饲料中常规成分的测定 操作要点

1、PAGE PAGE 33目 录第三章饲料中常规成分的测定2第一节饲料水分的测定方法（GB6435-86）.2第二节 饲料灰分测定方法.3第三节 饲料粗蛋白测定方法（GB 6432-94）.3第四节 饲料水溶性氯化物测定方法（GB6439-86）.6第五节 饲料中钙的测定方法（GB/T6436-2002）.10第六节 饲料中总磷的测定方法（GB/T6437-2002）.13第七节 枸溶磷含量的测定（HG2636-2000）13第八节 水溶性磷的测定（HG2861-1997）13酸价的测定（GB/T5530-1998）13第十节 粗纤维的测定（GB/T6434-1994）.13第十一节 粗脂肪的测

2、定（GB/T6433-1998）.13第十二节 容重的测定.14第十三节 砂分的测定.14第十四节 游离水分测定.14第十五节 纯（真）蛋白测定.14第十六节 蛋白溶解度.15第四章 饲料中有害、有毒物质的测定.15第一节 大豆饼（粕）生熟度的检测方法.15第二节、饲料中氟的测定方法（GB 13083-2002）19第三节、关于HG2636-2000磷酸二氢钙中氟的测定的几点说明.22第四节 铬的定性检测22第五节、关于GB13089-91饲料中铬的测定方法的几点说明23第六节、关于检验饲用油脂中掺有矿物油的方法.24第五章 低压锅炉水质简明检验方法251、总碱度的测定252、总硬度的测定25

3、3、溶解固形物的测定264、PH值得测定方法（电极法）.27第六章 感官检测29第七章 饲料显微镜检查（GB/T14698-2002）.291、 饲料显微镜检查基本方法.292、植物性饲料原料的显微镜检查302.1稻谷、稻壳粉、统糠、米糠、米糠粕302.2小麦、次粉、麸皮302.3大豆、豆粕312.4油菜籽、菜子粕312.5花生、花生粕322.6棉籽、棉粕322.7玉米、玉米皮、DDGS、玉米麸、玉米胚芽粕.32饲料中常规成分的测定第一节饲料水分的测定方法（GB6435-86）1、测定的意义：原料的水分指标是原料客商与用户结算资金的质量依据之一。如原料玉米要求水分在14%以下，超标按超出量的百

4、分比扣减吨位。产品的水分指标也很重要，尤其是在炎热的夏天，水分过高，易影发饲料霉变。所以水分的检测很有必要。成品水分的控制指标：猪料不大于12.5%；鸡料、鸭料、鹌鹑料、鱼料不大于13.0%。2、饲料水分的快速测定方法（四十五分钟）实用范围、原理、仪器设备，试样的选取和制备，测定结果的计算平均和GB6435-86一样，不同点在于温度控制，烘干时间不同。测定步骤具体如下：洁净称样皿在1352烘箱中烘烘1小时后取出，在干燥器中冷却30min，精确至0.0002g，再烘干30 min，冷却称重，至两次重量之差小于0.0005 g为恒重。用已经恒重的称样皿称取两份平行样 ，每份1-1.3g，准确至0.

5、0002g，不盖称样皿盖，在1352烘箱中烘15 min（以温度到达135开始计时），取出，盖好称样皿盖，在干燥器中冷却30 min，冷却称重。3、操作注意点3.1 控温要准。放样品后，待温度回升135才开始计时。不能提前也不能超时，否则快速法与国际测出结果相差大。3.2 当快速法与国际法测定数据误差大时，以国标法为准。3.3 粉碎制样时，应将筛网上的物料倒入盛样器中，以确保分析结果的准确性。称样前要拌合均匀，以确保平行样分析结果在国标允许的0.2%的范围内，若平行样的结果相差大于0.2%应当重做。每次实验完成后应马上将称样皿清洗干净。在135烘箱中烘1小时，放干燥器内保存，待用。当测定值与判

6、定值接近或不合格及其他异常与异议时应严格按国标法操作测定，以国标为准。4、测定水分时烘箱使用要点4.1 烘箱应洁净。打开鼓风，使温度均匀。定期校正。称量瓶口打开并放在接近水银温度计水银球下。烘箱内不能放大量有碍箱内空气流动的物品。可在称量瓶上方及下方放点滤纸，防止尘屑掉入，要有一定距离，不要有碍称量瓶内气流流动。5、快速水分测定仪测定玉米水分（用于小户玉米测定）5.1 原理：利用水分含量与电阻的相关性测出电阻，与标准水分的玉米比较，相关电信号经放大，转换成数字显示出来。5.2 操作要点：5.2.1 用感量不能大于1克的托盘天平称量。5.2.2 经常用经国标法测定水分的标准玉米校正，特别要注明校

7、正的室温。一般室温变化超过5应重新校正。5.2.3 样品温度与室温一致后才能测定。5.2.4 有争议的样品要用国标法测定。5.2.5 经常从所测定样品中抽取1至2个样品用国标法测定，监控测定结果。6.、分析天平使用注意事项6.1分析天平应定期检定。分析天平室应保持干燥、远离振动及腐蚀性气体源。分析天平室应置在垫橡胶减振垫的台上。使用前检查水平及其它相关情况。取放物品及砝码时应休止天平轻拿轻放，物品与砝码应置于秤盘中央。可能超过称量范围的物品必须用托盘天平粗称，严禁超量范围使用天平。腐蚀性的试剂及物品应放在称量皿等有盖器皿密封称量。天平箱内应放干燥剂保持干燥。过冷过热的物品不能立即称量，应待温度

8、与室温度相当时再称量。第二节 饲料灰分测定方法操作注意点：在电炉上小心炭化，在炭化的过程中，应将试料在较低温度状态加热至无烟，而后升温灼烘至样品无炭粒，再放入高温炉GB/T6438-92。此步防止溅出来。每次做完实验坩埚洗净后，先放入烘箱中将水分烘干，在放入500-600的马弗炉灼烧30分钟，放入干燥器内保存，以备待用。灼烧时间要准。干燥器内干燥剂要经常更换、烘干。长久未用或做重要、争议样品前应重新恒重。第三节 饲料粗蛋白测定方法（GB 6432-94）1、凯氏定氮法的原理1.1 消化：样品与硫酸一同加热消化，硫酸使有机物脱水，破坏有机物，有机物中的碳和氢氧化为二氧化碳和水逸出，而蛋白质分解成

