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文档简介

1、实验五 细菌生理生化反响、 免疫标本的察看 微生物学与细胞生物学教研室 .实验目的 掌握细菌生理生化反响原理与方法熟习细菌的荚膜、芽孢、鞭毛等特殊构造了解淋巴细胞转化、E-玫瑰花环实验原理.实验原理 1.糖发酵实验不同微生物发酵单糖的才干各异，产生的分解产物也不同，可以作为细菌分类鉴定的手段。大肠埃希菌/产气肠杆菌葡萄糖CH3COCOOHHCOOH甲酸解氢酶H2+CO2伤寒沙门菌葡萄糖CH3COCOOHHCOOH指示剂：溴麝香草酚蓝pH6.3(黄)；6.3 pH7.2(蓝)pH6.3pH7.2.不同微生物所含酶系统不同，某些细菌含有色氨酸酶，可以分解培育基内蛋白胨中的色氨酸。大肠埃希菌色氨酸产

2、气肠杆菌色氨酸酶+H2OCH3COCOOH吲哚+检测：吲哚+对二甲基氨基苯甲醛玫瑰吲哚+H2O玫瑰红色吲哚实验阳性。实验原理 2. 吲哚实验I吲哚阴性。.检测不同细菌分解葡萄糖产酸的才干。大肠埃希菌葡萄糖产气肠杆菌指示剂：甲酸乙酸乳酸琥珀酸等分解甲酸、乙醇和乙酰甲基乙醇葡萄糖分解甲基红pH5.4(橘黄色)。实验原理 3.甲基红实验M pH4.5pH5.4.某些细菌在糖代谢过程中，经糖酵解途径产生丙酮酸。因不同细菌所含酶不同，进一步对丙酮酸的代谢也不同。大肠埃希菌产气肠杆菌2CH3COCOOHCH3COCHOHCH3+2CO2O2+ KOHCH3COCHOHCH3CH3COCOCH3CH3COC

3、OCH3+胍基红色化合物+ H2OVP实验阴性。实验原理 4.VP实验V.肠杆菌科各种细菌利用柠檬酸盐的才干不同，有的菌可利用柠檬酸钠作为碳源，有的那么不能。大肠埃希菌产气肠杆菌大肠埃希菌不能利用柠檬酸盐，故不能在以柠檬酸盐为独一碳源的培育基上生长。柠檬酸盐利用实验阴性。产气肠杆菌能在以柠檬酸盐为独一碳源的培育基上生长，并分解柠檬酸盐产生CO2，再生成碳酸盐，使培育基由中性变为碱性，培育基中的指示剂BTB由绿色变为蓝色。实验原理 5.枸橼酸盐利用实验C.实验资料 培育基：生化培育基菌种：大肠埃细菌、产气肠杆菌试剂：柯氏试剂、甲基红、40%KOH、 -6%萘酚. 单糖发酵实验 直接察看 吲哚实验 参与5滴柯氏试剂，振荡， 静置后察看 甲基红实验 参与5滴甲基红，振荡， 静置后察看 伏普实验 参与0.4mL 40%KOH, 开盖振荡，再参与-6%萘酚 柠檬酸盐利用实验 直接察看 1.细菌生理生化反响结果察看：实验步骤.2.细菌特殊构造察看：实验步骤 芽孢 破伤风梭菌.2.细菌特殊构造察看：实验步骤 荚膜 肺炎链球菌.2.细菌特殊构造察看：实验步骤 鞭毛 变形杆菌.3.免疫标本察看：实验步骤 淋巴细胞转化察看已转化.3.免疫标本察看：实验步骤 E-玫瑰花环.原始记录 列表描画细菌生理生化反响景象.实验结果1.细菌生理生化反响结果+IMVC大肠埃希菌产气肠杆菌+

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