，异丙醇例如水，异丙醇) )( (限度限度/ /计算略计算略) )清洁的可接受标准-2精选ppt微生物可接受标准n微生物清洁微生物清洁H目测清洁、干燥目测清洁、干燥H根据历史数据建立警戒限和行动限根据历史数据建立警戒限和行动限H未建立专属未建立

22、专属(specific)(specific)的可接受标准的可接受标准精选ppt分析方法-1n清洁验证使用的分析方法是整个验证的关键因素清洁验证使用的分析方法是整个验证的关键因素! !n方法应对检测低含量足够灵敏方法应对检测低含量足够灵敏H 考虑稀释体积考虑稀释体积H 与可接受标准相关联与可接受标准相关联n技术上分为两类技术上分为两类: :H 专属性方法专属性方法H 非专属性方法非专属性方法精选ppt分析方法-2n专属性方法专属性方法 H HPLC ( HPLC (优选优选) )H TLC TLC F 非专属性方法非专属性方法 H UV/VIS UV/VIS H 电导率电导率 H GC GCH

23、专属离子电极专属离子电极 H pH pHH TOC TOC（总有机碳）（总有机碳）精选ppt分析方法-3非专属性方法非专属性方法 nUV UV 稀释样品使之与已验证的浓度范围一致；样品应稀释样品使之与已验证的浓度范围一致；样品应以空白签对照溶液读数！以空白签对照溶液读数！nTOC (Total Organic CarbonTOC (Total Organic Carbon，总有机碳，总有机碳) )n高活性物质与无活性物质没有区分高活性物质与无活性物质没有区分 须谨慎须谨慎n应小心选择擦拭法应小心选择擦拭法n作为常规监测作为常规监测精选ppt分析方法-4专属性方法专属性方法nHPLC:HPLC:

24、n首选方法首选方法n使用空白样品使用空白样品n没有重大的干扰没有重大的干扰精选pptn研究和产品接触的设备表面相同的表面类型研究和产品接触的设备表面相同的表面类型n金属表面金属表面n非金属表面非金属表面H 如有可能，设备最好如有可能，设备最好“专用专用”H 特氟龙垫片，丁腈橡胶隔膜特氟龙垫片，丁腈橡胶隔膜 - - 潜在可被提取物质潜在可被提取物质 分析方法验证-1精选pptn限度检查法：限度检查法：专属性专属性回收率回收率检测限（检测限（LODLOD）样品溶液的稳定性样品溶液的稳定性系统适应性系统适应性n定量检查法定量检查法专属性专属性精密度精密度线性线性/ /范围范围回收率回收率定量限（定量

25、限（LOQLOQ）样品溶液的稳定性样品溶液的稳定性系统适应性系统适应性分析方法验证-2方法必须经过验证方法必须经过验证通常需要验证的参数：通常需要验证的参数：精选pptH 清洗溶剂的选择清洗溶剂的选择J 润湿擦拭物润湿擦拭物J 溶解目标化合物溶解目标化合物H 擦拭物材质的选择擦拭物材质的选择 与溶剂兼容与溶剂兼容? ? H 萃取溶剂的选择萃取溶剂的选择J 体积很重要体积很重要 H 注意空白样的使用注意空白样的使用! ! 不能对待验物质产生干扰！不能对待验物质产生干扰！专属性精选pptn回收率回收率 = = 从已加样表面的回收率从已加样表面的回收率 + + 从擦拭签上的回收率从擦拭签上的回收率n

26、淋洗液取样回收率也作要求淋洗液取样回收率也作要求加样加样/ /回收率研究参考要求：回收率研究参考要求：J 加样范围加样范围: :平均限度的平均限度的50- 250% 50- 250% (VCAC(VCAC个例：个例：2 2倍平均值倍平均值) )J 每个加样水平至少做三块板每个加样水平至少做三块板J 不同天的检测回收率须可重现不同天的检测回收率须可重现 H 回收率回收率: : 加样板结果的中间值加样板结果的中间值 (75%). (75%). H 计算时必须考虑回收率！计算时必须考虑回收率！ 准确度精选pptH加样擦拭签的回收率加样擦拭签的回收率J 表明溶剂用于擦拭的有效性表明溶剂用于擦拭的有效性