9、氨，则与硫酸结合成硫酸铵留在酸性溶液中。其反应式如下：H2SO4SO2+H2O+O2CH3.CH.NH2.COOH+2O2CH3.CHOH-NH2+2CO22CH3.CHOH.NH2+10O4CO2+2NH3+4H2O2NH3+H2SO4(NH4)2SO4在消化过程中添加硫酸钾可以提高温度加快有机物分解，它与硫酸反应生成硫酸钾，可提高反应温度，一般纯硫酸反应生成硫酸氢钾，可提高反应温度，一般纯硫酸加热沸点330，而添加硫酸钾后，温度可达400，加速了整过反应的过程。此外，也可以加入硫酸钠、氯化钾等盐类来提高沸点。其理由随着消化过程硫酸的不断的分解，水分的逸出而是硫酸钾浓度增大，沸点增加。加速了

10、有机物的分解。其反应式如下：K2SO4+H2SO4=2KHSO42KHSO4=K2SO4+H2O+SO3但硫酸钾加入量不能太大，否则温度过高，生成硫酸铵也会分解，放出氨而造成损失。（NH4）2SO4NH3+NH4HSO42 NH4HSO42 NH3+2 SO4+2H2O为了加速反应过程，还加入硫酸铜，氨化汞或硒粉作为催化剂以及加入少量过氧化氢，次氯酸钾作为氧化剂，但为了防止污染通常使用硫酸铜，其反应式如下：2GuSO4Gu2SO4+ SO2+O25O2+2GuSO4GuSO4+ SO2+6O2GuSO4+H2SO42GuSO4+ SO2+H2O所以有机物全部消化后，出现硫酸铜的蓝绿色，它具体由

11、催化功能，还可以作为碱性反应指示剂。蒸馏：样液中的硫酸铵在碱性条件下释放出氨，在这一操作中，一是加入氢氧化钠溶液要过量；二是防止样液中氨气逸出，其反应如下：2（NH4）2SO4+2NaOHNH3+Na2SO4+H2O吸收与滴定：蒸馏过程中放出的氨可用一定量的标准硫酸或盐酸溶液进行吸收。然后再用标准氢氧化钠溶液反滴定过剩的硫酸或盐酸溶液，从而计算出总氨量。半微量或微量蒸馏定氮通常用硼酸溶液吸收后，再用标准盐酸溶液之间滴定，硼酸呈微弱的酸性，用酸滴定不影响指示剂变色反应，它有吸收氨的作用，其反应如下：2NH3+4H3BO3（NH4）2B4O7+5 H2O（NH4）2B4O7+2HCI+5 H2O2

12、NH4CL+4H3BO31.4 混合指示剂：标准盐酸溶液滴定吸收液中的氨的PH值突跃范围为6.3-4.3。采用甲基红-溴甲酚绿混合指示剂，终点颜色由绿色变为灰红色。PH5.1PH=5.1PH5.1溴甲酚绿黄色绿色蓝色甲基红红色橙色黄色甲基红+溴甲酚绿酒红色灰色蓝绿色2、定氮仪2.1 对半微量定氮仪的要求：必须是水蒸气蒸馏，蒸馏速度为10-20分钟内蒸出液量达70-100毫升，氨的回收率在97%以上，一起加碱空蒸时，蒸出液空白要低。2.2 操作定氮仪注意事项：2.2.1本仪器必须在无氮及氨化物污染的专用实验室内工作。2.2.2所有的蒸馏水均为无氨水。2.2.3蒸馏试样前必须清洗仪器，并对仪器进行

13、检漏。2.2.4新的蒸馏装置或久不使用的装置，冷凝管不要通冷凝水，先通水蒸气洗净。2.2.5在分析试样前，蒸馏50毫升水溶液检查空白，空白低时才能进行试样分析。3、饲料粗蛋白测定方法操作注意点3.1试样消煮，加催化剂GuSO4.5 H2O:Na2SO4(无水)=1:15(质量比)3.2克、加浓硫酸13毫升。3.2 消化时间视不同样品含脂肪、蛋白质而定，一般样液呈现蓝绿色后消化30分钟就可以（高蛋白及有争议的样品应按国标消化至样液出现蓝绿色后消化2小时。3.3 无损失的将消化液由凯氏烧瓶转入100ml容量瓶中，并用蒸馏水洗凯氏烧瓶2-3次，洗液一并倒入容量瓶中。3.4 配置的20g/l硼酸液不能

14、被酸污染，三角烧瓶应洗净，一旦显色不对，洗净后重新吸取硼酸液和指示剂。3.5 加蒸馏水空蒸，一要对定氮仪检漏；二要检蒸馏液的值不能太高，最好控制在值之间。3.6 要先塞好入口玻璃塞，再加碱液，小心提起玻塞使之流入反应室，将玻璃塞塞好，且在入口出加水封好。防止氨损失和漏气。同时要严防反应室里分解试样和碱液倒吸出来。反应室内液量不能太多。3.7 控制好水蒸气发生器温度，不能过高（测定结果偏高）；不能过低（测定结果偏低）。可用一台调压器与电炉串联，以硫酸铵校正值确定电压大小。3.8 应随时用分析纯硫酸铵代替试样来校正加碱，蒸馏和滴定各步骤地操作。3.9 蒸馏完毕，拔入口处玻璃塞动作要轻柔。防止反应室

