乳酸脱氢酶以及其辅酶作用_第1页
乳酸脱氢酶以及其辅酶作用_第2页
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文档简介

1、关于乳酸脱氢酶及其辅酶的作用第一张，PPT共七页，创作于2022年6月乳酸脱氢酶由酶蛋白和辅酶I组成，两者单独存在时，无催化活性，必须共同存在组成全酶才起作用。乳酸脱氢酶在各种组织细胞广泛存在，它可逆地催化乳酸脱氢形成丙酮酸或丙酮酸接受氢生成乳酸。在代谢过程中，有重要意义，反应中由辅酶I（NAD）起传递氢作用。乳酸脱氢酶属于不需氧脱氢酶，不能直接将氢交给氧，反应中生成的还原型辅酶I，可与其它酶蛋白结合，将氢传给其它的递氢体，通过呼吸链被彻底氧化。 第二张，PPT共七页，创作于2022年6月试验原理： 本实验以乳酸为底物。用新鲜的动物肌肉的粗制提取液，分别制成酶蛋白部分（用白陶土吸附除去辅酶I）

2、和辅酶部分（加热破坏酶蛋白），观察两者单独作用及共同作用。实验中为了便于观察，用甲烯兰（即美兰）做为受氢体。已知甲烯兰能从还原型黄酶接受氢而由蓝色变成无色（甲烯白）。所以本实验中根据溶液兰色的消退判断乳酸脱氢反应的发生。第三张，PPT共七页，创作于2022年6月操作步骤：1、分别制备酶蛋白提取液及辅酸I提取液 （1）除去辅酶I的酶蛋白提取液：取新鲜动物肌肉组织3g，剪碎放研钵中加玻璃砂约 0.5g，白陶土 0.5g，加 PH7.4 0.1M磷酸缓冲液8ml，研细成粥状。移入离心管中，以2000rpm离心5分钟，倾于另一试管中备用。（2）辅酶I提取液：取蒸馏水10ml于中试管中，加热煮沸。取新鲜

3、的肌肉组织3g，剪碎，放入沸水中，继续煮沸10分钟，为防止水分过多蒸发可加盖。稍冷后倾入乳钵中研细，移入离心管中2500rpm离心5分钟，取上清液备用。 第四张，PPT共七页，创作于2022年6月2、取试管4只，标清管号，按下表加样：12345%乳酸钠提取液（ml）酶蛋白提取液（ml）辅酶提取液（ml）蒸馏水（ml）0.5%KCN液（滴）0.04%甲烯兰液（滴）0.5 0.5 /0.5 10100.5 /0.50.510100.50.50.5 /1010 / 0.50.50.51010第五张，PPT共七页，创作于2022年6月3、充分混匀，向各管徐徐加入液体石腊5滴（避免与空气接触），静置试管架上或放37C水浴1530，随时观察并记录各管退色情况，分析结果

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