产品基础知识课件

1、产品基础知识简介利德曼技术部第1页，共40页。摘 要 一、产品基础知识 二、产品种类及特点 三、常用专有名词第2页，共40页。一、产品基础知识1.生化诊断试剂盒的概念 生化诊断试剂盒为由一定的化学品或者酶类组成的多成分混合试剂（Reagent），最终以水溶液的方式，与待检测物发生一系列化学或者生化反应，通过生成物或反应物中某种物质的吸光度变化，测量待检测物中某种特定物质的含量。第3页，共40页。一、产品基础知识2.生化诊断试剂盒的组成 试剂盒一般由一种或两种试剂组成，由两种试剂组成的分别称为R1和R2，但每种试剂均含有多于一种的化学组分，而非简单的一种化学成分。部分试剂盒中包含有标准液（校准液

2、），用于建立标准曲线第4页，共40页。 产品组成试剂2R2试剂1R1校准液第5页，共40页。 一、产品基础知识 3. 产品的适用范围： 医院检验科生化室的各类全自动、半自动生化仪，分光光度计。适用于仪器自动以及手工操作。 第6页，共40页。 血清（主要）、血浆、尿液以及体液（脑脊液、胸腹水等）中的各种酶和代谢产物，用于协助临床医生诊断。4. 产品的检测对象：第7页，共40页。 血清：血浆除去纤维蛋白原后所余下的淡黄色透明液体叫血清，血清不会凝固。 血浆：血液中去除血细胞和血小板后余下部分就是血浆。它是一种半透明的淡黄色粘稠状液体，当血液流出血管时，其中纤维蛋白元即可变为纤维蛋白，并和血细胞凝固

3、成块，有止血作用。 加入抗凝剂(肝素、EDTA、草酸盐、柠檬酸盐)。第8页，共40页。二、产品种类1、按检测类别： 肝功类 血脂类 胰功类 肾功类 心肌酶类 免疫类 血糖类 离子类 血栓与凝血2、按外观： 液体试剂； 干粉、冻干试剂； 冻干血清（标准、质控）； 液体标准、质控品（如：免疫类多项标准、质控）第9页，共40页。液体试剂第10页，共40页。液体试剂单试剂TP、ALB等双试剂HDL、LDL等三试剂AMM第11页，共40页。 液体试剂特点试剂直接上机使用。 批内、批间差异小，稳定期可达18个月。2）多种通用仪器包装规格。 直接放入试剂仓中，使用方便。3）单试剂节省试剂位。 为自动生化仪扩

4、展实验项目提供充足空间。 如：TG,CHO,GLU,AMY,CA,MG,P4）种类齐全。 几乎涵盖生化检验的全部项目。 第12页，共40页。干粉、冻干试剂1) 冻干试剂大多需采用缓冲液溶解，干粉试剂采用蒸馏水或去离子水溶解后使用。冻干试剂：制备试剂的工序为冻干，试剂的外观为结晶状。干粉试剂：试剂的外观为粉末状 。2) 原包装试剂稳定周期长达30个月。3) 复溶后，各试剂稳定时间不同。超过稳定期后，试剂以失效处理。第13页，共40页。干粉试剂第14页，共40页。冻干试剂第15页，共40页。定值、质控血清第16页，共40页。 校准、质控血清介绍1) 校准血清（多项标准液）：含有常规检验的全部项目的

5、定值血清，用以建立标准曲线的校准物。通常由著名的临床化学实验室使用标准或参比试验方法确定。（ 罗氏称为C.F.A.S）2) 质控血清：日常用以监控测量的准确度和测量结果可信性的一个指标。提供常规检测项目靶值和一定范围（一般为2SD）数值的血清。用适当的标准品以参考方法定值，用于质量控制，不用于标准化。监测时最好用高低两个浓度的质控血清，一个浓度在正常范围内，另一个应在病理情况下可能出现的高浓度或低浓度。质控血清分为：第17页，共40页。定值、质控血清3) 采用人或动物血清为基质，符合IFCC质量标准。4) 项目齐全、数据准确。包含各种酶类项目的定值，避免各种输入K因数造成结果的偏差。5) 稳定

6、时间长。分装后，避免反复冻融，在-20度条件下，可保存2个月。第18页，共40页。三、常用专有名词准确度精密度（SD）及变异系数（CV）线性范围（linearity）灵敏度（sensitivity）特异性（specificity）稳定性相关系数和回归方程质控工作中涉及的概念及理解第19页，共40页。1、准确度临床准确性（ Clinical Accuracy）：衡量检验项目对于不同健康状况的区分能力。如：健康与疾病；良性与恶性疾病；对治疗的反应性与不反应性；预测疾病的好转与恶化狭义概念（ Accuracy）：与靶值符合程度20第20页，共40页。准确度与靶值相符程度 将试剂盒以配套标准液定标后检