15、内碱液倒喷入冷凝管内，避免给下一个试样分析带来较大的误差。3.10 滴定操作禁止放长线滴定。3.11 每换一批药品试剂、标液要用蔗糖（分析纯）代替试样进行空白测定。3.12 消化温度应控制在400至420内。消化器控温器应良好，电阻丝应使用专用配套电阻丝，拉伸应均匀，使炉内温度均匀，没有房消化管的孔上用瓷坩埚盖盖上。CP(%)(V2-V1)C0.0146.25100 /WV1V式中：V2滴定试样时所需酸标准溶液体积，ml；V1滴定空白时所需酸标准溶液体积，ml；C盐酸标准溶液的物质的量浓度，mol/L；W试样重量g；V试样分解液总体积，ml；V1试样分解液蒸馏用体积，ml；0.014氨的摩尔质

16、量g/m mol；6.25氨换算成蛋白质的平均系数。在实际分析应用中通常V1=0.1 ml V=100 ml如若C（HCL）=0.0493 mol/ ml V1=5 ml那么粗蛋白质计算公式可简化为：CP(%)(V2-0.10)0.04930.0146.25100 /W5100饲料中粗蛋白的测定（GB/T6432-94）本标准参照采用ISO5983-1979动物饲料氮含量的测定和粗蛋白含量的计算1、主题内容与适用范围 本标准规定了饲料中粗蛋白含量的测定方法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料。 2、适用范围 本标准适用于配合饲料，浓缩饲料和单一饲料。 3、原理 凯氏法测定试样中的含N量

17、，即在催化剂作用下，用H2SO4破坏有机物，使含N物转化成（NH4）2SO4，加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出N含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出CP含量。 4、试剂 4.1 H2SO4（GB625） ：化学纯，含量为98%，无氮。 4.2 混合催化剂 ：0.4g硫酸铜，5个结晶水（GB625）；6克硫酸钾（GB3-920）或硫酸钠（GB3-908），均为化学纯，磨碎混匀。 4.3 NaOH （GB629）：化学纯，40%水溶液（m/V） 4.4 硼酸 （GB628）：化学纯，2%水溶液（m/V）4.5 混合指示剂：甲基红（HG3-958）0.1%乙醇溶液，溴甲酚

18、绿（HG3-1220）0.5%乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。 4.6 HCl标准液 ：邻苯二甲酸氢钾法标定，按GB601制备。 4.6.1 HCl标准液：C（HCL） = 0.1mol / L。8.3ml盐酸（GB622，分析纯），注入1000ml蒸馏水中。 4.6.2 HCl标准液：C（HCL） = 0.02mol / L。1.67ml盐酸（GB622，分析纯），注入1000ml蒸馏水中。 4.7 蔗糖 （HG 3-1001）：分析纯。 4.8 硫酸铵 （GB 1396）：分析纯，干燥。 4.9 硼酸吸收液：1%硼酸水溶液1000ml，加入0.1%溴甲酚绿0.1 %乙醇

19、溶液10ml，0.1%甲基红乙醇溶液7ml，4%氢氧化钠水溶液0.5ml，混合，置于阴凉处保存期为一个月（全自动程序用）5、仪器设备 5.1 实验室用粉碎机或研钵 5.2 分样筛：孔径0.45mm（40目） 5.3 分析天平：敢量0.0001g 5.4 消煮炉或电炉 5.5 滴定管：酸式，10、25ml 5.6 凯式定N仪 5.7 锥形瓶：150、250ml 5.8 容量瓶：100ml 5.9 消煮管：250ml 5.10 凯氏烧瓶：250ml 5.11 凯氏蒸馏装置：常量直接蒸馏式或半微量水蒸气蒸馏装置 6、试样的选取和制备 选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g，粉碎后全部通过40目筛

20、，装于密封容器中，防止试样成分的变化。7、分析步骤 7.1 仲裁法7.1.1 试样的消煮，称取试样0.5-1.0g（含氮量5-80mg），准确至0.0202g，放入消煮管中加入6.4g混合催化剂与试样混合均匀，再加入12ml H2SO4将消煮瓶置于电炉上加热，开始小火，待样品焦化、泡沫消失后，再加强火力（360-410）直至吴透明的蓝绿色，然后再继续加热至少2h。 7.1.2 NH3的蒸馏 (蒸馏步骤检验见附录A) 常量蒸馏法： 将试样消煮液（7.1.1）冷却，加入60-100ml蒸馏水，摇匀，冷却。将蒸馏装置（5.11）的冷凝管末端浸入装有25ml硼酸（4.4）吸收液和2滴混合指示剂（4.5

21、）的锥形瓶（5.7）内。然后小心地向凯氏烧瓶（5.10）中加入50ml氢氧化钠溶液（4.3），轻轻摇动凯氏烧瓶（5.10），使溶液混匀后再加热蒸馏，直至流出液体积为100ml。降下锥形瓶，使冷凝管末端离开液面，继续蒸馏1-2min，并用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均需流入锥形瓶内，然后停止蒸馏。 将装有硼酸吸收液和指示剂的锥形东半球，放在冷凝管末端，装好消煮管，打开碱并关，至消煮管中变为黑色，并闭碱开关，打开气天关，至锥形瓶内液体由粉红色变为橙黄色，到流出液体体积为150ml时停止，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均需流入锥形瓶内，然后停止蒸馏。 半微量蒸馏法： 将试样消煮液（7.1.1）冷却，加入

22、20ml蒸馏水，转入100ml容量瓶中，冷却后用水稀释至刻度，摇匀，作为试样分解液。将半微量装置（5.11）的冷凝管末端浸入装有20ml硼酸（4.4）吸收液和2滴混合指示剂（4.5）的锥形瓶（5.7）内。蒸汽发生器（5.11）的水中应加入甲基红指示剂数滴，硫酸数滴，在蒸馏过程中保持此液为橙红色，否则需补加硫酸。准确移取试样分解液10-20ml注入蒸馏装置（5.11）的反应室中，用少量蒸馏水冲洗进样入口，塞好玻璃入口塞，再加10ml氢氧化钠溶液（4.3），小心提起玻璃塞使之流入反应室，将玻璃塞塞好，且在入口处加水密封好，防止漏气。蒸馏4min降下锥形瓶（5.7）使冷凝管末端离开吸收液面，再蒸馏1

