阶段排查 回扣落实（十）

1、阶段排查回扣落实(十)一易错易混再巩固1.与基因工程有关的4个易错点(1)限制酶具有特异性，即一种限制酶只能识别特定的核甘酸序列，并在特定的 位点上进行切割；限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物DNA分子中不存 在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。(2)在获取目的基因和切割载体时通常用同一种限制酶，以获得相同的黏性末端。 但如果用两种不同限制酶切割后形成的黏性末端相同，在DNA连接酶的作用下 目的基因与载体也可以连接起来。(3)为了防止载体或目的基因的黏性末端自己连接即所谓“环化”，可用不同的 限制酶分别处理含目的基因的DNA和载体，使目的基因两侧及载体上各自具有 两个不同的黏性末端。(4

2、)启动子N起始密码子，终止子W终止密码子。启动子是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶识 别、结合的部位。终止子是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端，作 用是使转录过程停止。起始密码子和终止密码子位于mRNA上，分别控制翻译过程的启动和终止。2.与细胞工程有关的4个易错点(1)动物细胞培养中两次使用胰蛋白酶的作用不同：第一次：处理剪碎的组织，使其分散成单个细胞。第二次：使贴壁生长的细胞从瓶壁上脱落下来。传代细胞的特点传代培养到10代以内的细胞核型稳定，1050代时部分细胞核型发生变化，50 代以后遗传物质可能发生变化。原代培养与传代培养的区别：关键是是否分瓶培养

3、。贴壁生长到一定程度需 要用胰蛋白酶处理，然后再分瓶培养，原代培养结束，开始传代培养。(4)克隆动物是由重组的细胞培养而来的，该重组细胞的细胞质基因来源于受体 细胞，细胞核基因来源于提供细胞核的亲本，其遗传物质来自2个亲本。3.有关胚胎工程需要注意的6个常考点(1)精子获能是指精子获得受精“能力”，而不是获得能量；排卵是指卵子从卵 泡中排出，而不是卵泡从卵巢中排出。(2)区别2种标志受精标志：在卵细胞膜和透明带间隙中看到两个极体。受精完成的标志：雌、雄原核融合成合子。(3)早期胚胎培养液成分2 “盐”：无机盐和有机盐；2 “酸”：氨基酸和核甘酸；2 “素”：维生 素和激素；2 “液体”：水和血

4、清。(4)2种“冲卵”的不同胚胎移植：冲出的是早期胚胎。体外受精：冲出的是卵子。(5)2次使用的激素不同孕激素：对供、受体进行同期发情处理。促性腺激素：对供体进行超数排卵处理。(6)胚胎移植成功的关键供、受体同期发情处理。供体用促性腺激素做超数排卵处理。二、长句应答多强化1.教材黑体字实现基因工程的操作过程至少需要三种工具，即准确切割DNA的“手术 刀”限制性核酸内切酶、将DNA片段再连接起来的“缝合针”DNA连 接酶、将体外重组好的DNA导入受体细胞的“运输工具”运载体。(2)基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。(3)植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下，将离体的

5、植物器官、组织、细 胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、 丛芽，最终形成完整的植株。(4)植物体细胞杂交就是将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞, 并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母 细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。 2.教材结论性语句(1)基因工程操作的基本工具有限制性核酸内切酶、DNA连接酶和使目的基因进 入受体细胞的载体。(2)EcoDNA连接酶只能连接黏性末端，而T4DNA连接酶既能连接黏性末端也 能连接平末端。(3)质粒是基因工程常用

6、的载体，需具备的条件有：能在宿主细胞内稳定保存并 自我复制；具有一个或多个限制酶切割位点；具有标记基因。(4)基因工程的基本操作程序：目的基因的获取一基因表达载体的构建一将目的 基因导入受体细胞一目的基因的检测与鉴定。(5)基因表达载体的构建是基因工程的核心，基因表达载体的组成包括目的基因、 启动子、终止子和标记基因等。(6)植物体细胞杂交的理论基础是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，动物细 胞融合的理论基础是细胞膜的流动性和细胞增殖。植物体细胞杂交用到的酶是纤维素酶和果胶酶，动物细胞培养用到的酶是胰 蛋白酶或胶原蛋白酶。动物细胞培养时选用幼龄动物组织或胚胎进行细胞培养，因为幼龄动物组织 或胚胎的细胞分化程度低，增殖能力强，更易于培养。动物细胞培养需满足的条件有充足的营养、适宜的温度和pH、气体及无菌、 无毒的环境。(10)单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高，并可以大量制备的优点。(11)在单克隆抗体制备过程中，有两次筛选：第一次是筛选出杂交瘤细胞(用选择 培养基)；