7、测不同水平的质控各3次，计算3次均值，计算均值与靶值的偏差，判断其是否在可接受范围内。回收实验 在人血清样本中加入一定体积的标准溶液或纯品，每个浓度重复测定3次，按以下公式计算回收率。 注：标准溶液体积与血清体积比应不大于1：20，或加入体积比不会产生基质的变化，加入标准溶液后的样品总浓度必须在试剂盒的线性范围内。21第21页，共40页。回收率计算公式用真正测得的结果与其理论值比较计算它们的回收率。10010%22回收率是反应准确度关系的参数第22页，共40页。2、精密度在同一条件下,用同一方法对某一物理量测定多次时,所测得各数值间相互接近的程度,常以标准偏差（SD）、变异系数（CV）表示。S

8、D、CV越小说明精密度越高。精密度用以表示测量方法的重现性。用于评价试剂盒的重复性。23第23页，共40页。计算方法Mean（AVERAGE）（ 所有测值均值）SD（STDEV）（标准偏差）CV（变异系数）24第24页，共40页。准确度和精密度的关系第25页，共40页。3、线性范围线性（Linearity） -曲线接近直线程度的量试剂线性：检测有意义的上限 -它能判断测得的浓度或活性值与设定的浓度或活性值之间的比例关系的范围。 26第26页，共40页。4、灵敏度（sensitivity） 分析灵敏度（空白限）：来源于零的在统计学上有意义的最小检测浓度，即小于此浓度的可以认为是零。功能灵敏度：检

9、测系统或方法测值有意义的最低值，定量低限。一般分析灵敏度比功能灵敏度高10倍左右27第27页，共40页。5.特异性（specificity） 指在分析测定中只对某一成分起反应，其它物质对反应毫无影响或基本无影响。在临床中，标本中的溶血、胆红素、脂血或其它药物和食物成分时干扰测定的主要因素。部分影响可通过双波长，或改进检测方法来消除或降低。 第28页，共40页。抗干扰干扰是指在测定某分析物的浓度或活性时，受另一非分析物影响而导致测定结果增高(正干扰)或降低(负干扰)。内源性干扰-标本中存在的外源性干扰 -外界污染的29第29页，共40页。外源性干扰标本收集中的添加物如抗凝剂，防腐剂，稳定剂，容器

10、和塞子的污染等。试剂中的杂质和杂酶等。 30第30页，共40页。内源性干扰血清中固有的代谢产物，如肌酐酶法测定时血清中的肌酸等。病理情况下生成的：如胆红素，脂类，蛋白质，血红蛋白等。治疗药物，肠道营养、Vc等。31第31页，共40页。 6、相关系数和回归方程 用于评价两种方法结果是否具有可比性。通常用相关系数和回归方程来表示。X和Y在坐标系上形成一个点，通过两者之间形成的关系，分析两者的相关性。 r是样本的相关系数(0r1)，越接近一条直线说明两者的相关性越好。0.90r0.95表示两者形成一条平滑的直线。0.95r0.99表示一条良好的直线。 回归方程：表示两者之间的相互依存的数量关系。Y=

11、AX+B 。主要用于准确度的检测。 对于生化试剂遇到：各试剂或各种方法间相关的比较。第32页，共40页。第33页，共40页。7、质控工作中涉及的概念及理解 质控分为：室内质控室间质控 第34页，共40页。71 室内质控（IQC） 为监测和评价实验室的质量控制，提高常规工作中批间和日间标本监测的一致性。 选择稳定均一的血清作为质控血清。血清复溶后确保在测量期限内储存条件恒定。每天将质控血清随同病人标本同时测定。以均值X为靶线，XSD为警戒线，建立质控图。如果测量值在2SD以外则为失控。SD=CVX 100 （CV为给定值）。第35页，共40页。室内质控图第36页，共40页。72 室间质评（EQC

12、）由实验室以外的某个机构（通常为卫生部和各省、市或自治区的临床检验中心）对各实验室常规工作的质量进行检测和评定，以评价各室工作质量，用以校正和提高各室常规检测的准确度，建立起各实验室之间的可比性。每年定期由各地临检中心发放质控物，由各个实验室在规定的日期内检测，并在规定的日期内将结果报到临检中心，临检中心对数据进行统计，计算出各室间的偏差以及VIS 成绩回报给各实验室。室间质评需要有良好的室内质控的基础。偏差：值测量值与平均值之差。 （V）偏差（偏倚）%=（测量结果 靶值）100变异指数：VIVI = VIS =V/CCV CCV为选定的变异系数，为常数。不同的项目值不同。VIS80为优秀， 80VIS 150 为及格， 大于150为不及格。第37页，共40页。73 造成偏差的原因一、随机误差1校准物使用不当。 （包括：复溶是否准确，保存时间是否超过期限，方法选择是否与试剂盒推荐方法一致）2试剂保存不当，未按照试剂保存条件要求，引起试剂受污染或失效。导致反应不完全或者反应底物耗尽。3仪器使用不当。如：未能按期、按时作仪器的维护保养。出现仪器的滤光片、透光窗或比色杯受污染，或电源、光源不稳定，使测定的吸光度不稳定。4操作人员的偶然误差。第38页，共40页。73 造成偏差的原因二、系统误差1仪器系统误差。如：仪器加样方式，仪器提供反应物温度的精确度等。2方法学的缺陷。如副