27、H加样板的回收率加样板的回收率J 准确预测通常的回收率情况准确预测通常的回收率情况H 回收率矫正因子回收率矫正因子J 对低于对低于100%100%的回收率给予补偿的回收率给予补偿回收率精选pptH 表面延迟时间表面延迟时间 在设备清洁后到擦拭取样之间的时间段在设备清洁后到擦拭取样之间的时间段H 擦拭签延迟时间擦拭签延迟时间 在擦拭签取样后到溶剂提取前的时间段在擦拭签取样后到溶剂提取前的时间段H 溶液稳定性溶液稳定性 标准品稳定性和擦拭签提取溶液的稳定性标准品稳定性和擦拭签提取溶液的稳定性清洗检验方法的稳定性精选pptH 单位面积的残留量单位面积的残留量 H 允许对工艺流程中所有设备或某一指定的

28、设备做补偿允许对工艺流程中所有设备或某一指定的设备做补偿H Below LOQ Below LOQ 如果结果小于如果结果小于LOQ,LOQ,则结果表达为则结果表达为 “小于定小于定 量限（量限（LOQLOQ）” H 应尽量避免用应尽量避免用“未检出未检出”或或结果为结果为“0 0” 表达。表达。结果报告精选ppt微生物方法验证-1n方法的可接受标准方法的可接受标准: : H 定量定量 回收微生物计数回收微生物计数H 定性定性 回收微生物鉴别回收微生物鉴别n方法验证：回收率须符合加样浓度和回收方法的预期方法验证：回收率须符合加样浓度和回收方法的预期n考虑正常取样和接种的误差范围考虑正常取样和接种

29、的误差范围n建议加样范围：可回收菌落建议加样范围：可回收菌落10-100 CFU /10-100 CFU /取样区域取样区域n建议取样区域：建议取样区域：25 cm225 cm2n金属和非金属表面方法相同金属和非金属表面方法相同精选pptn稀释剂的选择稀释剂的选择 用于湿润擦拭签，以从待检测表面获取微生物用于湿润擦拭签，以从待检测表面获取微生物n方法选择方法选择 擦拭到标准培养皿擦拭到标准培养皿vs.vs.与琼脂接触培养皿直接接触与琼脂接触培养皿直接接触（RODAC=Replicate Organism Detection and CountingRODAC=Replicate Organis

30、m Detection and Counting）n培养基选择培养基选择J适合的专属培养基适合的专属培养基J可中和残余清洁剂和消毒剂的基质可中和残余清洁剂和消毒剂的基质J生长支持；消毒条件；储存条件和失效期生长支持；消毒条件；储存条件和失效期 微生物方法验证-2精选pptnH 培养条件培养条件J温度温度J时间时间 J氧气需求氧气需求 H 稳定性问题稳定性问题J基于清洁干燥的设备不支持微生物繁殖的基于清洁干燥的设备不支持微生物繁殖的前提，表面的前提，表面的取样延迟不是关键的问题取样延迟不是关键的问题J样品待检样品待检 - - 最好在取样两小时内检测最好在取样两小时内检测 微生物方法验证-3精选p

31、ptnn结果报告结果报告以单位面积以单位面积CFU (CFU (菌落数菌落数) ) 表示表示n建议限度建议限度产品接触的设备表面：产品接触的设备表面：5cfu/25cm25cfu/25cm2洁净室墙壁、天花板：洁净室墙壁、天花板： 10cfu/25cm210cfu/25cm2洁净室地面：洁净室地面：20cfu/25cm220cfu/25cm2 微生物方法验证-4精选pptn 基本要求基本要求 H 责任明确责任明确: : 负责人和部门负责人和部门H 验证方案验证方案: : 清洁之前起草和批准清洁之前起草和批准H 验证报告验证报告: : 对结论的支持对结论的支持文件精选ppt H产品信息产品信息H

32、方案目的方案目的H范围范围H职责分配职责分配H设备或系统描述设备或系统描述( (流程图流程图) )H取样取样 ( (和原理和原理) )H可接受标准可接受标准 原理原理H取样点取样点 原理原理方案内容精选pptn H 清洗方法清洗方法H 检测方法检测方法H 数据报告及评估数据报告及评估H 失败预案失败预案H 附件附件 图片图片/ /图谱图谱/SOP/SOP等等. .H 批准批准方案内容精选ppt其他文件n清洗方法清洗方法/ /程序程序n清洁剂的准备和储存清洁剂的准备和储存n擦拭物的准备，流程和储存擦拭物的准备，流程和储存n样品标签和容器的准备样品标签和容器的准备n清洗液取样清洗液取样n目测检测程序目测检测程序 清洗后清洗后n分析控制方