23、min，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均需流入锥形瓶内，然后停止蒸馏。 注：和蒸馏法测定结果相近，可任选一种。 3、滴定 蒸馏后的吸收液用HCl标准溶液滴定，溶液由橙黄色变为粉红色为终点。 3、空白测定 称取蔗糖0.5g代替试样进行空白测定 七、计算 CP(%)(V2-V1)C0.0146.25100 /WV1V式中：V2滴定试样时所需酸标准溶液体积，ml；V1滴定空白时所需酸标准溶液体积，ml；C盐酸标准溶液的物质的量浓度，mol/L；W试样重量g；V试样分解液总体积，ml；V1试样分解液蒸馏用体积，ml；0.014氨的摩尔质量g/m mol；6.25氨换算成蛋白质的平均系数。第四节 饲料水溶

24、性氯化物测定方法（GB6439-86）佛尔哈德法-硫酸铁作指示剂法在酸性条件下，先加入已知过量的硝酸银标准溶液于澄清的待测溶液中，用硫酸铁做指示剂，再用硫酸氰铵标准溶液反滴定过量的硝酸银，计算氯化物含量作为饲料中盐分的 估计。反应如下：Ag+CL-= Ag CL剩余过量的硝酸银发生如下反应：Ag+SCN-= Ag SCN当滴定达终点时，稍过量的SCN-与硫酸铁中的Fe+反应生成Fe（SCN）2+红色络合物（量少时为橙色），指示终点的到达，反应如下：Fe3+ SCN-= Fe（ SCN）2+（橙色）需注意的是当到达理论变色点时，溶液呈橙色，如用力过分激烈摇动沉淀，则橙色又消失，再加硫氰酸铵标准溶

25、液试，橙色又出现。如此反复进行，给测定结果造成极大误差。为什么发生此现象呢？原因是此时放生沉淀转化作用。由于硫氰酸银沉淀的溶液积远小于氯化银沉淀的溶度积。KS.P（Ag SCN）=1.210-12KS.P（Ag CL）=1.610-10滴定到达终点时，溶液中存在着以下3个平衡：Ag+ CL-= Ag CL白色Ag+ SCN-= Ag SCN白色 Fe3+ SCN-= Fe（ SCN）2+橙色由于：KS.P（Ag SCN）KS.P（Ag CL）因此在平衡时：Ag+Ag SCNAg+ Ag CL而在Fe(SCN) 2+络合物的平衡反应中，SCN-的溶度和Ag CL沉淀平衡反应中的Ag+的溶度的乘积

26、大于KS.P（Ag SCN），这样溶液中个平衡体系遭到破坏：Ag CL CL-+ Ag+ Fe（ SCN）2+ Fe3+ SCN-（无色） 橙到达理论终点Ag SCN（砖红色）反应不断的进行，直到转化出来的CL溶度为SCN-溶度的130倍，转化作用才停止。 CL- / SCN- KS.P（Ag CL）/ KS.P（Ag SCN）1.610-10 / 1.210-12 130这样使测定结果误差极大，为了避免上述现象产生，一是不要过分剧烈摇动。二是通常在Ag CL沉淀完全后，在加入硫氰酸铵标液之前，加入1-2毫升2-二氯乙烷有机溶剂，使Ag CL沉淀进入2-二氯乙烷层中不与SCN-接触，此操作成功

27、的关键在于充分摇动Ag CL沉淀，使Ag CL沉淀被1.2-二氯乙烷有机溶剂包裹起来。莫尔法-铬酸钾作指示剂（快速测定法）莫尔法是以铬酸钾为指示剂，在中性或弱碱性介质中用硝酸银标准溶液测定卤素化合物含量的方法（如Na CL）。现已测定氯离子含量为例，说明指示剂的作用原理。Ag+ CL-= Ag CL白色当沉淀完全后，稍过量的硝酸银标准溶液与溶液中的铬酸钾指示剂反应生成个酸银的砖红色沉淀（量少时为橙色）。2Ag+CrO42-= Ag2 CrO4(橙色)指示理论终点的到达。1）、指示剂的作用原理：分析出Ag CL沉淀的原因是由于Ag CL和Ag2 CrO4的溶度积不同，因而发生分级沉淀所致。KS.

28、P（Ag CL）=1.610-10KS.P（Ag2 CrO4）=210-12设溶液中CL和CrO42-溶度均为0.1 mol/ L则开始沉淀Ag CL和Ag2 CrO4所需要的Ag+溶度分别为： Ag+ Ag CL= KS.P（Ag CL）/ CL- = 1.610-10 / 0.1=1.610-9 mol/L Ag+ Ag2 CrO4= KS.P（Ag2 CrO4）/ CrO42 = 210-12 / 0.1= 4.510-6（mol/L）由此可见，Ag CL开始沉淀所需的Ag+浓度小得多。因此当加入AgNO3标准溶液时，Ag+和CL-的乘积首先超过Ag CL的溶度积而析出Ag CL沉淀。待

29、CL-消耗完之后，再滴入AgNO3才生成（Ag2 CrO4的沉淀。2）、铬酸钾指示剂的适合用量计算：当CL-与Ag+反应达到理论终点时，形成Ag CL的饱和溶液，在饱和溶液中Ag+=CL-所以Ag+ CL- = KS.P（Ag CL）=1.610-10 = Ag+2Ag+ = KS.P（Ag CL） = 1.610-10 = 1.3410-5（mol/L）到达理论终点后，Ag2 CrO4开始析出测定，此时所需CrO42-浓度应按下式计算：Ag+2 CrO42-KS.P（Ag2 CrO4）CrO42-KS.P（Ag2 CrO4）/ Ag+ = 210-12 / 1.610-10 = 1.310-

30、2（mol/L）经实验证明CrO42-最适宜的用量是5%的溶液，每次加1-2ml，莫尔法测定CL-的最适宜的PH值是6.5-10.5。根据以上理论计算，为使测定结果准确，需控制以下几个滴定条件：1）、K2CrO4溶液的浓度因为K2CrO4溶液的浓度过高，会使重点过早到达，结果偏低，反之K2CrO4溶液过稀，会使终点推迟，结果偏高，一般涌5%的K2CrO4溶液加入2ml或是10%K2CrO4溶液1ml即可。2）、溶液的酸度：此沉淀反应在中性或碱性介质进行。在酸性介质中进行会生成HCrO4-离子，不生成Ag2CrO4沉淀。 Ag2CrO4+H+ = 2Ag+ + HCrO4-在强碱性溶液中不生成A

