选修1专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离和计数(上课使用)

1、+选择培养基选择培养基（1 1）将土壤中的固氮菌分离出来）将土壤中的固氮菌分离出来（2 2）将土壤中自养微生物分离出来）将土壤中自养微生物分离出来举一反三（3 3）筛选出抗青霉素的微生物）筛选出抗青霉素的微生物（4 4）筛选出耐高浓度食盐的微生物）筛选出耐高浓度食盐的微生物不加氮源的无氮培养基不加氮源的无氮培养基不加含碳有机物的无碳培养基不加含碳有机物的无碳培养基加入青霉素的培养基加入青霉素的培养基加入高浓度食盐的培养基加入高浓度食盐的培养基 当样品的稀释度足够高时，培养基表面当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌

2、，通过统计平板上的菌落数，就能推测出活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。样品中大约含有多少活菌。计算公式：计算公式：每克样品中的菌株数每克样品中的菌株数 = =（C CV V）M M某同学在稀释倍数为某同学在稀释倍数为10106 6 的培养基中测得的培养基中测得平板上菌落数的平均数为平板上菌落数的平均数为234234，那么每克样，那么每克样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为的体积为0.1ml0.1ml） ( )( )A. 2.34A. 2.3410108 8 B. 2.34 B. 2.3410109 9C. 234 D.

3、 23.4 C. 234 D. 23.4 B设置对照的方法：设置对照的方法：空白对照：不给对照组任何处理因素。空白对照：不给对照组任何处理因素。条件对照：给对照组施以部分实验因素，但不是所条件对照：给对照组施以部分实验因素，但不是所要研究的处理因素。要研究的处理因素。自身对照：对照组和实验组都在同一研究对象上进行。自身对照：对照组和实验组都在同一研究对象上进行。相互对照：不单设对照组，而是几个实验组相互对照。相互对照：不单设对照组，而是几个实验组相互对照。判断培养基中是否有杂菌污染：判断培养基中是否有杂菌污染：将未接种的培养基同时进行培养。将未接种的培养基同时进行培养。判断选择培养基是否具有筛

4、选作用：判断选择培养基是否具有筛选作用：完全培养基（营养成分齐全）接种后培养完全培养基（营养成分齐全）接种后培养, 观察菌落数目观察菌落数目。 从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土土3cm3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。信封中。取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。前都要灭菌。制备以尿素为唯一氮源的选择培养基。制备以尿素为唯一氮源的选择培养基。为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？测定土壤中细菌的总量和测定土

5、壤中能分解尿素测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？实验时要对实验时要对培养皿作好标培养皿作好标记。注明培养记。注明培养基类型、培养基类型、培养时间、稀释度、时间、稀释度、培养物等。培养物等。三重复组三重复组求平均值使求平均值使结果更准确结果更准确最好增加空白对照：最好增加空白对照： 排除排除的干扰，证明的干扰，证明是由是由引起的。引起的。关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是鉴定细菌的重要手段。质地等等，都是鉴定细菌的重要手段。 关注菌落的形态、大小、边缘、突起

6、、颜色、关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是鉴定细菌的重要手段。质地等等，都是鉴定细菌的重要手段。 1 1、取土用的小铁铲的盛土样的信封在使用前都需要灭菌。、取土用的小铁铲的盛土样的信封在使用前都需要灭菌。2 2、应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥、应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞。形瓶中，塞好棉塞。3 3、在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁操作。、在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁操作。注明培养基种类、培养日期、平板培养样品注明培养基种类、培养日期、平板培养样品的稀释度等。的稀释度等。 三、操作提示三、操作提示1

7、.1.对细菌群体生长规律测定的正确的表述是：对细菌群体生长规律测定的正确的表述是： A.A.在液体培养基上进行在液体培养基上进行 B.B.至少接种一种细菌至少接种一种细菌 C.C.接种一个细菌接种一个细菌 D.D.及时补充消耗的营养物质及时补充消耗的营养物质 2.2.使用选择培养基的目的是：使用选择培养基的目的是： A.A.培养细菌培养细菌 B.B.培养真菌培养真菌 C.C.使需要的微生物大量繁殖使需要的微生物大量繁殖 D.D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别3.3.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是：能合成脲酶的微生物所需要的碳源和

8、氮源分别是： A.CO A.CO2 2和和N N2 2 B. B.葡萄糖和葡萄糖和NHNH3 3 C.COC.CO2 2和尿素和尿素 D.D.葡萄糖和尿素葡萄糖和尿素A AC CD D4.4.下列说法不正确的是：下列说法不正确的是： A.A.科学家从科学家从70708080度热泉中分离到耐高温的度热泉中分离到耐高温的TaqDNATaqDNA聚聚合酶合酶 B.B.统计某一稀释度的统计某一稀释度的5 5个平板的菌落数依次为个平板的菌落数依次为M1M1、M2M2、M3M3、M4M4、M5M5，以，以M3M3作为该样品菌落数的估计值作为该样品菌落数的估计值 C.C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中

9、非测试因设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度 D.D.同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多。种类最多。5.5.为培养和分离出酵母菌并淘汰杂菌，常在培养基中为培养和分离出酵母菌并淘汰杂菌，常在培养基中加入：加入： A.A.较多的氮源物质较多的氮源物质 B.B.较多的碳源物质较多的碳源物质 C.C.青霉素类药物青霉素类药物 D.D.高浓度食盐高浓度食盐B BC C 6 6、实验测定链霉素对、实验测定链霉素对3 3种细菌的抗生素效应，用种细菌的抗生素效应，用3 3种种细菌在事先准备好的琼脂块平板上画细菌在事先准备好的琼脂块平板上画3 3条等长的平行条等长的平行线（线（3 3条线均与下图中的链霉素带接触），将平板置条线均与下图中的链霉素带接触），将平板置于于3737条件下恒温培养条件下恒温培养3 3天，结果如图所示。从实验天，结果如图所示。从实验结果分析以下叙述，不正确的是结