31、g CL沉淀。2Ag+ + OH- = Ag 2O（黑） + H2O因此莫尔法滴定的最适宜PH范围是6.5-10.5。3）、滴定过程中要充分摇动三：溶液的配制：1、10%（m/v%）铬酸钾指示剂，取铬酸钾10克，加水100 ml使之溶解。2、硝酸银的标准溶液：C（AgNO3）=0.05 mol/L2.1配制：称取分析纯硝酸银8.75克，溶于1升水中，储存于棕色瓶中；2.2标定：称取500-600灼烧至恒重的基准氯化钠0.1克（精确至0.0001克）溶于50毫升水中，加1毫升5%的铬酸钾指示剂，用硝酸银溶液滴定至溶液呈棕红色。计算：C（AgNO3）=G / V0.05844式中：G基准氯化钠的重

32、量（克） V硝酸银溶液的用量（毫升） 0.05844与1.00毫升硝酸银标准溶液C（AgNO3）相当的以克表示的氯化钠的质量。四：莫尔法（快速滴定法）操作要点PH范围6.5-10.5铬酸钾溶液（100g/L）用量1毫升滴定过程要充分摇动。滴定终点要到砖红色沉淀出现一分钟不退色为止。鱼粉及其它难以观察终点的样品必须用国标仲裁法测定。在滴定终点以前，溶液中还没有反应完的少量CL-会被Ag CL沉淀吸附，使Ag2 CrO4过早的出现而误认为终点。因此滴定过程中应充分摇动，使被Ag CL沉淀吸收的CL-解吸出来。饲料中水溶性氯化物的测定方法 GBT 643992（ HYPERLINK mhtml:fi

33、le:/C:Documents%20and%20Settingshyserp桌面相关标准检测标准饲料中水溶性氯化物的测定方法.mht!file:/C:InetPubwwwrootdatagbgb_b7.htm t main 畜禽饲料与添加剂）1主题内容与适用范围本标准规定了用硫氰酸盐反滴定测定饲料中可溶性氯化物的方法。本标准适用于各种配合饲料、浓缩饲料和单一饲料。检测范围氯元素含量为060mg。2引用标准GB 1.4标准化工作导则化学分析方法标准编写规定GB 6682实验室用水规格3方法原理溶液澄清，在酸性条件下，加入过量硝酸银溶液使样品溶液中的氯化物形成氯化银沉淀，除去沉淀后，用硫氰酸铵回滴

34、过量的硝酸银，根据消耗的硫氰酸铵的量，计算出其氯化物的含量。4试剂实验室用水应符合GB 6682中三级水用水的规格。使用试剂除特殊规定外应为分析纯。4.1硝酸。4.2硫酸铁（60gL）：称取硫酸铁Fe2（SO4）3xH2O60g加水微热溶解后，调成1000mL。4.3硫酸铁指示剂：250gL的硫酸铁水溶液，过滤除去不溶物，与等体积的浓硝酸混合均匀。4.4氨水：1+19水溶液。4.5硫氰酸铵c（NH4CNS）=0.02moLL：称取硫氰酸铵1.52g溶于1000mL水中。4.6氯化钠标准贮备溶液：基准级氯化钠于500灼烧1h，干燥器中冷却保存，称取5.8454g溶解于水中，转入1000mL容量瓶

35、中，用水稀释至刻度，摇匀。此氯化钠标准贮备液的浓度为0.1000molL。4.7氯化钠标准工作液：准确吸取（4.7）溶液20.00mL于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。此氯化钠标准溶液的浓度为0.0200molL。4.8硝酸银标准溶液c（AgNO3）=0.02molL：称取3.4g硝酸银溶于1000mL水中，贮于棕色瓶内。4.8.1体积比：吸取硝酸银溶液20.00mL，加硝酸4mL，指示剂2mL，在剧烈摇动下用硫氰酸铵溶液滴定，滴至终点为持久的淡红色，由此计算两溶液的体积比F，见式（1）：F = 20.00 / V2（1）式中：F硝酸银与硫氰酸铵溶液的体积比；20.00硝酸银溶液的体

36、积，mL；V2硫氰酸铵溶液体积，mL。4.8.2标定：准确移取氯化钠标准溶液10.00mL，于100mL容量瓶中，加硝酸4mL，硝酸银标准溶液25.00mL，振荡使沉淀凝结，用水稀释至刻度，摇匀，静置5min，干过滤入干锥形瓶中，吸取滤液50.00mL，加硫酸铁指示剂2mL，用硫氰酸铵溶液滴定出现淡红棕色，且30s不褪色即为终点。硝酸银标准溶液浓度计算见式（2）： C（AgNO3）m（201000）（10100）/ 0.05845（V1FV10050）（2）式中：c（AgNO3）硝酸银标准溶液摩尔浓度，molL； m氯化钠质量，g； V1硝酸银标准溶液体积，mL； V2硫氰酸铵溶液体积，mL；

37、 F硝酸银与硫氰酸铵溶液的体积比； 0.05845与1.00mL硝酸银标准溶液c（AgNO3）1.0000molL相当的以克表示的氯化钠质量。所得结果应表示至四位小数。5仪器设备5.1实验室用样品粉碎机或研钵。5.2分样筛：孔径0.45mm（40目）。5.3分析天平：分度值0.1mg。5.4刻度移液管：10、2mL。5.5移液管：50、25mL。5.6滴定管：酸式，25mL。5.7容量瓶：100、1000mL。5.8烧杯：250mL。5.9滤纸：快速，直径15.0cm；慢速，直径12.5cm。6样品的选取和制取选取有代表性的样品，粉碎至40目，用四分法缩减至200g，密封保存，以防止样品组分的

38、变化或变质。7测定步骤7.1氯化物的提取称取样品适量（氯含量在0.8以内，称取样品5g左右；氯含量在0.81.6，称取样品3g左右；氯含量在1.6以上，称取样品1g左右），准确至0.0002g，准确加入硫酸铁溶液50mL，氨水溶液100mL，搅拌数分钟，放置10min，用干的快速滤纸过滤。7.2测定准确吸取滤液50.00mL，于100mL容量瓶中，加浓硝酸10mL，硝酸银标准溶液 25.00mL，用力振荡使沉淀凝结，用水稀释至刻度，摇匀。静置5min，干过滤入150mL干锥形瓶中或静置（过夜）沉化，吸取滤液（澄清液）50.00mL，加硫酸铁指示剂10mL，用硫氰酸铵溶液滴定，出现淡桔红色，且3

39、0s不褪色即为终点。8测定结果的计算氯化物含量用氯元素的百分含量来表示，见式（3）：Cl（）（V1V2F10050）c1500.0355（m50）100（3）式中：m样品质量，g； m氯化钠质量，g； V1硝酸银溶液体积，mL； V2消耗硫氰酸铵溶液体积，mL； F硝酸银与硫氰酸铵溶液的体积比； 0.05845与1.00mL硝酸银标准溶液c（AgNO3）1.000 omolL相当的以克表示的氯元素的质量。所得结果以表示至二位小数。9允许差每个样品应取两份平行样进行测定，以其算术平均值为分析结果。氯含量在3以下（含3），允许绝对差0.05；氯含量在3以上，允许相对偏差3。附录A水溶性氯化物快速测

40、定法（补充件）称取510g样品，准确至0.001g，准确加蒸馏水200mL，搅拌15min，放置15min，准确移取上清液20mL，加蒸馏水50mL，10铬酸钾指示剂1mL，用硝酸银标准溶液滴定，呈现砖红色，且1min不褪色为终点。计算见式（A1）：Cl（）V2c2000.0355（m20）100（A1）式中：同本标准式（3）。第五节 饲料中钙的测定方法（GB/T6436-2002）高锰酸钾法原理：样品经灰化后，在酸性溶液中，钙和草酸生成草酸钙，经硫酸溶解后，用高锰酸钾标准溶液滴定，从而计算出钙的含量，反应式如下：CaCl2+(NH4)2C2O4CaC2O4+2NH4ClCaC2O4+H2SO

41、4CaSO4+H2C2O42KMnO4+5H2C2O4+3 H2SO4K2SO4+2MnSO4+10CO2+8H2O特点：准确性高，分析周期长，一般采用EDTA络合滴定快速法。络合滴定法原理：用EDTA标准溶液滴定钙，当加钙红（以H3In表示其分子式）为指示剂，在碱性溶液中为蓝色，与钙离子络合后生成红色络合物，反应如下：（钙红指示剂法是原老国标的一种方法,新国标是钙黄指示剂法。钙红指示剂法会产生指示剂封闭现象，即指示剂不变色，此时加硫化钠即可清除08-01-17）碱性溶液Ca2+ HIn2- Ca In-+H+（溶液呈紫红色）蓝色 红色当以EDTA溶液进行滴定时H2Y2-逐渐夺取CaIn-络合

42、物中的Ca2+而生成更稳定的络合物Ca Y2-（无色）,反应如下：碱性Ca In-+H2Y2-CaY2- + HIn2-红色 （无色） 蓝色直到Ca In-完全转变为CaY2-，同时有力出蓝色的HIn2-。当溶液有紫红色变为纯蓝色是，即为滴定终点。终点颜色变化敏锐。钙红指示剂为黑色粉末，在水溶液和乙醇溶液中均不稳定，一般于干燥的NaCL混合后使用（混合比例1：100）。2、滴定条件：2.1 溶液酸度：碱性（1滴孔雀石绿指示剂，加200g/LNaOH至溶液无色，再过量NaOH 2毫升）可排除Mg2+的干扰：Mg2+2OH-= Mg（OH）22.2 加掩蔽剂排除AI3+、Fe3+、Mn2+等对Ga

43、2+的干扰；加三乙醇胺可掩蔽AI3+、Fe3+、Mn2+等离子对Ga2+离子测定的干扰。加盐酸羟胺主要排除Fe3+的干扰。4 Fe3+2HONH3CL 4 Fe2+N2O+H2O+4H+2HCL3、操作要点：3.1 湿法消化时不能蒸干。3.2 干法接灰分分析加盐酸（1+1）10毫升，浓硝酸数滴，小心微沸5分钟，一要防止是液溅出来；二要防止试液被煮干。3.3 防止转移损失，转移前可稍多加一点水，可减少损失相对量。3.4 淀粉溶液要新鲜，绝不能产生沉淀。配制时应把称好的淀粉用少量蒸馏水润湿，后冲入煮沸的水中，搅拌，继续煮沸至澄清。3.5 溶液要按顺序加并且每加一种都必须摇匀后才能加下一种。3.6

44、指示剂要保持干净。3.7 加盐酸羟胺后必需立即滴定。4、1mg/ml或0.0010g/ml钙标准溶液的配制。4.1 选用基准碳酸钙。配制1000 ml钙标液。4.2 计算M= CV / f1000 = 11000 / MCa / MCaCO31000 = MCaCO3 / MCa = 100.087 / 40.078 =2.497g4.3 配制：称取2.497 g于105-110干燥3h冷却的基准碳酸钙，溶于40 ml盐酸（1+3）中加热赶除二氧化碳，冷却、用水转移至1000 ml容量并中稀释至刻度。第六节 饲料中总磷的测定方法（GB/T6437-2002）一、原理：（钒钼黄比色法）先将试样中

45、有机物破坏，使磷游离出来，在酸性溶液中，用钒钼酸铵处理，生成黄色钒钼酸铵络合物(NH4)3PO4.NH4VO3.16MoO3在波长400nm下进行比色测定。二、溶液配制：1、钒钼酸铵显色试剂配制：B、250 ml浓硝酸（AR）A、1.25g偏钒酸铵 小纸槽 1000 ml容量瓶 E、冷却条件下慢慢转入C、钼酸铵（AR）25g（50 ml小烧杯中称） 1000 ml大烧杯中D、400 ml水2、磷标液溶液的配制（50微克/ml）2.1计算： M= CV/1000f = 5010-3103 / Mp / MKH2PO41000 =5010-3MKH2PO4 / Mp =5010-3 136.09

46、/ 31=0.2195g2.2配制：称取于105干燥1小时，并冷却后的分析纯磷酸二氢钾 0.2195克，溶解于蒸馏水中定量转入1000ml容量瓶中，加硝酸3ml，用蒸馏水稀释至刻度，为50微克/ml的林标准溶液。三、数据处理（用回归方法处理）：标准曲线方程的导出，用回归分析方法求出的直线方程是误差最小的一条直线方程。1、实验数据：磷标准液的毫升数1.02.04.08.010.0磷的微克数50100200400500吸光度（A）0.0540.1120.2180.4370.5452、数据处理：y=A+Bx式中：y吸光度 x磷的微克数x（磷的微克数）y(吸光数A)xyx2y2500.0542.725

47、002.91610-31000.11211.2100000.0125442000.21843.6400000.0475244000.437174.81600000.1909695000.545272.52500000.297025X=1250Y=1.366XY=504.8X2=462500Y2=0.550978X=250Y=0.2732 Lxx =x2 - (x)2 / n = 462500 - (1250)2 / 5 = 150000 Lyy =y2 - (y)2 / n = 0.550978 - (1.366)2/ 5=0.177787 Lxy=x.y- X.Y / n= 504.8 -

48、12501.366 / 5 =163.3 B= Lxy / Lyy= 163.3 / 150000 =1.0910-3A=y-Bx=0.2732-1.0910-3250=710-4相关系数：R= Lxy Lxx Lyy = 0.999978 = 1R=1说明y与x之间有在严格的函数关系，所有的实验点全部落在回归直线上y=A+Bx=710-4+1.0910-3xx= y-710-4 / 1.0910-3代入GB/T6437-1992计算公式得：（v=5ml）P（%）= x / 100mv = 1 / 500my-710-4 / 1.0910-3 = y / 1.0910-3500m = 1.83

49、49y / m 注意：710-4 / 5001.0910-3m可略去不计所以只要知道试样的质量m，测得其吸光度值Y就可以代入上式计算。下面介绍一种直接用计算器处理的方法，计算器CAsiofx-3600p将数据x,y成对输入计算器内。V(ml)-磷标准液的毫升数。操作程序：第一步：MODE2INVAC第二步：x ( y RUN第三步：INV 7 A值INV 8 B值INV 9 R值(相关系数)得：A=1.0310-3 B=1.0910-3 R=0.999978 y= A+ B x=1.0310-3 + 1.0910-3 x = y-1.0310-3 / 1.0910-3 P% = x (g) 1

50、0-6 mV / V0100 （V0=100ml、V=5ml）=1 / 500my-1.0310-3 / 1.0910-3= y / 1.0910-3500m= 1.8349y / m注意：710-4 / 5001.0910-3m可略去不计四、722型光栅分光光度计的使用方法：1、打开比色室门盖，预热20分钟。2、将测量旋钮打到“T”档。3、用空白调“0”和“100”。4、将测量旋钮打到“A”档，以空白调消光零。5、拉或推比色皿推杆，测定试样吸光度值。6、测量完毕，将测量旋钮打到“T”档，盖好比色室门盖。五、操作注意点：1、煮沸10min，一要防止煮干，二是防止溅出来。2、加钒钼酸铵显色剂定溶

51、后，要放置20 min，冬天由于气温低，放置30 min。3、由于温度变化对标准曲线有一定影响，建议钒钼酸铵显色剂一次不宜配得太多，以1000 ml（用半个月），每配一次显色剂做一次标准曲线。4、随时查核，校正分光光度计上的波长选择是否在400nm处。5、必须用跟试样同步显色，定容的空白来调分光光度计的“0”、“100”和“消光零”。不准将前几天的空白来调分光光度计的“0”、“100”和“消光零”。6、防止转移损失，转移前可适当加点水，减少损失相对量。7、测磷酸氢钙、磷酸二氢钙、骨粉、骨粒、鱼粉等高磷样品，样品称样量不能太小，要注意稀释，使样品测定的吸光度尽量在标准曲线的中部，约为0.5左右。

52、样品吸量一定要准确。8、换灯后一定要重新校正波长，并重新做曲线。9、比色皿要保持清洁。第七节 枸溶磷含量的测定（HG2636-2000）1、方法提要：用中性柠檬酸铵溶液溶解和提取试样中的磷酸银，按磷含量测定方法测磷。2、 操作要点：2.1 柠檬酸铵溶液PH值要准确。2.2 定时摇动。2.3 其它同总磷的测定。第八节 水溶性磷的测定（HG2861-1997）方法提要：试样用水溶解后，测定水溶液中的磷含量。操作要点：主要注意转移时不要损失，其它中总磷的测定。第九节 酸价的测定（GB/T5530-1998）原理：试样溶解在乙醚和乙醇的混合剂中，然后用氢氧化钾-乙醇标准溶液滴定游离脂肪酸。操作要点：2

53、.1 乙醚属于易燃易爆麻醉药品，操作应当在通风良好的防暴通风橱内进行。2.2 氢氧化钾-乙醇标准溶液配制时应吸取氢氧化钾饱和溶液。2.3 用水采用无二氧化碳的水。2.4 鱼粉酸价测定时，样品按一般项目用扬要求制样。第十节 粗纤维的测定（GB/T6434-1994）1 、原理：用浓度准确的酸和碱，再特定条件下消煮样品，再用乙醇出去醇可溶物，经高温灼烧扣除矿物质的量为粗纤维。它不是一个确切的化学实体，只是在公认强制规定的条件下测出来的慨略成份，其中以粗纤维为主，还有少量半纤维和木质素。2、操作注意要点：2.1 加热电炉必须能连续调温，精心控温，始终保持溶液微沸。2.2 过滤转移时应避免损失。2.3

54、 古氏坩埚填充石棉应精心操作，不能太厚太薄。2.4 酸碱的浓度在规定的准确度范围内。第十一节 粗脂肪的测定（GB/T6433-1998）原理：索氏脂肪提取器中用乙醚提取的重量，称提取的重量，除脂肪外还有有机酸、磷脂、脂溶性维生素、叶黄素等，因而测定结果称为粗脂肪或乙醚提取物。操作要点：2.1 抽提瓶一定按严格标准要求预先恒重。2.2 称量自然状态下（应用基）的样品，称好，包扎好后，必须按标准规定预先在105烘箱中烘120分钟。2.3 注意控制乙醚的用量。2.4 注意控制水温及水淹没抽提瓶的高度来控制好回流速度。2.5 抽提瓶加热抽提时不能直接接触自来水。2.6 最后一次称量时注意检查抽提瓶内油

55、脂情况，看是否有样品被抽下来。2.7 抽提时间要足够，一般为5-6小时。2.8 不能用称滤纸包代替抽提瓶。2.9 注意检查乙醚质量，每换一批乙醚应作一次空白。2.10 注意检查冷却水情况，避免太大太小。2.11 操作应在通风良好的防爆通风橱内进行。通风橱内不能进行明火操作，确保安全。第十二节 容重的测定原理：利用量筒测出体积，再用台秤称出重量，从而计算出容重。仪器和用具：2.1 ：1000毫升量筒2.2：谷物选筛：上层筛孔直径12.0mm,下层筛孔直径3.0 mm。2.3：架盘天平：最大称量1000克，感量1克。3、操作要点：3.1样品以自然状态填充至刻度即可，不能摇。3.2水分含量大于18.

56、0%时应按GB1353之规定。3.3有争议时应按GB1353用容重器按规定测定。第十三节 砂分的测定1、原理：样品经灰化后再以酸处理，酸不溶性灼烧物为砂分。2、操作步骤：称取2克左右的样品与50毫升坩埚中，灰化测定后加盐酸（1+1）20毫升，两滴浓硝酸，加热微沸5分钟，用中速滤纸过滤，并用加热蒸馏水洗净至滤液不呈酸性为止。（PH试纸检测）收集滤液可测定钙磷（注意合理稀释及取用量）而后将滤纸和滤渣一起移入原坩埚中，在130烘箱中烘干，再于电炉上低温灰化后移入550-600马福炉中灼烧30分钟，取出在空气冷却1分钟后，再在干燥器中冷却30分钟，称重。结果计算： 按下式计算砂分的含量：X1=m2-m

57、1 / m1-m0 100 X1样品中砂分含量，%m0坩埚质量，（g）m1坩埚加试样的总质量, （g）m2灼烧后坩埚加试样的质量，（g）操作要点：4.1坩埚预先用稀盐酸煮过1-2小时并洗净，在马福炉中加热30分钟取出，在空气中冷却1分钟，放入干燥器中冷却30分钟，称重。4.2煮沸时要微沸，绝不能煮干。4.3滤纸必须要用无灰定量滤纸。4.4一定要洗至滤液物氯离子（用硝酸银检查）或滤液不呈酸性（用PH试纸检查）4.5如有异议按（GB/T19164-2003）鱼粉之附录A操作。第十四节 游离水分测定原理：加丙酮使游离水溶解，被洗去，然后再低温下烘干除去丙酮，所减少的重量即为游离水。操作（GB2636

58、-2000操作）操作要点3.1玻璃砂坩埚一定要预先恒重。3.2玻璃棒一定要细，搅拌要轻，搅拌后一定要用丙酮洗干净，洗液并入坩埚中，避免样品损失。第十五节 纯（真）蛋白测定1、水溶性的胶体溶液，与重金属离子(铜离子)作用，胶体变性产生沉淀，过量的铜离子与碱作用产生氢氧化铜而发生共沉淀，陈化后，用热水洗涤，将水溶性含氮化合物洗去，而不溶性与可溶性蛋白就留在沉淀中，烘干后再用凯氏定氮法测定氮，计算出纯（真）蛋白的含量 。2.、操作要点：2.1称样量不能太小。2.2沉淀时最好一个一个操作，加氢氧化钠时不用加热。一定要防止加热过度氢氧化铜分解，产生胶体，过滤时，使水溶性蛋白损失，而使结果偏低。处理好后，

59、稍沉后，上层溶液应澄清透明。2.3沉淀要烘干一点，水分太多会降低硫酸浓度，易起泡，消化时间会加长。2.4如起泡而黑色物质附于消化避，应取出稍冷，后将其冲下继续消化。2.5由于氢氧化钠会消耗些酸，硫酸的加入量比粗蛋白多5毫升，为18至20毫升。2.6消化时间一般会粗蛋白长些，所以消化时间也会同时消化的粗蛋白长些，一般应坚持消化至变绿后再消化2小时。2.7真蛋白消化后溶液易结晶，稍冷后应及时加水，避免结晶后转移时不易洗净。2.8蒸馏及其它操作同粗蛋白测定。方法二： 将样品充分混匀后分成两份，准确称取。一份用于常规凯氏定氮法测定其粗蛋白质含量，将另一份加五倍（50ml）的三氯乙酸 溶液（10%的水溶

60、液）搅动，静置10min后全部转移到漏斗中过滤，再用五倍（50ml）三氯乙酸溶液洗涤滤渣两遍，于105烘干按常规测定。第十六节 蛋白溶解度1、方法原理：氢氧化钾蛋白质溶解度可以反映大豆粕产品加热过度的情况。不同加热程度的大豆粕，氢氧化钾蛋白溶解度不同。先测定大豆粕样品在规定条件下，可溶于氢氧化钾溶液中的粗蛋白质含量，再测定同一大豆粕样品中总的粗蛋白含量，计算出氢氧化钠蛋白质溶解度。2、操作（按GB/T19541-2004）3、操作要点3.1样品细度对结果影响巨大，一定要保证样品过60目（孔径0.25mm）。3.2吸样时不要把移液管下部的沉淀冲起来了，可把清液移入干净干燥的小烧杯中再吸样。3.3